竹醋液体外抗皮肤癣菌活性的研究

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1、竹醋液体外抗皮肤癣菌活性的研究【摘要】目的研究竹醋液的体外抗真菌作用。方法采用体外真菌药敏试验方法测定竹醋液对10种临床上常见的致病性皮肤癣菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果竹醋液对皮肤癣菌的MIC在1:256～1:32，MBC在1:128～1:8之间；对白念珠菌的MIC在1:32～1:16，MBC在1:16～1:8之间。结论竹醋液对皮肤癣菌具有较强的抑菌和杀菌效果。【关键词】竹醋液；最小抑菌浓度(MIC)；最小杀菌浓度(MBC)竹醋液是在竹材热解过程中收集的一种液体混合物，液体呈青黄色或黄棕色，

2、具独特的烟熏味。主要由水、有机酸、酚类、酮类、醇类等物质组成，成分相当复杂，用途十分广泛。国内外的研究都表明其具有广谱的抑菌、消毒功能［1～3］。用竹醋液搽涂或稀释浸泡，对治疗脚癣效果较好。但竹醋液对致病性皮肤癣菌的抑制作用，尚未见系统性体外药效学研究［4］。本研究采用体外真菌药敏试验方法测定了竹醋液对10种临床上常见的致病性皮肤癣菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。现报道如下。1材料与方法1．1供试样品竹醋液原液由浙江遂昌文照竹炭有限公司提供；再经实验室不同配方和工艺处理后，分为1～3号样品。1．2受

3、试真菌1．2．1标准菌株个属10个种，每种各1株，分别是表皮癣菌属：絮状表皮癣菌；小孢子菌属：犬小孢子菌和石膏样小孢子菌；毛癣菌属：红色毛癣菌、须癣毛癣菌、断发毛癣菌、紫色毛癣苗、许兰氏毛癣菌和同心性毛癣菌；念珠菌属：白念珠菌。均引自中国医学科学院皮肤病学研究所真菌菌种保存中心。1．2．2培养基以不含任何抗生素的沙堡琼脂和沙堡液基作为基础培养基。1．3方法1．3．1最小抑菌浓度(MIC)的测定采用沙堡琼脂培养基稀释法［5］。1．3．1．1药液培养基的制备将3个竹醋液样品用V/V的方法进行稀释。取无菌试管11支，排成一排，除第1管只

4、加入20ml药基原液外，其余每管加入灭菌蒸馏水20ml，在第2管加入药基原液20ml混匀，然后吸取20ml至第3管，混匀后再吸取20ml至第4管，如此连续倍比稀释至第9管，并从第9管中吸取20ml弃去，第10管为不含供试药液的基础生长对照，第11管为溶媒对照。此时1～9管药基浓度依次为1:1、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256。然后各管分别与灭菌后的倍量沙堡琼脂20ml混匀，再另分装每管，制成斜面，最终使药基浓度分别为：(1)1:2；(2)1:4；(3)1:8；(4)1:16；(5)1:3

5、2；(6)1:64；(7)1:128；(8)1:256；(9)1:512；(10)基础对照；溶媒对照。余样操作同前。1．3．1．2菌悬液的制备及接种挑取1菌环新培养真菌菌落(种于沙保琼脂培养基)混悬于2m1生理盐水中振荡1min，使之充分混匀，将其浊度调至～10×10CFU／ml。用微量加样器从第1管至第10管顺序每管加50μl悬液，混匀，放入26℃温箱，皮肤癣菌培养7天，白念珠菌培养48h，观察并记录抑菌结果。1．3．2最小杀菌浓度(MBC)测定将菌未生长示有抑菌作用的各药基管中，分别加入沙堡基础液基，放置℃孵育h，充分震荡将原

6、接种的菌液洗脱在液体培养基中，再将液体培养基倾入事先准备好的含有沙堡液基的灭菌试管中，此时总液体量为ml，混匀后放入26℃温箱，皮肤癣菌培养7天，白念珠菌培养48h，观察并记录杀菌结果。1．3．3结果判定1．3．3．1最低抑菌浓度(MIC)以沙堡琼脂培养基基础对照管菌已生长为参照，药基管中菌未生长示有抑菌作用。菌未生长的最低药物浓度管就是该提取液对该菌的最低抑菌浓度(MIC)，用V/V表示。1．3．3．2最低杀菌浓度(MBC)先测出M1C，然后经再培养后，在液体培养基中菌又生长为仅有抑菌作用，无杀菌作用；菌仍未生长的为杀菌作用，菌

7、仍未生长的最低药物浓度管就是该提取液的最低杀菌浓度(MBC)，用V/V表示。结果竹醋液1～3号样品对标准菌株的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度测定竹醋液1号样品对7株的MIC为1：256，对2株的MIC为1：128，对1株的MIC为1：32,而且5株的MBC高出MIC1倍，其余菌株的MBC高出MIC2～4倍。竹醋液3号样品的MIC与1号样品基本相同，而MBC高出MIC1倍有6株。竹醋液2号样品的MIC仅1株为1：256，6株为1：128，MBC有7株为1：64。见表1～3。表1竹醋液1号对10种常见致病皮肤菌的ＭＩＣ和ＭＢＣ表2竹醋液2

8、号对10种常见致病皮肤菌的ＭＩＣ和ＭＢＣ表3竹醋液3号对10种常见致病皮肤菌的ＭＩＣ和ＭＢＣ注：“＋”菌已生长示无抗菌作用；“△”在药基上菌未生长，转种到沙堡液基中菌又生长，示仅有抑菌作用，无杀菌作用；“-”在药基上菌未生长，转种到沙堡液基中菌仍未