叶绿ww体色素理化性质

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1、叶绿体色素的提取、分离和理化性质实验目的实验目的：1、学习叶绿体色素的提取方法。2、了解叶绿素和类胡萝卜素的一些主要理化性质。绿色植物的光合作用是在叶绿体中进行的，其中吸收光能的是叶绿体色素。了解叶绿体色素的组成、性质对于理解光合作用的本质很有帮助。植物色素包括：①  脂溶性的叶绿体色素：存在于叶绿体，与光合作用有关，如叶绿素、类胡萝卜素等②  水溶性的细胞液色素：存在于液泡中，与花朵的颜色有关，如花青素属黄酮类物质。实验材料：菠菜叶片本实验共有7项任务，按下列顺序做：1、叶绿体色素提取2、光对叶绿素的破坏作用3、叶绿体色素

2、的纸层析分离4、叶绿素的荧光现象5、皂化作用6、吸收光谱观察7、H+和Cu++对Mg++的取代作用2，4-7为理化性质内容。1、叶绿素提取原理与操作步骤各种植物叶绿体中所含的色素有数十种。叶绿素类、类胡萝卜素类和藻胆素（藻类）。分三大类存在于类囊体膜上叶绿体中含有绿色素（包括叶绿素a和叶绿素b，属于酯类化合物）和黄色素（包括胡萝卜素（烃类）叶黄素（衍生的醇类））两大类。它们与类囊体膜上的蛋白质相结合，而成为色素蛋白复合体。基本性质：不溶于水，而溶于有机溶剂。故可用乙醇或丙酮（含一定比例水分？）等有机溶剂提取。提取步骤：（1）取

3、菠菜叶片洗净、擦干、剪碎、混匀，称2.5g，放入研钵中。（2）加入少量石英砂及碳酸钙粉（目的？），加2～3滴管95%乙醇，研磨至糊状;（3）再加15ml95%乙醇，提取约3min，过滤于三角瓶中;（4）残渣用5-10ml95%乙醇冲洗，一同过滤于三角瓶中。（备用）2.光对叶绿素的破坏作用叶绿素（a，b）的化学性质很不稳定，容易受强光的破坏，特别是当叶绿素与蛋白质分离以后（有机溶剂提取液），破坏更快，而类胡萝卜素则较稳定。（提取出叶绿素后先做这一步）用15N研究燕麦叶片中色素的合成和分解发现，在植物体内，72小时全部更新一遍。水

4、研磨匀浆（光破坏对照）：取2g剪碎的新鲜叶片，放入少量石英砂（不加碳酸钙粉），用水研磨。先加2ml蒸馏水，研至糊状，再加蒸馏水20ml，搅均，不过滤。光对叶绿素的破坏操作步骤：有太阳光时按照指导书的测定方法操作稀释时不用严格定量？稀释1-2倍，为什么要稀释？太阳光下：水、乙醇暗处（实验台）：水、乙醇两组（四管）水研磨匀浆暗光乙醇提取液暗光注意：乙醇提取液的浓度太大，必须进行稀释才能做光破坏实验，稀释倍数视提取液的浓度确定，浓度不要过大，否则在短时间之内效果不明显。水研磨匀浆液光下10分钟阴天和晚上上课的同学取滤纸一张，将两种液

5、体分别涂抹在滤纸上，带回去，放在光下处理。折叠剪开乙醇提取液暗处光下破坏的时间不要过长，否则看不到效果。阴天可以适当延长，时刻观察效果。因吸附剂（本试验为滤纸）对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各成分在两相（流动相和固定相）间具有不同的分配系数，所以它们的移动速度不同，经过一定时间层析后，便将混合色素分离。3.叶绿素各成分的分离：（纸层析）色层分析原理：再脱吸附两项间分配系数吸附脱吸附再吸附分配系数决定于固定相、流动相和被分离物质的性质。本实验中主要决定于被分离物质的极性。固定相：滤纸（极性）本实验流动相（

6、推动剂）：非极性被分离物质：各种色素，极性不同。（石油醚：丙酮：苯=10：2：1）现配现用叶绿体色素的结构决定极性。极性决定在滤纸上的迁移速率。叶绿体色素叶绿素类胡萝卜素叶绿素a叶绿素b胡萝卜素叶黄素叶绿素的化学结构细菌叶绿素a叶绿素a叶绿素b酯卟啉植醇叶绿醇烃类衍生的醇类步骤一：取圆形滤纸1张（φ11cm）用细头吸管在中心戳一圆形小孔(圆且小)取1张滤纸条(5×1.5cm)，沿纸条长度方向涂色素，涂抹宽度限制在0.5cm，不要超过1/2风干后，重复涂抹数次(细.匀.直.浓)滤纸条沿长度方向卷成纸捻(纸捻卷紧)纸捻带有色素的一

7、端插入圆形滤纸的小孔中，与滤纸平齐（勿凸出）康维皿放置在培养皿内，中央小室中加满推动剂带纸捻的圆形滤纸平放在康维皿上，使纸捻下端浸入推动剂中，盖好培养皿(防推动剂蒸发)推动剂前沿距滤纸边缘1/3时，取出滤纸，风干，用铅笔标出各种色素的位置和名称剪下一部分附到实验报告中。步骤二：(涂抹的色素量太多易发生拖尾，量少色带看不清)实验结果：颜色从外往内分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色。分别为：？注意事项：1、色素多涂抹几次，风干后再涂抹第二次。涂抹的色素要适量，量太多易发生拖尾，量少色带看不清。2、纸捻卷紧；3、色素涂抹的宽度不要超

8、过纸条的二分之一；4、中心孔小而圆；平齐，勿突出；5、分离时一定要盖严培养皿盖，防止推动剂蒸发。细，匀，直，浓度适宜高。4、叶绿素的荧光现象叶绿素的酒精溶液，透射光下为翠绿色，反射光下为棕红色，这种现象为荧光现象。当荧光出现后，立即中断光源，用灵敏的光学仪器还可在短时间内看到