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1、万方数据林业科学研究2008,21(6):867~870ForestResearch文章编号:1001—1498(2008)06-0867-04东北刺人参组培快繁培养基的筛选奉顾地周,朱俊义,姜云天,周繇(通化师范学院生物系,吉林通化134002)关键词:东北刺人参;愈伤组织;再分化;均匀设计中图分类号:s567.5+1文献标识码:AStudyonCultureMediaforMicropropagationofOp/opanaxelatusNakai.GUDi-zhou,ZHUJun-yi,JIANGYun—tian,ZHOUYou(Departmento
2、fBiology,To咄∞NormalUniversity,Tong}Iu134002,Jilin,China)Abstract:TakingthetenderleavesofOplopanaxelatusasexplantsfortheexperiment,UniformDesignwereusedtotestthemostsuitablemediaforcaHusinduction,differentiationofshootandrooting.TheresultsshowedthatN6+6一BA0.5mg·L一1+2,4-D0.2mg·L一1+Vc
3、10mg·L~wasfittedforcallusinduction,themediumfordifferentiationofshootWasN6+6-BA4.5mg·L一1+NAA0.1mg·L一1+Vc20mg·L一1,themediumforrootingWasI/4MS+IBA0.1mg·L一1+NAA0.1mg·L-i.Tissueculturerequireddifferentkindsofculturemediaindifferentphases.Keywords:印却临麟elatus.;callus;differentiation;Unif
4、ormDesign东北刺人参(OplopanaxelatusNakai.)又称刺参,五加科(Araliaceae)多年生落叶灌木,其干燥根和茎均可人药,是一种用途广泛的中药材。近些年来,医药科研工作者对其成分及药理进行了大量的试验和研究,其结果表明,根、茎入药有类似于人参的作用,可用于治疗神经衰弱、低血压和风湿性关节炎等症¨1。白求恩医科大学基础医学院、第一临床学院对东北刺人参茎挥发油成分及其抗皮肤癣菌作用进行了活性研究,得出了其抑杀皮肤癣菌活性显著的结论旧1。另外,吉林铁路中心医院和吉林省康复医院对东北刺人参抗衰老作用进行了实验并得到了验证”-。东北刺人参
5、扦插成活率很低,种子萌发率亦很低,靠常规繁殖非常困难”曲-,因此,药用的东北刺人参来源于自然采掘,使得自然资源遭到严重破坏,该物种已处于濒危状态,被列为国家二级保护植物,吉林省一级保护植物一叫-,所以,利用组织培养来快速繁殖东北刺人参是对其资源进行保护的有效途径之一p““。金英善等曾对东北刺人参愈伤组织的诱导进行过研究¨⋯,但未见再生植株产生的报道,其他有关东北刺人参组织培养技术方面的系统性研究也尚未见报道。本文应用均匀设计对东北刺人参愈伤组织诱导、芽苗分化及生根培养基进行了筛选,并得到了最佳的组织培养条件,对该物种的开发和利用具有重要意义。1材料与方法1.
6、1材料长白山自然保护区内东北刺人参新发嫩叶片,顶芽萌发时即采(带叶柄)。1.2方法1.2.1培养条件培养基均以N。、MS作基本培养收稿日期:2007-09—15基金项目:围家科技部“国家科技攻关计划引导项目”资助项目(2005BA741C)作者简介:顾地周(1973一),男,吉林通化人,讲师,主要从事长白山区珍稀濒危和珍稀濒危药用植物研究.E-mail:gudizhou@163.tom·致谢:在研究过程中,得到中国农业大学观赏同艺与园林系刘青林博士的大力支持和帮助,谨此致谢!万方数据868林业科学研究第2l卷基,附加蔗糖分别为50g·L“和30g·L。1(生
7、根培养为15g·L叫),琼脂7.0g·L~,pH值5.5,附加相关植物生长调节物质,温度控制在26±2oC,光照强度800Ix,光照周期10h·d~。1.2.2外植体处理将东北刺人参嫩叶(带少量叶柄)剪下,在超净工作台上用70%酒精中涮洗10s,用0.1%升汞溶液浸泡3min,无菌水冲洗8次,用无菌滤纸将外植体表面的水分吸干¨引,切除受杀菌消毒剂损害的组织后备用。1.2.3愈伤组织诱导N。为基本培养基,将整叶作为外植体正面朝上接种到附加不同浓度的6-BA和2,4一D的培养基上进行愈伤组织诱导培养,为防止切口基部褐化加入维c10mg·L~,根据各处理诱导已产生
8、愈伤组织的外植体数和接种的外植体总数比值(即愈伤组织
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