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时间:2018-10-05
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1、急性髓细胞白血病细胞的吲哚胺2,3-双加氧酶介导免疫逃逸的实验研究作者:唐晓琼,赵智刚,王红祥,李秋柏,吕建,邹萍【摘要】为了探讨急性髓细胞白血病细胞的吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)参与肿瘤免疫逃逸的机制,从23例急性髓性白血病患者获取骨髓细胞,采用免疫组织化学染色法和RT-PCR法检测白血病细胞IDO的表达;在有或无1-甲基色氨酸(1-MT)存在下,以白血病细胞为刺激细胞,外周T淋巴细胞为反应细胞建立单向混合淋巴细胞反应体系(MLR),利用MTT法检测T淋巴细胞增殖率,并以反相高效液相色谱法检测相应MLR体系上清液中的IDO活性。结
2、果显示,在23例急性髓细胞白血病患者中17例患者的骨髓白血病细胞上有IDO的表达;白血病细胞上的IDO活性抑制MLR体系中T淋巴细胞的增殖。结论:白血病细胞表达的IDO活性能阻抑外周T淋巴细胞的增殖,它可能参与了肿瘤免疫逃逸。【关键词】急性髓细胞性白血病 Indoleamine2,3-DioxygenaseActivityinAcuteMyeloidLeukemiaCellsContributingtoTumorImmuneEscape AbstractThisstudywasaimedtoinvestigatethemechani
3、smofindoleamine2,3-dioxygenase(IDO)activityinacutemyeloidleukemiacellscontributingtotumorimmuneescape.Myeloidleukemiacellswereisolatedfrombonemarrowof23patientswithacutemyeloidleukemia(AML)andIDOexpressionwasdetectedbyimmunochemistryandRT-PCRmethods.Thenmixedlymphocytere
4、action(MLR)ofonewaywascarriedout,leukemiacellswereusedasstimulatingcellsandT-lymphocyteswereusedasreactivecellsinculturewithorwithout1-MT.T-lymphocyteproliferationratewasdeterminedbyMTTassayandIDOactivityinsupernatantofMLRwasdetectedbyhigh-performanceliquidchromatography
5、(HPLC).TheresultsshowedthatIDOexpressionwasfoundin17outof23casesofacutemyeloidleukemiacells;IDOenzymeactivityinleukemiacellsinhibitedT-lymphocyteproliferationinMLRcultures.ItisconcludedthatIDOactivityexpressinginleukemiacellscansuppressT-lymphocyteproliferationresponses,
6、whichmaybecontributingtotumorimmuneescape. Keywordsacutemyeloidleukemia;indoleamine2,3-dioxygenase;T-lymphocyte;1-methyltryptophan;immuneescape6 肿瘤免疫逃逸指肿瘤细胞通过某种机制躲避免疫系统对其监视与杀伤,从而导致肿瘤的发生和复发的现象,迄今为止参与肿瘤的免疫逃逸的具体分子机制尚不清楚[1]。近年的研究发现,小鼠胎盘滋养层细胞吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxy
7、genase,IDO)是防止母鼠异基因T细胞对胎鼠的免疫排斥反应中的必要因素[2]。同时还发现,抗原呈递细胞(APC)如巨噬细胞、DC上IDO能通过抑止T淋巴细胞的增殖而在免疫系统的反应调控中发挥着重要的作用[3]。另有学者发现,人宫颈癌细胞系HeLa细胞与外周血淋巴细胞共培养后,外周血淋巴细胞在IL-2作用下的增殖能力明显被抑制[4]。基于以上的研究,我们获取急性髓细胞白血病(acutemyeloidleukemia,AML)患者的骨髓细胞,观察IDO在白血病细胞上表达情况及表达的IDO活性与外周T淋巴细胞的免疫应答关系,以探讨IDO
8、参与肿瘤免疫逃逸机制并为肿瘤免疫治疗提供一定的实验依据。 材料和方法 细胞准备 病例资料 23例急性髓细胞白血病(AML)骨髓标本均取自在本科住院的初发病人,患者的诊断均符合诊断标准,其中男性13例
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