鲜、生、熟地黄药材中3种活性成分含量的比较

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1、万方数据第33卷第15期2008年8月中国中药杂志Chi聃Jou珈啪ofChine辩MaterhMem姐V01．33．I咖e15Au弘毗，2∞8鲜、生、熟地黄药材中3种活性成分含量的比较王宏洁1，金亚红1，李鹏跃1，李丽华2，边宝林1’(1．中国中医科学院中药研究所，北京100700；2．北京中医药大学东方医院，北京100078)地黄为玄参科植物地黄月铣，m胁玩咖i，娜口u-boseh．的新鲜或干燥块根。始载于《神农本草经》草部上品，为我国的“四大怀药”之一。临床上有3种用药形式鲜地黄、生地黄、熟

2、地黄。三者性味、归经、功能主治有较大的差异，鲜地黄性寒，味甘、苦，偏于清热生津，凉血止血；生地黄性味甘、寒，长于清热凉血，养阴，生津；熟地黄性味甘，微温，重在滋阴补血，益精填髓。根据文献报道，鲜、生、熟地黄药理活性，含有的主要成分均有较大的差异，随着鲜地黄加工成生地黄、熟地黄，其化学成分的组成也发生量与质的改变。在作者过去对地黄的研究中发现，地黄中环烯醚萜苷及酚性苷成分在加热、蒸晒过程中发生分解破坏，低聚糖含量减少【l刮。本研究主要是利用HPLC法对地黄中的3种具有代表性的活性成分：毛蕊花糖苷(苯

3、乙醇苷类)、梓醇(环烯醚萜苷类)、5-羟甲基糠醛(美拉德反应物)进行了含量比较，通过成分含量变化规律的比较研究，为鲜、生、熟地黄在加工及生产中的质量控制，提供具有参考价值的科研数据。1仪器、试剂与药材安捷伦1100高效液相色谱仪；美国FinIlig粕咖ce一啪GC—MS仪；甲醇为Fisher公司色谱纯。鲜地黄来源于河南省境内9个不同栽培地点；生地黄、熟地黄：来源于国内11个不同地区，经中国中医科学院中药研究所何希荣主管技师鉴定为玄参科植物地黄兄∥以i，螂口的块根，切片，经80℃真空干燥，粉碎过60

4、目筛；5一羟甲基糠醛(5一HMF，UsA，AC—ROSOrgaIlics，kt：A0222312，纯度>98％)，毛蕊花糖苷、梓醇自制，纯度>98％。2方法与结果2．1样品中被测成分的确定毛蕊花糖苷、梓醇利[收稿日期】2007．10．09[通讯作者】‘边宝林，1'eJ：(010)84041249，E-md：bi彻Ⅲ曲@yahoo．咖．cn用HPLC．uV，HPLC．MS色谱法对样品进行分析，结果显示，样品中被测成分的色谱峰与对照品色谱峰的保留时间相同，且显示相同的相对分子质量。5-羟甲基糠醛成分确

5、定：经过HPLC-UV，Gc-MS分析，样品色谱图中的被测峰与5-羟甲基糠醛对照品的出峰时间、相对分子质量相同，且与其质谱谱库中5．羟甲基糠醛相对分子质量一致。2．2色谱条件毛蕊花糖苷YWGC他色谱柱(4．6姗×250mm，10岬)；流动相甲醇-冰醋酸一水(33：1：66)，检测波长330舢，柱温35℃。流速1mL·IIIin～。梓醇流动相o．1％磷酸水溶液，检测波长210啪，柱温35℃；流速1mL·Inin～。5-羟甲基糠醛I湘In幽il色谱柱(4．6舢×250姗，5斗m)；流动相甲醇旬．1％磷

6、酸水溶液(7：93)，检测波长279衄，柱温30℃；流速1mL·min～。2．3对照品溶液的制备精密称取毛蕊花糖苷对照品适量，甲醇-冰醋酸一水(33：1：66)混合溶剂定容，制成0．03mg·mL。1的溶液。精密称取梓醇对照品适量，0．1％磷酸水溶液溶解定容，制成0．03mg·mL。的溶液，精密称取5一羟甲基糠醛对照品适量，甲醇溶解定容，制成0．0095mg·mL。1的溶液。2．4供试品溶液的制备毛蕊花糖苷的样品制备：取鲜地黄干燥样品1．0g，精密称定，至100mL锥形瓶中，准确加入流动相50mL

7、，称重，室温放置30nlin，于95℃水浴上回流提取30Inin，放冷至室温，称重，补充失去的溶媒，摇匀，滤过，通过0．45岬的膜滤，取续滤液依法进行HPLC测定。梓醇的样品制备：精称干地黄样品粉末1．0g，至100lllL锥形瓶中，加水50mL，称重，室温放置30lllin，于超声波提取器中超声提取30lllin，取下放至室温，称重，补充失去的溶媒，摇匀，滤过，取续滤液10mL水浴蒸干，拌人1g硅胶，混匀，装入硅胶色谱干柱(2g，300～400目，色谱柱：1cm×15cm)中，先用三氯甲烷30m

8、L冲洗，弃去，再用三氯甲烷与甲醇·1923·万方数据第33卷第15期2008年8月中国中药杂志Chi衄Jo哪maIofChine∞MateriaMem姐VoI．33．I略¨15AIlgllsI．2008(1：1)混合溶媒30mL冲洗，收集流出液，蒸干，残渣用水溶解并转移至5mL量瓶中，定容，摇匀，以O．45¨皿的膜滤过，取续滤液依法进行HPLC测定。测定5一羟甲基糠醛的样品制备：取熟地黄粉末约1．Og，精密称定，置100tnL锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定质量，室温放置30I