食品微生物指标检测实验方案1

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1、微生物学实验方案题目：食品中微生物指标检测班级：2014级食品科学小组成员：王亮陆申凯万力叶宇家指导老师：马爱民老师时间：2016年12月locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame一、

2、意义1.食品微生物指标是指某个或某批食品中微生物的存在与否（定性分析）或每个质量、体积、单位面积或每批产品中微生物存在的数目及其毒素（或代谢产物）的限制（定量分析），用以评价食品的微生物学卫生状况及其安全性。2.在我国食品卫生标准中，通常微生物指标包括菌落总数、大肠菌群、致病菌等的检测，其中菌落总数和大肠菌群是必检项目，致病菌不得检出。3.食品中微生物菌落总数指食品检样经过处理，在一定的条件下培养后，所得1mL或1g检样中所含菌落的总数，主要作为食品被污染程度的标志，常用倾注平板菌落计数法。大肠菌群是指一群在37℃，24h能发酵乳糖产酸

3、、产气，需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌，它反映了食品是否被粪便污染，同时也间接地指出食品是否有被肠道致病菌污染的可能性，常用的检测方法是最大可能计数法。二、目的1.了解菌落总数、大肠菌群测定在食品卫生评价当中的意义2.学习并掌握细菌分离和活菌计数的基本方法和原理3.学习并掌握大肠菌群的检验方法三、实验器材1.食品检样：VKD咖啡2.培养基平板计数琼脂培养基：将蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1000mL、pH7.0±0.2加于蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH。分装试管或锥形瓶，121℃高压灭菌15

4、min。3.试剂与器皿试剂无菌生理盐水：称取8.5ｇ氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。4.器皿灭菌锅、恒温培养箱：36℃±1℃、冰箱：2℃～5℃、天平、、恒温水浴箱、无菌吸管：1mL、10mL或微量移液器及吸头无菌锥形瓶：容量250mL/3个、500mL/3个无菌培养皿：15个试管：20个容量瓶：100mL，3个locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichli

5、quorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame四、流程检样25g（mL）样品+225mL稀释液，均质25g（mL）样品+225mL稀释液，均质10倍稀释系列选择3个适宜连续稀释度的样品匀液，接种营养琼脂培养基（每个稀释度接种两个平皿、取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿中作空白对照）培养计数1.样品的稀释以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL生理盐水的无菌锥形瓶（放玻璃珠玻璃珠）中，充

6、分混匀，制成1:10的样品匀液。培养待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。2.菌落计数可用肉眼观察，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（CFU）表示。选取菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。3.结果与报告菌落总数的计算方法：若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）样品中菌落总

7、数结果。若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按公式（1）计算:locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame式中：N——样品中菌落数C——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数

8、之和；n1——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数；n2——第二稀释度（高稀释倍数）平板个数；d——稀释因子（第一稀释度）。若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可