大黄多糖传统水提法最佳工艺优化研究.doc

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1、大黄多糖传统水提法最佳工艺优化研宄作者：纪耀华，马爱民，孙莹，刘晓茵【摘要】目的确定大黄多糖的最佳提取条件。方法以大黄多糖的含量为指标，以提取温度、提取时间、提取次数、料液比为因素，利用单因素实验确定因素水平，正交实验法进行实验设计，对水提取法提取大黄多糖的工艺进行系统研究。结果大黄多糖的最佳工艺条件为：提取时间3h，提取温度95°C,料液比1:20。结论该方法实验结果可作为提取大黄多糖的工艺制定的依据。【关键词】大黄；多糖;提取工艺；正交实验大黄为廖科植物掌叶大黄RheumpalmatumL.，唐古特大黄RheumtanguticumMaxim.exBalf或药用大黄Rheumofficin

2、aleBaill的干燥根及根茎，具有泻下、健胃、清热解毒等功效。近年来，经大量实验证实大黄多糖不仅具有抗衰延年［1］、降血糖［2］、治疗胃溃疡性结肠炎［3］、改善血脂［4］、抗保护神经［5］等作用，并且还可以通过提高机体免疫力达到抗肿瘤的作用［6］。因此，大黄多糖作为中药和生物药物的重要成分，毒性低，性质稳定，营养价值高，同时具有多方面的生理活性，无论是进行保健食品还是药品的开发和利用，均具有广阔的应用前景。目前对大黄多糖的药理研究较多，而对其提取工艺研究较少，特别是大黄多糖的提取工艺优化研究笔者未见国内外文献报道。本实验以大黄多糖的含量为指标，采用单因素考察和正交实验法进行实验设计，对传统的

3、水提取法提取大黄多糖的工艺进行系统研究，为大规模工业生产大黄多糖提供可靠依据。1仪器与试药仪器U1901双光束紫外可见分光光度计（北京普西通用仪器责任有限公司），电子天平BS224S（赛多利斯科学仪器北京有限公司）。药品大黄（购于长春药材公司）、苯酚、葡萄糖、浓硫酸、乙醇、乙醚、丙酮等，均为分析纯试剂。2方法大黄多糖样品液的制备精密称取干燥至恒重的大黄g，加水提取，提取液浓缩后定容于100ml的容量瓶，室温冷却后，吸取5ml提取液，加入5倍体积95%的乙醇，静置过夜，离心（3000r/min），所得沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤，得粗多糖，加蒸馏水定容于100ml容量瓶中得大黄多糖样品液供

4、测定用。多糖的测定方法大黄多糖的测定以葡萄糖为标准品，采用碗酸-苯酸比色法。标准样品溶液的配制精密称取mg干燥至恒重的无水葡萄糖，加入100ml容量瓶中，用水溶解至刻度，使成Pg/ml即得。标准曲线的制备［7］分别精密吸取上述标准样品溶液，，，，ml至10ml容量瓶中，然后依次加入，，，，ml蒸十留水，再各加ml6%苯酴试剂，混匀，精密加入5ml浓硫酸，振摇后放置5min，置沸水浴中加热15min,立即转入冷水浴中冷却至室温，以蒸馏水为空白，在490nm波长处测定吸收度，即得标准曲线，以浓度C对吸收度A回归方程:A=8C+4，r=2。大黄多糖样品液的测定精密吸取大黄样品液ml，按“”标准曲线的

5、制备项下的方法操作。3结果与分析单因素实验结果提取次数对多糖得率的影响见图1。1提取次数对多糖得率的影响由图1可知，提取次数2次与3次、4次、5次相比，样品多糖的得率相差不大，所以考虑节省时间和能源，选择2次较为合适。提取时间对多糖得率的影响由图2可知，多糖得率开始时随着提取时间的延长上升较大，当迗到3h以后，再延长时间，多糖得率则变化不大。图2提取时间对多糖得率的影响3提取温度对多糖得率的影响提取温度对多糖得率的影响由图3可知，多糖得率开始时随着提取温度上升提高显著，当迗到95°C以后，温度提高对多糖得率的影响显著性不是很明显。料液比对多糖得率的影响由图4可知，多糖得率开始时随着料液比的增大

6、而变大，料液比为1:20时，多糖得率达到最高点，而后，随着料液比增大，多糖得率反而下降。4料液比对多糖得率的影响大黄多糖提取条件的优化在单因素考察的基础上，以提取时间、提取温度和料液比为因素，作如下3因素水平的正交实验。选择正交表L9(34),因素-水平设计如表1。表1因素水平实验结果结果见表2〜3。4结论极差R反映了各因素对指标的影响大小，由RC试验表3正交实验方差分析度，浸提时间，料液比；均值K因素i反映了该因素水平i对指标的影响，指标值越大越好，由klA【参考文献】[1]苗明三，苗艳艳.大黄多糖对衰老模型小鼠胸腺、脾脏影响的病理观察[J].中华实用中西医杂志，XX，17(4)：146.[

7、2]李道中.掌叶大黄多糖对高血糖小鼠及正常小鼠的降糖作用[J].中国医院药学杂志，XX，27(3)：309.[3]张蓉，王志鹏，刘莉，等.唐古特大黄多糖对小鼠溃疡性结肠炎细胞因子的影响[J].中国临床药理学与治疗学，XX，11(9)：995.[4]戴英，马建民，徐颖，等.大黄多糖对糖尿病小鼠血清脂质等几项指标的作用[J].上海实验动物科学，XX，24(2):945.[5]王志鹏，刘莉，梅其炳，等.