厌氧性细菌白喉杆菌结核杆菌课件

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1、厌氧性细菌需氧芽孢杆菌白喉杆菌结核分枝杆菌第十次实验1.掌握其他细菌（厌氧性细菌、需氧芽孢杆菌、白喉杆菌、结核分枝杆菌）的形态、培养特点。2.掌握白喉杆菌的奈瑟氏染色和结核杆菌的抗酸染色方法。实验目的与要求实验内容厌氧菌：破伤风杆菌、产气荚膜杆菌1.厌氧培养法2.破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒梭菌的生物学特性需氧芽孢杆菌：炭疽杆菌和枯草杆菌的生物学特性白喉杆菌：结核杆菌：本次实验示教产气荚膜“汹涌发酵”、破伤风庖肉培养管产气荚膜庖肉培养管动物实验：小鼠破伤风厌氧培养：焦性没食子酸法枯草普通平板，白喉

2、亚碲酸钾血平板本次实验操作镜下观察：炭疽杆菌、枯草杆菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽杆菌串珠、肉毒梭菌。实验标本：病人痰液和白喉培养物各1支实验操作：Neisser染色（白喉培养物）抗酸染色（病人痰液）小结厌氧培养法1.庖肉培养基厌氧培养法2.焦性没食子酸法3.气袋法4.厌氧罐法5.厌氧手套箱法破伤风梭菌1.形态观察----示教2.培养物观察----示教破伤风梭菌庖肉培养基破伤风梭菌血琼脂平板3.破伤风外毒素毒性作用试验（示教）原理：破伤风梭菌产生的外毒素封闭抑制性神经介质释放，伸肌、屈肌同时强烈

3、收缩，导致骨骼肌痉挛。产气荚膜梭菌1.形态观察----示教片2.培养物观察----示教产气荚膜梭菌庖肉培养基产气荚膜梭菌血琼脂平板“汹涌发酵”现象产气荚膜梭菌能分解牛乳培养基中的乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，将培养基中隔绝氧气的凡士林冲向试管口，甚至冲开管口棉塞，此现象称“汹涌发酵”。肉毒梭菌形态观察----示教片炭疽杆菌炭疽杆菌串珠试验炭疽杆菌（普通平板）炭疽杆菌（血平板菌落）枯草杆菌枯草杆菌枯草杆菌白喉杆菌白喉杆菌的奈瑟氏染色取吕氏血清斜面上培养的白喉杆菌涂

4、片干燥固定奈瑟氏染液第一液（美兰）第二液水冲洗水冲洗待干镜检染7分钟染1分钟涂片奈瑟氏染液Neissser染色Albert染色菌落观察白喉棒状杆菌血平板白喉亚碲酸钾血平板Elek平板试验结果ElekTest沉淀线(阳性)含白喉抗毒素滤纸片白喉杆菌菌苔321结核杆菌结核杆菌的抗酸染色痰涂片干燥固定石炭酸复红加温染色5分钟冷却水冲洗3%盐酸酒精脱色1分钟水冲洗碱性美蓝复染1分钟待干镜检水冲洗庖肉培养基培养法由于肉渣培养基含不饱和脂肪酸，氧化时能消耗溶解于培养液中的氧气，且组织中所含的还原性化合物为谷胱甘

5、肽（含—SH基）可使培养基的氧化还原电势下降，造成厌氧环境，故适于培养厌氧菌。焦性没食子酸法（示教）将厌氧菌接种血平板。用方形的消毒玻板一块，中央放焦性没食子酸0.2g，覆盖纱布或棉花一小块，当加10%NaOH0.5ml后，迅速将培养皿倒置在玻板上，周围用溶化的石蜡密封，置37℃培养24~48h后，取出观察。