宠物犬中主要人兽共患病的流行病学调查

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1、宠物犬中主要人兽共患病的流行病学调查张敏1褚静娟1顾永远1沈辉1孙安帮1汤赛冬1张曹民2张红飞1（1.上海闵行区动物疾病预防控制中心，201109；2.上海闵行区农业和绿化管理局，201100）摘要：宠物犬在带给人类快乐的同时也把疫病的风险带给了人类，对人类的身心健康构成很大的危害或隐患。本文对2006-2007年间闵行区有证宠物犬的主要人兽共患病（包括狂犬病、弓形虫病、布鲁氏菌病、莱姆病和禽流感等）开展了流行病学调查，基本摸清了本区内宠物犬人兽共患病的现状，为制定后续防控决策构筑技术基础。关键词

2、：宠物犬；人兽共患病；流行病学随着人民生活水平的不断改善及休闲时间的增多，出于时尚追求和精神渴望，同时也随着上海日益向国际化大都市的迈进和与国际的接轨，宠物热在上海持续升温，其中主要是宠物犬。闵行区更是由于地理位置特殊，居住小区林立，居住环境优化，饲养宠物者越趋增多。通过近几年来我区有证城镇犬统计数据的显示，2001年2543条；2002年4400条；2003年5072条；2004年6680条；2005年6852条；2006年上升到8912条。城镇宠物犬的饲养数在近几年里迅猛增长，其中还未包括数量

3、庞大的无证犬。但与此形成鲜明对照的是，我国的宠物业发展刚刚开始，对宠物的认识和管理都比较肤浅，与之相配套的疾病控制、宠物保健等方面基本上处于空白。犬是所有动物中与人关系最密切的伴侣宠物，犬在带给我们快乐的同时也把疫病的风险附加给了我们，许多人兽共患病都能通过犬传播给人，如狂犬病、弓形虫病、布鲁氏菌病、莱姆病等，对人类的身心健康同样构成很大的危害或隐患。对宠物犬疾病，特别是主要人兽共患病，展开针对性的流行病学调查，对控制传染源和切断传播途径，保障市民健康起到关键性作用。鉴于此，我们于2006－200

4、7年间对闵行区有证宠物犬的主要人兽共患病（包括狂犬病、弓形虫病、布鲁氏菌病、莱姆病和禽流感等）开展了流行病学调查，基本弄清了本区内宠物犬人兽共患病的感染状况，为制定科学的防控对策提供了技术依据。1材料与方法1.1材料1.1.1犬血清按统计学原理，依据本区不同地区养犬量、人口组成、区域特征、交通教育等信息，随机采取本区吴泾、梅陇、古美、莘庄、颛桥、七宝、虹桥、闵行、航华、龙柏、浦江、华漕和江川等13个镇、街道（社区）有证宠物犬的血样和鼻拭样品。从犬前肢静脉采血，静置待血液凝固后，4000r/min离

5、心后取血清－20℃备用；以棉签同步采集犬鼻拭子，棉拭样品挤压后低速离心，取上清置于每毫升含有10000IU的青霉素和2000μg链霉素的0.01MPH7.2～7.4的PBS中，-80℃冻存。61.1.2试剂狂犬病ELISA试剂盒：来源于美国BIO-RAD公司，批号分别为4130179、4B0179；检测禽流感病毒抗原的层离酶条法试剂和荧光RT-PCR试剂：来源于北京世纪元亨生物技术有限公司，批号分别为06020201、07030202和06090611、06120210；弓形体正向间接血凝实验抗原

6、：来源于兰州兽医研究所，批号060118、070315；布氏杆菌试管凝集实验抗原：来源于黑龙江生物制品一厂，批号200602、200701；检测莱姆病IgG和IgM抗体的ELISA试剂：来源于法国Biomerieux公司，批号分别为801858701和3X0683；SPF种蛋：来源于北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。1.2方法1.2.1狂犬病ELISA试验操作程序和结果判定1.2.1.1以样品稀释液将阴性对照、阳性对照和待检样品作1：100稀释，阴阳性对照各加2孔，待检样品最好也加2孔，每孔10

7、0μl。加样完毕，温和振荡，盖上封口膜，37℃孵育1小时。1.2.1.2洗液作1：10稀释，洗板3次。1.2.1.3酶标抗体现配现用，以1X洗液将浓缩酶标抗体作1：10稀释后加入各孔100μl。振荡，盖上新的封口膜，37℃孵育1小时。1.2.1.4同2法洗板5次，用吸水纸拍干。1.2.1.5将TMB显色液1：11稀释后温和混匀，每孔加入100μl，避光。置暗盒内室温（18－25℃）孵育30min，本阶段不盖膜。1.2.1.6每孔中加入终止液100μl，在30min内以双波长模式测定450－620n

8、mOD值。1.2.1.7结果判定样品OD值>阳性对照（R4b）OD均值，判定为强保护力（＋＋＋）；阳性对照（R4a）OD均值≤样品OD值≦阳性对照（R4b）OD均值，判定为具有保护力；样品OD值<阳性对照（R4a）OD均值，判定为无保护力。1.2.2莱姆病ELISA试验操作程序和结果判定委托上海市动物疫控中心完成。1.2.2.1每一份待检样品、阴阳性对照需取出一个LYT试剂条和一个LYTSPR。1.2.2.2将LYT试剂条和SPR放置于VIDAS准备／载物盘。1.2.2.3在电脑上