测定外周血核黄素及其衍生物含量的hplc方法研究

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1、维普资讯http://www.cqvip.com营养学报2006年第28卷第1期79测定外周血核黄素及其衍生物含量的HPLO方法研究韦京豫，郭长江，徐静，杨继军，庞伟，徐琪寿(卫生学环境医学研究所，天津300050)I摘要l目的：建立测定外周血核黄素及其衍生物FMN、FAD含量的高效液相色谱方法。方法：血浆和红细胞样品用乙腈、三氯甲烷处理，离心后取上清液进样分析。采用WatersAtlantisTMC8色谱柱(150mm×4．6mmi．d．，5m)分离，以甲醇一5mmol／L乙酸铵(体积比为35：65)为流动相，流速1．0ml／min，荧光检测器检

2、测(激发波长450nm，发射波长520nm)。结果：本法测定核黄素、FMN、FAD的线性范围均为1～4OOnmol／L，最低检测限依次分别为0,2、O．25、O．25nmol／L(S／N=3)；日内和日间测定的峰面积的相对标准偏差(RSD)核黄素分别为1．3％，2．2％，FMN分别为2．9％，3．7％，FAD分别为2．O％，3．6％。三者在血浆样品和红细胞样品中的加标回收率均达到要求。结论：本法灵敏、快速、准确，可用于测定血浆和红细胞中核黄素、FMN、FAD含量。【营养学报，2006，28(1)：79一B2】关键词：高效液相色谱法；核黄素；FMN；

3、FAD；血浆；红细胞中图分类号：R151．文献标识码：A文章编号：0512-7955(2006)01-0079-04DETERMINATIONOFRIBOFLAVIN，FMN，ANDFADINHUMANPLASMAANDERYTHROCYTESBYHIGHpERFORMANCELl0UlDCHROMATOGRAPHYwEIJing—yu，GUOChang~iang，xuJing，YANGJi-jun，PANGwei，xuQi—shourInstituteofHygieneandEnvironmentalMedicine，Tianjin300050，

4、China)[Abstract]Objective：Todevelopahighperformanceliquidchromatographic(HPLC)methodfordeterminationofriboflavin，FMN，andFADinhumanplasmaanderythrocytes．Method：Waters600modelHPLCpumpandanAtlantisC18column(150mm×4．6mmi．d．5m)wereused．Themobilephaseconsistedof35％methanoland65％5mmo

5、l／Lammoniumacetatesolution．Theflowratewas1．0ml／min．Thespectro—photofluorimeterwassetatwavelengthof450amforexcitationand520amforemission．PlasmaanderythrocytehemolyzedsamplesweretreatedwithacetonitrileandchlorofoITI1．andthesupernatantwasanalyzed．Results：Agoodlinearcorrelationexi

6、stedbetweenriboflavin．FMNandFADconcentration(fromlto400nmo儿)andfluorescenceintensity．Thedetectionlimitswere2．0nmol／L，2．5nmol／Land2．5nmol／Latasignaltonoiseratioof3．respectively．Theintra—assayandinter-assayrelativestandarddeviationswereintherangeof1．3％to3．7％．Therecoveriesforribo

7、flavin．FMNandFADinbothplasmaanderythrocytesweresatisfactory．Conclusion：Thismethodfordeterminationofriboflavin，FMN，andFADinhumanplasmaanderythrocytesissensitive，rapidandaccurate．【ACTANUTRIMENTASINICA，2006，28fl1：79—821Keywordsthighperformanceliquidchromatographytriboflavin；FMN；F

8、AD；plasma；erythrocyte收稿日期；2005—06—10基金项目：达能膳食营养研究与宣教基金项目(DIC2