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1、第36卷增刊北京化工大学学报(自然科学版)Vol.36,Sup.2009年JournalofBeijingUniversityofChemicalTechnology(NaturalScience)2009辐照交联透明质酸的降解特性研究3张丽张丽叶(北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029)摘要:用甲基丙烯酸缩水甘油酯(GM)对透明质酸(HA)进行接枝改性,制备交联透明质酸衍生物(GMHA),通过辐照获得透明质酸凝胶。分光光度计测定吸光度表明所制备的HA凝胶是一种可降解的生物材料。其稳定性受到制备
2、条件和环境条件的影响:如HA的分子量为70万时在相对长时间内比分子量为10万时表现的相对稳定;当分子量相同,辐照剂量为1kGy时降解明显,辐照剂量为5kGy时表现出较好的稳定性;HA凝胶在中性环境条件下容易引起降解,在pH=4时表现的相对稳定;中低温度有利于HA凝胶的稳定,在高温50℃时降解迅速。关键词:透明质酸;交联;透明质酸凝胶;稳定性中图分类号:TQ0501425GMHA浓度等制备条件和pH、温度、NaCl浓度等引言环境条件下对HA凝胶稳定性的影响进行了研究。透明质酸(HA)是一种线型聚阴离子黏多糖
3、,是1实验部分人和动物皮肤、玻璃体、软骨组织和关节滑液的重要组成成分。天然的HA除具有高度粘弹性、可塑性、111材料和仪器渗透性以外,还具有良好的生物相容性。但是,天然透明质酸(分子量100万,400万,700万),山东HA水溶性极强、在组织中易扩散和降解,体内存留福瑞达公司;三乙胺,分析纯,天津市福晨化学试剂[122]时间较短,所以在应用上受到限制。厂;甲基丙烯酸缩水甘油酯,分析纯,日本三菱公司;近年来,为了使HA能够更好更广泛的应用于四丁基溴化铵,分析纯,天津市津科精细化工研究医药保健等领域,可以通过
4、对HA进行化学修饰或所;咔唑,分析纯,北京化学试剂公司;四硼酸钠,分[3]者交联,从而改善它的水溶性和降解特性。有文析纯,北京北化精细化学品有限责任公司。60献报道HA及其交联衍生物已被用作类固醇类药Co源,北京原子高科金辉辐射技术有限公司;物、多肽和蛋白类药物及各种抗癌药物的运送载体。DHG29076A真空干燥箱,上海申立玻璃仪器有限公这类新型药物载体能够明显延长药物在用药部位的司;722S分光光度计,上海菁华科技仪器有限公司。存留时间,降低生物降解率,提高生物利用度,减少112交联HA凝胶的制备[42
5、5]其不良反应。取HA0105g,放入20mL去离子水中,待溶解[6]陈森军等利用甲基丙烯酸缩水甘油酯(GM)均匀后依次添加1mL三乙胺,1mL甲基丙烯酸缩接枝到HA链上的方法,通过将改性生成的GMHA水甘油酯,01054g四丁基溴化铵等,旋转搅拌24h,产物用γ射线辐照获得交联的方法,无需引发剂或60℃恒温培养30min。将反应液用丙酮立即沉淀,者催化剂就获得纯度高且无毒的交联HA凝胶衍生并将沉淀物洗涤2次后干燥至恒重。将干燥后的白物。在此实验结果的基础上,本文通过测定葡萄糖色固体配制成不同浓度的溶液,
6、在不同辐照剂量下醛酸的方法综合考察了该方法制备得到的HA凝胶进行γ射线辐照,剂量率为20Gy/min,即得交联的降解稳定性,并且分别在分子量、辐照剂量、HA凝胶。113HA凝胶降解性测定收稿日期:2009202225通过测定葡萄糖醛酸含量来表征HA凝胶的降第一作者:女,1978年生,硕士生解情况[728]。将样品试管置于冰水浴中,用酸式滴3通讯联系人定管缓慢的向每管中加入01025mol/L四硼酸钠硫E2mail:lyzhang@mail.buct.edu.cn酸(使用之前在4℃冰箱内贮存至少2h)5mL
7、,将其增刊张丽等:辐照交联透明质酸的降解特性研究·47·溶液混匀并置沸水浴中煮沸20min后取出,冷却至这里也需要指出并不是辐照剂量越大越好,随着辐室温。各试管内均加入咔唑乙醇溶液012mL,待充照剂量的进一步增大,因辐照而产生的交联与降解分溶解后,置于室温2h。用0号管(和样品管等量的动态平衡就会向降解偏移,可能会随着辐照剂量的去离子水)做对照,用分光光度计测定550nm处的增大交联度反而降低。各样品管的吸光度。经透明质酸钠水解后生成的葡萄糖醛酸能与咔唑试剂作用产生紫色,生成的颜色深浅与葡萄糖醛酸质量分
8、数成正比。吸光度的大小和葡萄糖醛酸质量分数成正相关,进而反映HA的[9]降解情况。2结果与讨论211制备条件对HA凝胶稳定性的影响21111分子量分子量对HA凝胶的影响如图1所示,由图1可以看出,随着时间的增加,分子量大的HA交联而图2辐照剂量对HA凝胶降解性的影响Fig.2Theeffectoftheirradiationdosageonthe成的凝胶在相对长时间内比较稳定,降解缓慢。而degradationofHAgels
