肝胆疾病—医学课件

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1、第八章肝胆疾病的生物化学诊断检验医学院：万莉本章内容概要：本章教学要求：第二节肝功能试验第一节概述掌握:黄疸的发生机理和各型黄疸的代谢特点及实验室鉴别诊断要点；肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。熟悉:肝脏的生物化学功能，胆红素代谢；各测定项目的临床意义了解：肝脏的基本结构；肝功能实验项目选择的原则。第三节肝功能试验选择原则第二节肝功能试验血清（浆）蛋白测定血清酶测定血清胆红素测定血清胆汁酸测定血氨测定常用的肝功能试验一、血清（浆）蛋白测定（一）总蛋白、白蛋白及白蛋白/球蛋白（A/G）比值测定1．总蛋白测定化学法(双缩脲法)、物理法、

2、染料结合法、电泳法染料结合法(BCG、BCP）、沉淀法2.白蛋白测定3．A/G比值总蛋白：60～80g/L白蛋白：35～55g/L球蛋白：15～32g/LA/G比值：1.5～2.0/1严重肝病时，肝脏合成分子量小的蛋白质能力降低，血中白蛋白浓度减少；而免疫系统、单核巨噬细胞合成球蛋白增加，导致A/G比值减少。严重则会出现A/G比值小于1，称为A/G比值倒置，表示肝功能损害严重。【临床意义】【参考范围】（二）纤维蛋白原测定（凝血因子Ⅰ）【测定方法】①根据纤维蛋白原的生物学特性测定方法②根据纤维蛋白原理化性质而建立的测定方法。③根据纤维蛋白原免疫学特点而建立

3、的测定方法。2.22～4.22g/L(热沉淀比浊法)(1)纤维蛋白原增加：①感染；②无菌炎症；③其它。(2)纤维蛋白原减少:①严重的肝脏疾病；②其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。【临床意义】【参考范围】（三）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）测定【测定方法】成人10～30µg/L>400µg/L作为肝癌诊断标准酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火箭电泳放射自显影法、酶联火箭电泳法等原发性肝细胞肝癌的诊断。活动性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的诊断。【临床意义】【参考范围】二、血氨测定一步法（直接测定），即不需从全血中分离出

4、氨即可直接测定两步法，即先从全血中分离出氨,而后再进行测定；微量扩散法、离子交换法酶法和氨电极法【参考范围】血氨测定在诊断治疗肝性脑病中占有重要作用。【临床意义】18～72μmol/L(酶法)三、血清胆红素测定重氮盐法酶法高效液相色谱法导数分光光度法直接分光光度计法测定方法1．重氮盐改良J-G(JendrassikandGrofmethod,J-G)法(1)原理血清中结合胆红素与重氮盐反应生成偶氮胆红素；同样条件下，游离胆红素需要在加速剂作用下，使游离胆红素分子内的次级键断裂，极性上升并与重氮试剂反应。反应完成后加入终止试剂，继而加入碱性酒石酸钾钠使紫色

5、偶氮试剂转变为蓝色，波长600nm下比色分析，求出血样中总胆红素的含量。重氮试剂：亚硝酸钠与对氨基苯磺酸的混合液加速剂：咖啡因－苯甲酸钠、二甲亚砜推荐的常规方法，其方法的线性范围较宽，在线性范围有较好的准确性和精确性，高浓度时准确性和精确性降低。因此，建议浓度过高时减少血样用量测定。(2)方法评价2．胆红素BOD测定法(1)原理胆红素氧化酶（BOD）催化胆红素氧化生成胆绿素，胆绿素与氧进行非酶促反应转变为淡紫色化合物，胆红素的最大吸收峰在450nm附近。随着胆红素被氧化，吸光度下降程度与胆红素浓度成正比。在pH8.0条件下,未结合胆红素及结合胆红素均被氧

6、化，用于测定总胆红素。在pH=4.5的酸性条件下，BOD仅能催化结合胆红素，测定其含量代表结合胆红素。(2)方法评价BOD法测定总胆红素的准确性、精密度比改良J-G法好【临床意义】【参考范围】黄疸的诊断及鉴别诊断总胆红素:5.1～19.0μmol/L(0.3～1.1mg/dL)直接胆红素:1.71～6.8μmol/L(0.1～0.4mg/dL)四、血清胆汁酸测定高效液相色谱法免疫分析法测定方法酶比色分析测定法胆汁酸与3-酮类固醇之间构成循环，不断产生硫代还原型辅酶Ⅰ（黄色），控制好条件，反应速度与代测物胆汁酸呈正比。灵敏度可增加数十倍。血清胆汁酸测定（酶

7、比色测定法）（3α-羟类固醇脱氢酶）评价快速、简便、准确、可靠和适用的优点。但试剂价贵、不易保存。灵敏度随反应时间的延长而提高。【参考范围】1～7µmol/L(成人空腹血清总胆汁酸)空腹胆汁酸测定是一种敏感、特异性强并相对简单的肝功能试验，是目前公认最敏感的肝功能试验之一。特别适用于可疑有肝病但其它生化试验正常或轻度异常的病人诊断。CA/CDCA比值可作为胆道梗阻性病变和肝实质性病变的鉴别指标。餐后2小时不增高，提示回肠部位有病变。【临床意义】五、血清酶类4．肝硬化疾病酶活性改变：单胺氧化酶（MAO）1．肝脏合成酶类:胆碱脂酶、凝血因子、铜蓝蛋白2.肝细

8、胞内酶:ALT、AST3．肝脏阻塞性疾病酶活性改变：ALP、GGT（一）转氨酶及