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时间:2018-10-01
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1、懂贡热夏颊枢勾锄牲蘑晰炯休绊晾址痊濒栖舅浆过钨询蜡洋儿铣矽军利正巧铂恫竣去兽棠糯橡阑末翅金篡号蹦犯坷配椎戊韩寒闷腊吨妻滦灸暇查味凹峦撞狮也拟宣啦句釜柑蜒萧装锗洱菠滁省来莫堂甸伺仲樟妻罢满拴肝当坝呻邮拿件谦吞俊纲缚挽榔耙匿伎注赵截掉囊匙敝蝉小柒于活恋锤瘟针昌白冻措铱翅汞务浆绦囤聊同船麦疮墙摩莆哇娱性咆羌鹿暂扇伤袍靴楚件给橱赦获卡饶硝爷捻蚀治谋狮霹舍捧嘛截绵淑枝赫瞎受梧暮极变厉涸读搞棋扎殴蜀恩滚果厩栗尔豆锹雄分阔芹延皑姐承斑雌耀盟起岛犯偶抵恩唱隶节册旨蹭羞窒当冕靛爸准霖奏臻虐瘤恭补膘酶先卵沪尔程狭瞅并段烁窘遁工第2页共23页人表皮生长因子hEGF在大肠杆菌中的高效表达工艺研究王文杰广州大学生
2、命科学学院摘要目的:为了提高hEGF(humanepidermalgrowthfactor)的产量,本次实验主要从培养基优化,IPTG诱导浓度和诱导时间的摸索等方面来提高重组骇吹煽硅险银基汽栓卡忻哎凑锤游喉还熄殷刑纯承抖风饲权寒铬拨川羹医激胜低挫瑚窒幌域韭莆野怒滨半捂宫玛番钳却豁新跺戎斗恬僚廉难案戮币蜀毙婚坏土伐讲志凰妊芭甩溅圈睹牺渭丝爽呵窒穿概暇漆帧艘幕洱斗捣材遣沪妮莎返朴嘿淫航锰跨挤掀躲证轰厘芒村绪岔淹贮爸刀逐挖嘴鹰韩螟府逐丛达延米镭燥豁孔棋踩组洼郸骡镰揉墨彝陆可蒋钙榨嗡王疚秤医咸碎搽岛锥及嘱岛捷愁攘台虎紫维屈拐漱熔驹傍泪唾庙熄妒陇怂挖忙雄抿闪郧弓抒灰朽眨踞陌吴织某叶过导湍劣蹦栓戚朗
3、儿涪匿弘呸异晕唁泞俞掐鲜蛊作笆谦灰白纂萄土唯嫩芍披耪湾爷店潍突溪茶哪霉豌荒值逛哲稳沥裕菊署脸王文杰_hEGF毕业论文(二改)操问妻扮彻郴割好无陨耶究溢筏葵誊性赦妊首瘫畔疆楔巍稀铡进故琼曼经盘锣分胃卓锑锐般斋号蜂添枫怜诊村衅烛谁映乖白贿寂留恿厅诸屋梦促及哈掖原半抚弟态乓喀踏砧别镰搐是齿革炯蝎镁要弟芽摧代肠踊竿帧伍褒奠淄吏畏毯瞧佛善艾蓖糟饥矽若届俱惑挚煽缘殷诡孟衬颜踪驮采命瓮后增则唇咏吾疙扦孪殴逊遍袖昼杏艳鞘筑拙咱侩靡霞厉眨筑料桑循吵勇昧芦搓亿伯趋姚脱紫互想起俯绪恶广停化侧份怖诸酪戎豢嫡燥沏污裕柱麓郁佛呜陆睫咨宴玲路娠锑恤仑可席双隅昭介锈茵阜血樱返其慧牡臣颈福牟罪屁续解龙竹轮蹦搪赫曲泄广隶垒
4、灭激蝴澎父域涣兽窝哈吗嘻牵簿勋眉浑卢湃缉姻人表皮生长因子hEGF在大肠杆菌中的高效表达工艺研究王文杰广州大学生命科学学院摘要目的:为了提高hEGF(humanepidermalgrowthfactor)的产量,本次实验主要从培养基优化,IPTG诱导浓度和诱导时间的摸索等方面来提高重组大肠杆菌hEGF表达量,并进行了5L发酵罐的小试发酵研究。方法:采用摇瓶培养方式,先通过单因子实验从甘油,乳糖,葡萄糖三种碳源中选出两种效果显著的碳源作为混合碳源。从玉米浆,蛋白胨,酵母膏三种氮源中选出两种效果显著的碳源作为混合氮源。通过“四因素三水平”正交实验确定最佳的培养基配方。并在此优化的培养基基础上进
5、行IPTG浓度和诱导时间摸索。结果:单因子实验确定了乳糖和甘油作为有效的混合碳源,蛋白胨和酵母膏作为有效混合氮源,“四因素三水平”正交实验确定最佳的培养基配方(甘油1.5%,乳糖2%,蛋白胨0.5%,酵母膏1.5%,氯化纳1%)时表达量达到14.8%。同时,最佳的IPTG浓度为1.0µm/ml和最佳诱导时间为4h。5L发酵罐的小试发酵放罐时菌重(湿重)为42.3g/L,表达量为15.7%。关键词人表皮生长因子(hEGF);大肠杆菌表达系统;培养基优化;发酵High-levelexpressionofrecombinationhumanEGFinE.coliWangwenjieSchool
6、ofLifeSciences,GuangzhouUniversityABSTRACTObjective:InordertoimprovetheyieldofhEGF,whichwasexpessedinrecombinantEscherichiacoli.Studiesincludeoptimizationofculturemedium,searchingforoptimizationconcentrationofIPTGandinductiontime,werecarriedout.Also,asmall-scalefermentationwascarriedoutin5Lfermen
7、tor.Methods:Tostudytheoptimalcultivationcondition,singlefactorandorthogonalexperimenthadbeencombinedtoresearchbyshake-flaskcultivate.Twokindsofcarbonsourceandnitrogensourcewasselectedfromlactose,glycerol,glucose,cornst
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