葛仙米藻红蛋白的体外抗氧化活性作用研究论文

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1、葛仙米藻红蛋白的体外抗氧化活性作用研究论文【摘要】目的本研究旨在研究葛仙米藻红蛋白的体外抗氧化活性作用。方法本试验采用化学发光方法研究了葛仙米藻红蛋白对·OH自由基、O2-自由基、H2O2自由基等氧自由基的清除作用。结果葛仙米藻红蛋白对·OH自由基、O2-自由基、H2O2自由基具有一定的清除作用，其IC50分别为89μg/ml、130μg/ml、48μg/ml，说明葛仙米藻红蛋白对H2O2自由基的清除作用最强。结论葛仙米藻红蛋白具有较强的清除氧自由基的能力，表明葛仙米可作为研究开发新型抗氧化剂产品的研究对象。【关键词】葛仙米藻红蛋白体外抗活性氧作用自由基是生物体生命活动过

2、程中由其机体生物化学反应所产生的中间产物。在正常的生理情况下，机体内自由基的产生和消除处于一个动态平衡之中，其浓度也维持在较低水平，这时自由基不仅不会损伤机体，还可显示出独特的生理作用。而在某些病理情况下.freelmol/L邻苯三酚溶液，原位注入10mmol/L，800μl鲁米诺-碳酸盐缓冲液（Ph0.2），反应总体积为1ml，启动发光，记录240s内发光强度。1.2.2·OH清除能力检测取待测样品100μl于测量管中（以蒸馏水做空白对照），依次加入400μl，1mmol/LcuSO4.5H2O溶液，200μl，1mmol/L抗坏血酸溶液，100μl，0.15mmol/

3、LH2O2溶液，原位注入600μl，0.05mol/L硼砂溶液（Ph9.24）启动发光，记录180s内发光强度。1.2.3H2O2清除能力检测取待测样品100μl于测量管中（以蒸馏水做空白对照），加入50μl，0.1mmol/LH2O2（0℃），原位注入850μl鲁米诺-碳酸盐缓冲液（Ph9.5），反应总体积为1ml，启动发光，记录240s内发光强度。1.2.4发光抑制率的计算公式3发光抑制率=（空白发光曲线面积-样品发光曲线面积）/空白发光曲线面积X100%以发光抑制率为纵坐标，样品浓度为横坐标，绘出发光抑制曲线，并计算发光抑制率为50%时的浓度IC50，用来衡量样品对

4、自由基的清除能力。IC50值越小，样品清除自由基的能力越强。2结果与分析2．1葛仙米藻红蛋白对·OH自由基的清除作用测定不同浓度的葛仙米藻红蛋白对·OH自由基清除效果，结果见表1：由表1可知，在藻红蛋白浓度为20-400μg/ml范围内，葛仙米藻红蛋白对·OH自由基具有较好的量效关系。在藻红蛋白浓度20-100μg/ml范围内，随浓度的增加，其对·OH自由基的清除率明显增强；但藻红蛋白浓度在100-400μg/ml范围内时，随浓度的增加，对·OH自由基的清除作用不明显。经计算IC50=89μg/ml。2.2葛仙米藻红蛋白对O2-自由基的清除作用测定不同浓度的葛仙米藻红蛋白

5、对O2-自由基清除效果，在藻红蛋白浓度为50-700μg/ml范围内，葛仙米藻红蛋白对清除O2-自由基具有较好的量效关系，在藻红蛋白浓度50-150μg/ml范围内，随浓度的增加，对O2-自由基的清除率明显增强；但藻红蛋白浓度在150-700μg/ml范围内时，随浓度的增加，对O2-自由基的清除作用不明显，经计算IC50=130μg/ml。2.4葛仙米藻红蛋白对H2O2自由基的清除作用测定不同浓度的葛仙米藻红蛋白对H2O2自由基的清除效果，在藻红蛋白浓度为50-300μg/ml范围内，葛仙米藻红蛋白对清除H2O2自由基具有较好的量效关系。在藻红蛋白浓度50-100μg/m

6、l范围内，随浓度的增加，对H2O2自由基的清除率明显增强；但藻红蛋白浓度在100-300μg/ml范围内时，随浓度的增加，对H2O2自由基的清除作用不明显，经计算IC50=48μg/ml。3讨论在活性氧自由基的反应过程中都会释放能量产生化学发光，利用高灵敏的发光仪器可直接观察，检测室为提高观察的效果，常用鲁米诺作为发光增效剂，特定体系所产生特定的活性氧会使鲁米诺氧化激发，当其返回基态时，会发出冷化学光，此现象即为化学发光。如果抗氧化活性成分能够有效地清除特定的活性氧，能抑制鲁米诺的化学发光，就可根据测定的发光强度比较其对活性氧的清除率6。本实验采用微弱化学发光仪测定了葛仙

7、米藻红蛋白氧自由基的清除作用，研究表明葛仙米藻红蛋白对·OH自由基、O2-自由基、H2O2自由基具有一定的清除作用，其IC50分别为89μg/ml、130μg/ml、48μg/ml，说明葛仙米藻红蛋白对H2O2自由基的清除作用最强。实验结果显示，葛仙米藻红蛋白具有较强的清除氧自由基的能力，表明葛仙米可作为研究开发新型抗氧化剂产品的研究对象。参考文献1田云，卢向阳，易克等.天然抗氧化剂清除氧自由基的能力J.湖南农业大学学报(自然科学版)，2004,30(3):209-211.2罗广华，王爱国，柯德森.海藻中清除氧自由基的物质J.