蜂胶提取物对eds76v的灭活作用效果研究

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1、2004学术年会囝899蜂胶提取物对EDS_76V的灭活作用效果研究王艳，沈志强’，李峰，刘吉山，昊信明，赵蕾，苗立中山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广中心，山东省滨州畜牧兽医研究所，滨州256600摘要：本文通过鸭胚接种的方法就蜂胶乙醇浸出物对EDS_76V的灭活作用进行了试验观察。结果表明，常温下3分钟含蜂胶乙醇浸出物lmg／ml的95％乙醇稀释液，常温下30分钟含蜂胶乙醇浸出物0．1mg／ml的95％乙醇稀释液，37℃3分钟、30分钟，含蜂胶乙醇浸出物0lmg／ml的95％乙醇稀释液，37℃3分钟，含蜂胶乙醇浸出物25mffml的47．5％乙醇稀释液

2、，37℃30分钟，含蜂胶乙醇浸出物12．5mg／ml的475％乙醇稀释液均对EDs一76株具有完全的灭活作用。常温下3分钟含蜂胶乙醇浸出物01mg／ml的95％乙醇稀释液，常温下3分钟含蜂胶乙醇浸出物12．5mg／ml的47．5％乙醇稀释液，常温下30分钟含蜂胶乙醇浸出物5mg／m147．5％乙醇稀释液，37℃3分钟，含蜂胶乙醇浸出物125m∥ml的47．5％乙醇稀释液，37℃30分钟，含蜂胶乙醇浸出物5m∥ml的47．5％乙醇稀释液对EDS-76V株有部分灭活作用。关键词：蜂胶；EDS-76v；灭活作用蜂胶(Propels)是蜜蜂从植物的树芽、树皮等部

3、位采集的树脂，再混以蜜蜂舌腺，蜡腺等腺体的分泌物，经蜜蜂加工转化而成的一种胶状物质。蜂胶内含有多种酸类、醇类、酚类、酮类、醚类、酯类、烯烃和萜类化合物以及20多种黄酮类化合物，还有多种氨基酸、酶和多糖、脂肪酸以及vA、v。、vc等多种维生素。蜂胶中有效成分之复杂，使其成为一种具有广谱生物学活性的天然物质，可以提高机体的免疫功能，具有抗病菌、霉菌、病毒与原虫等作用。本文通过鸭胚接种的方法就蜂胶乙醇浸出物对EDS的灭活作用进行了试验观察。1材料与方法1．1试验材料天然蜂胶由山东某蜜蜂养殖场提供，试验毒株ESD--76(半数感染量为：10。65，o．1m1)由

4、本所传代保存，10日龄鸭胚由山东某养殖场提供，95％乙醇购自山东某酒厂，生理盐水由本所按常规配制，1％红细胞由本所按常规配置。1．2试验方法1．2．1蜂胶乙醇漫出物的提取按沈志强方法进行1．2．2蜂胶乙醇浸出物对EDS---76株的灭活作用将蜂胶乙醇浸出物分别用95％7,醇、47．5％乙醇与生理盐水稀释，使蜂胶含量(m譬，m1)分别为25、125、10、6．25、5、2．5、1、0．1。将EDS--76株用生理盐水做50倍稀释，分别与上述含蜂胶乙醇浸出物稀释液等量混合，根据作用温度不同分为两个试验组，一组常温下分别作用3分钟、30分钟，另一组37℃分别作

5、用3分钟、30分钟。然后各接种10枚10日龄健康鸭胚，接种量为O．2ml／枚。另分别取95％乙醇、47．5％乙醇、生理盐水与50倍稀释的EDS病毒液等量混匀，连同50倍稀通讯作者900囝2004学术年会释的EDS病毒液作为对照组，各接种10枚10日龄健康鸭胚，接种量为o．2mff枚。将上述接种后的鸭胚置孵化器中孵化。1．2．3HA测定将24小时内死亡的鸭胚弃去，48小时后死亡的鸭胚连同孵化至120小时的活胚按试验组别，分别收取各稀释度全部鸭胚尿囊液，B微量法测定其HA。1．2．4胚体观察分别取生理盐水、12．5％蜂胶乙醇浸出物接种10日龄健康鸭胚各10枚

6、，—㈣—0．2mU枚。将接种后的鸭胚置孵化器内孵化120小时，观察胚体变化。2结果2．1HA测定B微量法测定试验各组别鸭胚尿囊液HA，具体结果见表1，同时测定对照组各组别鸭胚尿囊液HA，具体结果见表2。2．2胚体观察分别取接种生理盐水、12．5％蜂胶乙醇浸出物鸭胚胚体观察，两者均生长良好，无任何差异性变化。蜂胶乙醇浸出物浓度(m∥m1)组别251251062552510．13A0O0O0O04分B89101l钟C10ll1l1230AO0O0O常温分B5810钟C9101l123AO0O0O分BO8101112钟C9t0111230A0O0O037℃分B

7、0781011钟C9101112组别95％乙醇+种毒475％乙醇+种毒生理盐水+种毒种毒稀释液3分钟812常温30分钟95103分钟101237℃30分钟10912说明：“A”组以95％乙醇为稀释剂，⋯B组以475％乙醇为稀释剂，⋯C’组以生理盐水为稀释剂2004学术年会囝9013小结与讨论3．1试验结果表明，常温下3分钟含蜂胶乙醇浸出物lmg／ml的95％乙醇稀释液，常温下30分钟含蜂胶乙醇浸出物0．1mg／ml的95％乙醇稀释液，37℃3分钟、30分钟，含蜂胶乙醇浸出物o．1mg／ml的95％乙醇稀释液，37℃3分钟，含蜂胶乙醇浸出物25mg／ml的

8、47．5％乙醇稀释液，37。C30分钟，含蜂胶乙醇浸出物12．5mg／ml的47