整合素β1和层粘连蛋白在不孕症患者子宫内膜和正常早孕蜕膜组织中表达的研究

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1、整合素β1和层粘连蛋白在不孕症患者子宫内膜和正常早孕蜕膜组织中表达的研究【摘要】　　目的：检测整合素β1和层粘连蛋白在不明原因不孕妇女子宫内膜、正常子宫内膜和宫内早孕蜕膜组织中的表达情况。方法：采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连接法法检测30例不明原因不孕症子宫内膜组织，20例宫内早孕蜕膜组织及20例正常宫内膜组织中整合素β1和LN的表达水平及分布。结果：整合素β1和LN在宫内早孕蜕膜腺上皮细胞中表达水平增高；整合素β1在不明原因不孕子宫内膜各期腺上皮、基质细胞表达水平显著减低，LN在不明原因不孕子宫内膜表达程度最高。结论：整合素β1和LN在子

2、宫内膜的表达异常可使子宫内膜容受性降低、子宫内膜与胚泡发育不同步，从而使着床失败，导致不孕。【关键词】整合素β1；层粘连蛋白；子宫内膜；不明原因不孕StudyontheExpressionofIntegrinβ1andLaminininHumanEndometriumofInfertilityandNormalEarlyPregnantDeciduasAbstractAbstractObjective：TostudytheexpressionofIntegrinβ1andLaminin(LN)inendometriumwithprimaryunexpla

3、inedinfertility、normalendometriumandearlypregnantdeciduas.Methods：ThelevelofexpressionofIntegrinβ1andLNin0unexplainedinfertility、20earlypregnantdeciduasand0normalendometriumwasmeasuredbyimmunohistochemicalmethod(SPtechnique).Results：TheexpressionsofIntegrinβ1andLNinnormalearlyp

4、regnantdeciduaswerebothhigherthanthoseinthenormalendometrium.TheexpressionofIntegrinβ1ininfertilitywaslowerduringproliferativeandsecretaryphasethanthoseintheforgoinggroups.TheexpressionofLNwasthehighestinthethreegroups.Conclusion：TheabnormalexpressionofIntegrinβ1andLNwillreduceen

5、dometrium’sacceptabilityininfertility,causethefailureofimbedanditcanbringaboutinfertility.Keywordsintegrinβ1;laminin;endometrium;unexplainedinfertility不孕症是妇科常见病之一，夫妇经过各项不孕检查未找到确切的不孕原因者，被称为不明原因不孕症，约占不孕症的10%～20%。随着围着床期各种调节因素研究的不断深入，发现子宫内膜局部调节失衡，导致子宫内膜容受性下降可能是不明原因不孕症的病因之一。整合素和LN几乎参与

6、了胚胎植入的全过程，过量、不足或表达类型异常等均有可能引起不孕，但整合素和层粘连蛋白作用的整个环节尚未完全清楚。本实验采用免疫组化SP法检测不明原因不孕宫内膜组织和正常宫内膜及早孕蜕膜组织中整合素β1和层粘连蛋白的表达水平及分布，探讨它们与不明原因不孕症及正常妊娠的关系，为临床诊断和治疗不明原因不孕症提供某些实验理论依据。　　1材料与方法材料正常子宫内膜组20例，选自XX年1月～XX年7月期间在郧阳医学院附属人民医院因子宫肌瘤行子宫切除及同期正常生育妇女在月经周期各阶段诊断性刮宫术获取的内膜组织的病人；宫内早孕蜕膜组织组20例；不明原因不孕子宫内膜组3

7、0例。主要试剂鼠抗人整合素β1单克隆抗体、链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶连结免疫组化试剂盒、DAB显色剂、PBS缓冲液、柠檬酸缓冲液、常规HE染色试剂伊红、苏木素、酒精、二甲苯等。方法石蜡块4um连续切片，贴于多聚赖氨酸处理过的载玻片，固定。免疫组化染色：①石蜡切片脱蜡和水化，修复；②切片加滴3%过氧化物酶阻断溶液，孵育；③PBS液冲洗，甩去，切片加滴50μl正常山羊血清，孵育；④甩去多余血清，加滴50μl鼠抗人的integrinβ1单克隆抗、鼠抗人的LN单克隆抗，另一张切片加滴50μl的PBS液作阴性对照；⑤PBS液冲洗，甩去，加滴50μl生物素化山羊抗

8、小鼠血清，孵育；⑥PBS液冲洗，甩去，加滴50μl链亲和素—过氧化物酶溶液，孵育