血型交叉配血ppt课件

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1、血型与交叉配血主要内容：红细胞血型概述抗体检查和鉴定交叉配血方法日常工作中问题对策血型的发现1900年，奥地利科学家兰德斯坦纳红细胞血清凝集不凝集遇到红细胞抗原血型系统（Bloodgroupsystems）29245血型集合（Bloodgroupcollections）612血型系列（series）：低频率系列（700series，low-incidenceantigens)33高频率系列(901serise,high-incidenceantigens)12Rh血型系统Du比正常D阳性细胞抗原弱，但一旦输给Rh阴性的受血者后，自然有免疫产生抗D的可能。同时Du型人者接受Rh阳性的

2、细胞后，也有可能产生抗D抗体。作为供血者，Du型归类为Rh阳性，作为受血者Du型归类为Rh阴性者。红细胞抗体(1)预期抗体：若已知红细胞ABO血型，按Landsteiner´s法则可预知的ABO血型抗体，即抗-A和抗-B。预期抗体也叫做规则抗体意外抗体：抗-A或抗-B以外的抗体。在ABO亚型中，变异的抗-A1或某种抗-B等抗体，也称为意外抗体。意外抗体过去也叫做不规则抗体红细胞抗体(2)天然抗体：没有可察觉的抗原刺激，而机体对抗原免疫应答的产物。天然抗体多为IgM抗体，能与含有相应抗原的红细胞结合，在盐水介质中出现肉眼可见的凝集反应，所以也叫盐水抗体。IgM抗体的最适反应温度为0-

3、25℃。免疫抗体：抗原刺激机体而产生的。免疫抗体多为IgG抗体，在盐水介质中只能致敏含有相应抗原的红细胞，但不产生凝集，需要采用抗球蛋白搭桥、酶处理细胞或聚凝胺介导等方法，才能产生凝集反应。IgG抗体的最适反应温度为37℃。免疫血液学的传统方法凝集实验和溶血实验玻片法/试管法/微孔板法抗人球实验在抗原抗体反应中的去离子和低离子盐水凝集法：例如，ABO血型鉴定试验包括玻片法、试管法和微孔法但灵敏度相对较低，只在一些基层医院血库使用低离子强度盐水法：通过降低介质溶液离子强度，减少红细胞膜外围的离子云，促进红细胞凝集，因而其灵敏度有所提高。聚凝胺试验原理：聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚

4、物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减小，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝聚。如果是抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集不可逆；无抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集解散。程序：按试剂盒说明书操作。聚凝胺凝集法：通过多聚季氨盐溶液提供大量正电荷来中和红细胞表面负电荷，减少红细胞间的排斥，促进红细胞凝集，其灵敏度有较大提高。此方法目前在国内使用较多。（Rh,Duffy）抗人球试验-检测IgG抗人球试验：在盐水凝集法或低离子强度盐水法的基础上，加入抗人球蛋白抗体，通过抗人球蛋白抗体的特异性桥连作用，促进红细胞的凝集。可分为直接和间接抗人球试验。K,

5、k,Fya,Fyb,JKa,JKb,Kpa,Kpb,S,s,Lua,Lub间接抗人球蛋白试验(IAT)经典IATLISS-IAT:试管法卡PEG-IAT酶－IAT聚凝胺－IAT经典IAT程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，37℃孵育45-60分钟，生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂，离心后判读结果。用抗体致敏的红细胞检测试验结果的正确性。LISS-IAT原理：通过降低红细胞周围的离子氛，使抗体易于接近抗原，促进抗体在更短的时间内致敏红细胞，再使用抗人球蛋白试剂，使被致敏的红细胞产生凝集程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加2-4滴LISS液后混匀，37℃孵

6、育15分钟，离心观察细胞的凝集情况，用生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂，离心后判读结果。PEG-IAT原理：PEG（聚乙二醇）是一种水溶性的中性多聚体，当含有抗原与相应抗体的溶液中加入PEG时，由于空间排斥效应作用，使溶液中的抗体饱和度提高，加速溶液中的抗原-抗体复合物的形成。程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加4滴PEG溶液后混匀，37℃孵育15分钟，生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂，离心后判读结果。微柱凝胶技术(卡)原理：微管内有凝胶颗粒和试剂。凝胶颗粒具有分子筛作用，离心后，不凝集的红细胞通过全程进入微管底部，而凝集的红细胞

7、则悬浮停留在颗粒中。程序：按厂家说明操作反应原理微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（MicrocolumnGelHeamagglutinationAssay，MGHA）在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下，该凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。4+红细胞复合物（凝集）位于凝胶表面3+大部分红细胞复合物位于凝胶表面，少部分位于