槲寄生有效成分的研究与开发利用

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1、槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用槲寄生有效成分的研究与开发利用l0ChineseMedicalResearch&Clinical,August,2005,Vo槲寄生有效成分的研究与开发利用李丽琴张瑞华徐建富陈乐责中图分类号:R28文献标识码:A文章编号:1726—

2、4855(2,005)08—00O8—03槲寄生是一种半寄生植物,通常寄生于落叶树.如:梨树,榆树,桦树,苹果树,槲树,枫杨,枫香等树上,属于桑寄生科.全世界槲寄生共有100种,其中20种分布于亚洲,中国分布有11种,主要分布于东北,华北地区,其干燥带叶茎枝含多种有效成分,其提取物具有广泛的药理活性.在欧洲,槲寄生提取物治疗癌症已有70年历史,目前其提取物已经商品化,诸如出现了Helixor~,Plenosol@,Iscador~等抗癌药物.】.在远东,槲寄生可以做成茶或熬成汤药用来治疗腰痛,高血压,肿瘤等J.还有报道槲寄生甲醇一水溶液提取物可以通过皮下,皮内,静脉给药,也可做成胶囊或茶食用或

3、饮用,治疗癌,关节炎,心血管病0J.我国早在2300年前的《神农本草经》即出现了有关槲寄生药用的记载.槲寄生能祛风湿,补肝肾,强筋骨,安胎,还用于风湿痹痛,腰膝酸软,胎动不安,鲜叶的乙醇浸液给兔,狗注射,有降压作用.槲寄生提取物多年来一直被用作肿瘤的辅助治疗药物,许多国外学者致力于其有效成分的分离提取,并进行药理活性研究.目前已有许多成分分离出来,在这些成分当中,槲寄生凝集素是研究较多的一种成分,其他成分还包括槲寄生毒素】,生物碱[1”】,壳多糖结合蛋白[15.161,多糖’J,果胶],磷脂成分】,抗氧化物质圳等.我国学者对槲寄生的研究工作较少,本文就槲寄生多种有效成分的药理活性和开发利用情况

4、进行综述,以利于对我国丰富的槲寄生资源进一步的临床开发应用.1有效成分的分离提取方法1.1槲寄生凝集素-7]100g植物茎(叶)切成5mm的小段,用750ml0.5mol/LNaC1在室温浸泡3h,过滤,滤液中加人(NIl,)SOt至饱和度为70%(6og/100na),静置过夜,10000g离心10min收集沉淀,将沉淀溶于少量0.5mol/L的NaC1中,作为粗提取液.经DE一52,酸化的Sepharose4B,1gO—SeDh—rose4B,ConA—Sepharose4B柱层析得到viscumin.1.2槲寄生毒素100g粉碎的干燥茎和叶,用200ml4%的乙酸浸泡,匀浆,10000g

5、离心30rain,沉淀对25mmol/L的乙酸缓冲液(pn=4.8)4℃透析,透析液作为槲寄生毒素粗提取液,产率为0.16%.粗提取液经阳离子交换柱CM—SepharoseFF,(Nl-h)SO4沉淀,HPLC(superose12)等分离,得到有毒馏分,透析,冻干,即为槲寄生毒素.作者单位:北京药物化学研究所(102205)作者简介:李丽琴,女,33岁,副研究员,硕士生导师.研究方向:药物临床前毒理学,毒物分子药理和毒理学,药效和毒效学.1.3槲寄生生物碱n切成小段的茎和叶,用2%的乙酸提取2472h,过滤,滤液冻干,重新溶于PB中,作为粗提取液.粗提取液用石油醚反复提取,水溶液层用NaHC

6、(h调pH至8.5,再用氯仿抽提几次,氯仿提取物在负压条件下蒸发得到生物碱,产率为0.38%,在制备型的TIA~”和硅胶柱上可进一步分成若干组分.1.4槲寄生壳多糖结合蛋白”100g叶或幼茎,加人1L20mmol/L乙酸,匀浆,过滤,于8000g离心10min,倒出上清,过滤,按每升滤液中加人1.5gCaC12,然后调pH至9.0,放置2~C约3h,3000g离心10rain去除沉淀,上清用1N乙酸调pH为3.0,冷室过夜,3000g离心10min,上清用Wlmtman3MM滤纸过滤,滤液用等体积蒸馏水稀释,上阳离子交换柱,用0.5mol/LNaC1洗脱结合的蛋白.然后再经Sepharose4

7、B,Fetuin—Sep

8、mrose4B柱层析去除槲寄生凝集素.含槲寄生壳多糖结合蛋白的组分再经Chitin亲和柱(C7170)层析,用20retool/L乙酸解吸附,对水透析,冻干.1.5槲寄生多糖新鲜植物与缓冲液(抗坏血酸盐一磷酸缓冲液0.14mol/LpH=7.4)在氩气中加压提取,流出汁液经Sepharose4B柱层析去除槲寄生凝集素.层析后溶液中加入PVPP去除酚类化合物,通过离心除去P