1.2 基因工程的基本操作程序

《1.2 基因工程的基本操作程序》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、1．2　基因工程的基本操作程序学习目标:1、基因工程的原理2、掌握并理解基因工程的基本操作程序3、尝试设计某一转基因生物的研制过程。学习重点:基因工程的原理及基本操作程序学习难点:1、从基因文库中获取目的基因。2、利用PCR技术扩增目的基因预习篇：一．基因工程的基本操作程序(1)____________________________的获取。(2)______________________________的构建。(3)将目的基因导入___________________。(4)目的基因的______

2、____________________。二．目的基因的获取(1)目的基因：主要是指______________的基因，也可以是一些具有_________的因子。(2)常见方法：①从基因文库中获取基因文库的种类:____________________、__________________________________②利用PCR技术扩增目的基因a．原理：____________________________________。b．条件：_____________________、DNA模板、___

3、__________________、四种脱氧核苷酸。c．过程：目的基因DNA受热变性后解链为单链，____________与单链相应互补序列结合，然后在_____________________________作用下进行延伸，如此重复循环多次。d．结果：每一次循环后，目的基因的量可以_____________________________，即成指数形式扩增(约为2n，n为扩增循环的次数)。③人工合成法：如基因比较小，____________________________又已知，可借助______

4、__________________________用化学方法直接人工合成。特别提醒　(1)真核细胞的基因编码区含有不能表达的内含子，因此，不能直接用于基因的扩增和表达。获得真核细胞中目的基因时，一般用人工合成的方法。(2)PCR扩增的过程：目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应的互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。由于延伸后得到的产物同样可以和引物结合，因而每一次循环后目的基因的量可以增加一培，即成指数形式扩增(约为2n，其中n为扩增循环的次数)。【预习巩固

5、】下列获取目的基因的方法中需要模板链的是(　　)。①从基因文库中获取目的基因　②利用PCR技术扩增目的基因　③反转录法　④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A．①②③④B．①②③C．①②④D．②③三、基因表达载体的构建1．基因表达载体的构建(1)基因表达载体的组成①启动子位置：基因的首端。功能：是___________识别和结合的部位，驱动基因转录出________。②终止子位置：基因的尾端。功能：使___________-在所需要的地方停止下来。③标记基因：鉴别受体细胞中是否含有_________

6、__________。5(2)基因表达载体的功能使目的基因在受体细胞中_____________，并且可以遗传给下一代，使目的基因能够______________和发挥作用。(3)基因表达载体的构建一般用_____________分别切割载体和目的基因，再用__________-把两者连接。特别提醒　基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。四．将目的基因导入受体细胞(1)转化的概念目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内_______________的过程。(2)将目的基因导入植

7、物细胞①___________________法：将目的基因导入双子叶植物和祼子植物。②____________________法：将目的基因导入单子叶植物常用的方法。③____________________法：我国科学家独创的一种方法。(3)将目的基因导入动物细胞方法：__________________________________法。常用受体细胞：____________________________。(4)将目的基因导入微生物细胞第一步：首先用Ca2＋处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环

8、境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为____________________________-细胞。第二步：将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收___________________________，完成转化过程。特别提醒　(1)对于植物来说，受体细胞可以是受精卵和体细胞，但常用体细胞。(2)对于动物来说，受体细胞一般是受精卵。受精卵作为受体细胞具有体积大、易操作、经培养可直接表达性状的优点。而动物体细胞