补肾活血方治疗原发性骨质疏松症的实验研究

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1、补肾活血方治疗原发性骨质疏松症的实验研究李学朋1孟照明2孟兆亮2（1泰安市中医医院山东泰安271000）（2新泰孟氏骨科研究所山东新泰271224）【摘要】试通过对去卵巢大鼠不同时期骨质疏松相关指标的检测，为补肾活血方治疗骨质疏松症提供实验依据"将雌性大鼠90只随机分为6组（假手术组、预防组、模型组、大剂量组、小剂量组、雌二醇组），分別于造模后和3、6个月检测体重、子宫重量、血清钙磷及碱性磷酸酶、骨钙磷含量、骨密度，并进行统计学分析。结果显示模型组体重明显高于正常对照组，子宫重量明显低于正常对照组，模型组骨

2、钙磷含量、骨密度明显低于正常对照组，表明补肾活血方对骨质疏松有明显预防治疗作用。【关键词】骨质疏松症中医药疗法补肾壮骨药效学骨钙骨磷骨密度实验研宄【中图分类号】R242【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）06-0067-02骨质疏松症是目前随着人口老龄化而增长并且逐渐危及到人们健康的一种疾病。为此，我们通过建立动物实验模型,对去卵巢大鼠不同时期骨质疏松相关指标进行检测，以期探讨补肾活血方对骨质疏松症的治疗预防作用。1材料和方法1.1药品与仪器①苯甲酸雌二醇注射液:上海第九制药厂生产，批

3、号110501。②中药补肾活血方:由孟氏骨科研究所自拟方。③戊巴比妥:上海试剂厂生产，批号990301。④青霉素:山东兽抗制药厂生产，批号110514。⑤链霉素:山东鲁抗制药厂生产，批号110514。⑥Ca、P及碱性磷酸酶检测试剂盒:购自东欧生物有限公司（批号11052801）和北京中山生物有限公司（批号110321）o⑦AA2670型原子吸收分光光度计:日木岛津。⑧日立200型紫外可见分光光度计:日木日立。722分光光度计，上海医疗器械厂生产。TN2100B型扭力天平，上海第二天平仪器厂生产。1.2动物分

4、组及实验方法雌性大鼠90只，体重238.8±28.6g,由山东医科大学实验动物中心提供，随机分为6组，用戊巴比妥(40mg/kg)麻醉后，无菌条件下从腰椎两旁切U进入腰腹背侧，完整摘除卵巢后，仔细止血，逐层缝合，作为切除卵巢组，即模型组。其余10只同法进入腹腔后，切除-段小肠系膜，止血缝合，作为假手术组。手术后常规双抗治疗3天，其中一组为补肾活血方预防组，按514mg/kg体重灌胃给药,12周后将OVX组成活大鼠随机分为4组。补肾活血方大剂量组2570mg/kg/h剂量组514mg/kg体重灌

5、胃给药，每天1次，模型组雌二醇4mg/kg腹腔注射，每周2次，其余每天等量蒸馏水灌胃1次。各组大鼠分笼饲养，提取标准大鼠饮料喂养，自由饮用自来水。1.3观察指标①组织学观察:12周后,将预防组和模型组各10只动物，颈静脉采血后处死人鼠。其余动物颈静脉采血后分组进行实验。24周后,动物处理同上"处死大鼠后，分离左右两侧股骨，左侧股骨置-20度冰箱保存，右侧股骨10%福尔巴林中固定J兑钙!常规脱水!浸蜡，包埋5um厚骨组织切片,HE染色，光镜观察。②骨钙、磷元素的含量测定:将上述灰化后的样品先用浓HNO31ml

6、溶解后加水3ml,转移置100ml容量瓶中加三重蒸馏水定容，即得样品溶液。以EDTA终合滴定法(钙指标剂)测定钙，以磷钼酸法测定磷。③血钙、血磷及碱性磷酸酶的含量测定:人鼠采血后，分离血清，采用MTB比色法测定上述指标，方法按照试剂盒操作。1.4数据处理实验数据用均数&pluSmn;标准差表示，组间差异比较采用t检验。2结果2.1补肾活血方对大鼠体重的影响如表1、2所示，实验3个月吋补肾活血方预防组大鼠体重增长率与假手术组比较未见明显差异(P>0.05),预防组体重增长率高于假手术组低于模型组，与模型

7、组比较体重明显低于模型组(P<0.05)。实验6个月吋，补肾活血方大!小剂量组体重增长率明显低于模型组(P<0.05),补肾活血方大剂量组大鼠体重增长率与雌二醇组比较未见明显差异(P>0.05),模型组体重增长率与假手术组比较差异(P<0.01)。表1实验前及实验三个月后大鼠体至情况(x-±S)表2实验前及实验六个月后大鼠体重情况(x-±S)2.2补肾活血方对大鼠子宫重量的影响如表3、4所示，实验3个月吋补肾活血方实验3个月吋预防组大鼠子宫重量明显低于假手

8、术组(P<0.01)高于模型组(P<0.05)。实验6个月时，补肾活血方大、小剂量组及雌二醇组大鼠子宫重量明显低于假手术组(P<0.01),明显高于模型组(P<0.05)。均有显著性差异。2.3补肾活血方对大鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶的影响见表5、6。2.4补肾活血方对大鼠骨钙、骨磷的影响如表7、8所示，实验3个月吋，补肾活血方预防组骨钙含量明显高于模型组(P<0.01),接近假手术组