抗癌解毒方抗肿瘤作用的实验研究.doc

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1、抗癌解毒方抗肿瘤作用的实验研究作者：何燕清，郑作文，陆桂喜【关键词】抗癌解毒方　　摘要:目的:评价抗癌解毒方的抗肿瘤作用、对免疫功能的影响作用。方法:用昆明种小鼠，灌胃给药，环磷酰胺造模，60Co照射，肝癌H22瘤株模型，脾淋巴细胞增殖测定，血清溶血素测定，碳廓清实验，迟发超敏试验等方法观察相关指标。结果:抗癌解毒方能明显延长60Co照射小鼠的生存时间;可明显抑制H22小鼠瘤体的生长，对H22小鼠的生存时间有一定延长作用;与环磷酰胺合用对H22小鼠瘤体有一定协同抑制作用;对环磷酰胺引起的H22小鼠溶血素的降低有明显提高作用，但对环磷酰胺引起的H2

2、2小鼠碳廓清率的降低拮抗作用不明显;对H22小鼠迟发超敏反应作用不明显;对小鼠脾淋巴细胞有明显的增殖作用。结论:抗癌解毒方有抗肿瘤、促进免疫的作用。　　关键词:抗癌解毒方;抗肿瘤;免疫　　“抗癌解毒方”（以下简称KAF），为广西柳州市肿瘤医院所研制，临床对放疗、化疗癌症患者有明显提高白细胞及一定抗肿瘤作用。该方主要由生晒参、黄芪、茯苓、当归、枸杞、白花蛇舌草等中药组成。为此我们对该方进行了抗肿瘤、促进免疫的药理实验，现将结果报告如下。　　1实验材料　　1.1药物制备KAF方中，生晒参第1次用8倍量95%乙醇回流2h，第2次用6倍量95%乙醇回流1

3、h，回收乙醇，浓缩备用;醇提后的生晒参及处方中黄芪、茯苓、当归、枸杞、白花蛇舌草等药物第1次用10倍水提取2h，第2次用8倍水提取1h，两次药液合并浓缩，浓缩液与生晒参乙醇浓缩液合并混匀，浓缩至药物浓度为2g生药/ml备用。　　1.2试剂　　参芪片（由11味中药组成），吉林恒和制药股份有限公司生产，批号:20020303;氟尿嘧啶（5-FU）注射液，上海旭东海普药业有限公司生产（上海市浦东金桥金沪路879号），批号:010807;环磷酰胺（CPA），上海华联制药有限公司生产，批号:010914;盐酸左旋咪唑，吉林南药股份有限公司，批号:02030

4、1;刀豆蛋白（ConA），Sigma公司，批号:030808;2，4-二硝基氯苯（DNCB），上海试剂仪器厂，批号:982021。　　1.3动物4　　昆明种小鼠，普通级（CV），由广西中医学院实验动物中心提供，动物合格证号:桂医动字第11004号。　　1.4仪器　　722型分光光度计，上海第三分析仪器厂制造;遥控酶标仪，型号:SUNRISE，奥地利生产;CO60765型远距离治疗机，加拿大生产;　　2方法及结果　　2.1对60Coγ射线照射小鼠生存时间的影响［1］　　取小鼠50只，体重（20±2）g，♀♂兼用，随机分为5组。ig给药，给药容积为3

5、0ml/kg。1次/d连续14d。空白对照组、照射对照组给生理盐水。给药后第8天60Coγ射线7.5Gy1次性全身照射，照射时间6min52s。观察小鼠的存活天数（从照射至死亡日期），结果见表1。表1KAF对60Coγ射线照射小鼠生存时间的影响（略）　　结果显示，KAF高剂量组小鼠存活时间比照射对照组长，差异有显著性意义，提示KAF可明显延长60COγ射线照射小鼠的生存时间。　　2.2对H22瘤株小鼠生存时间的影响［2］　　取小鼠55只，体重（20±2）g，♀♂兼用，随机分为5组。ig给药，给药容积为30ml/kg，1次/d连续14d，空白对照组

6、给生理盐水。给药后第8d无菌条件下取H22瘤液，以生理盐水1∶5稀释，各组小鼠均腹腔接种H22瘤细胞悬液0.2ml/只，观察小鼠存活天数，结果见表2。表2KAF对H22瘤株小鼠生存时间的影响（略）　　结果显示，KAF高、中剂量组对H22瘤株小鼠生存时间较对照组长，但差异无显著性意义，提示KAF对H22瘤株小鼠生存时间有一定延长作用。　　2.3对荷瘤H22小鼠瘤体生长的影响［2］取体重17～22g小鼠52只，♀♂兼用，无菌条件下取H22瘤液，以生理盐水1∶5稀释，每只小鼠腋窝皮下注射0.2ml，将接种小鼠随机分为5组。于接种瘤株24h后开始ig给药

7、，给药容积为30ml/kg，1次/d连续10d，空白对照组给生理盐水。第11d脱颈椎处死动物，取瘤块称重，计算肿瘤及肝脾抑制率，结果见表3。　　结果显示，KAF高剂量组瘤重及瘤重系数小于对照组，中剂量组瘤重系数小于对照组，差异有显著性意义，提示KAF对H22小鼠肿瘤生长有明显抑制作用。表3KAF对H22小鼠瘤重的影响（略）　　2.4KAF和CPA合用对荷瘤H22小鼠瘤体生长的影响［2］4　　取体重20～22g小鼠50只，♀♂兼用，随机分为5组。ig给药，1次/d连续给药14d，给药容积为30ml/kg，空白对照组给生理盐水。从第6d开始KAF高、

8、中、低剂量组及CPA组隔日腹腔注射1次CPA。第6d给药后1h接种瘤株，第15天脱颈椎处死动物，取瘤块称重，计算肿瘤的抑制率重复2次实验