实验一 动物的实验技术和方法

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1、实验一动物的实验技术和方法实验一动物的实验技术和方法动物实验的方法是各种各样的，如常用模型复制法、切开和分离法、切除和注入法、离体组织器官法等，在不同的研究领域有其不同的目的和应用，但是一些基本的操作技术方法是一样的，如动物的抓取、固定、标号、脱毛、麻醉、给药、采血、采尿、处死等，对于实验研究者来说无论从事哪一类研究项目，都会不同程度的应用这些技术。下面以大鼠为例，介绍相关的动物实验技术。动物的抓取和固定方法抓大鼠时，最好戴上防护手套。如果是灌胃、腹腔注射、肌肉和皮下注射时，可用拇指、食指捏住大鼠的耳朵及头颈皮肤，余下的三指紧捏住背部皮肤，置于掌心中，调整大鼠在手中的

2、姿势后即可操作。另一种方法是张开左手虎口，迅速将拇指、食指插入大鼠的腋下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身体中段，并将其保持卧位，之后调整左手拇指位置，紧压在下颌骨上（不可过紧，否则会造成窒息），即可进行实验操作。若对大鼠进行采血和手术操作，需对大鼠进行麻醉后，将四肢用棉线固定在实验板上，为防止苏醒时伤人或便于颈、胸部实验操作，应用棉线将大鼠两上门齿固定于实验板上。二、动物的编号、标记、分组和被毛方法1、和标记方法在动物实验中，为了观察每个实验动物的反映情况，必须对实验动物进行编号、标记。标记的方法应该保证号码清楚、耐久、简便、易认和使用。比如：染色法、挂牌法、烙印

3、法、耳孔法。一般来说，小型动物适宜用耳孔法和染色法，中型动物适用挂牌法和烙印法。大鼠常常选用染色法，即用化学剂在动物身体明显的部位如被毛、四肢等处进行涂染或用不同颜色等来区别各组动物，是最常用、最容易掌握的方法。这种方法多用于实验周期较短，动物数量不多的情况。动物无疼痛和损伤，但由于动物之间相互摩擦、舔毛、尿、水浸渍被毛或脱毛，或因日久颜色自行消退，应及时发现，及时补染。常用编号标记溶液有：①3%-5%苦味酸溶液，涂然橙黄色；②2%硝酸银溶液，涂染成咖啡色（涂后需光照10min）；③0.5%中性红或品红溶液，涂染成红色；④煤焦油酒精溶液，涂染成黑色；⑤龙胆紫溶液，涂染

4、成紫色。标记时，用标记笔蘸取上述溶液，在动物体表不同的部位涂上斑点，以示不同号码。编号的原则是：先左后右，从前到后。一般把涂在左前脚上的记为1号，左侧腹部为2号，左后腿为3号，头顶部为4号，腰背部为5号，尾基部为6号，右前腿为7号，右侧腰部为8号，右后腿为9号。若动物编号超过10或更大数字时，可使用上述两种不同颜色的溶液，即把一种颜色作为个位数，另一种颜色作为十位数，这种交互使用可编到99号。2、动物的随机分组①将实验单位随机分成两组设小鼠14只用随机数字表将其分成两组。动物编号1234567891011121314随机数目1622779439495443548217

5、379323归组BBABAABABBAAAA单—A组双—B组A组8只，B组6只，将A组减少1只划归B组，在第14个随机数后再抄录一个数字78，以8除之余数6，把第6个A（即编号为12号的小鼠）划给B组.即：A组:3568111314B组:124127910②将实验单位随机分成三组设有动物15只，随机分成A，B，C三组。动物号：123456789101112131415随机数：186240191240839534194491690330除3后余：321131221121333归组：CBAACABBAABACCC使三组动物数相等，把原归A组的6只动物中1只改配到B组，可从

6、随机数字表，斜角线，抄录一个数字，得60。以6除。除尽（相等于余数为6），就可以把第六个A（即12号）动物改为B组。即：A组：346910B组：2781112C组：151314153、动物被毛的去除方法动物的被毛常能影响实验操作和实验结果的观察，因此实验中常需去除或剪断动物的被毛。除毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脱毛四种。①剪毛法将动物固定后，用弯圆头手术剪紧贴术者左手指紧绷的动物皮肤，依次将所需实验部位的被毛剪去。可先粗剪，然后再细剪，不可用手提着动物被毛剪，这样容易剪破皮肤。②拔毛法兔耳缘静脉注射或取血时，以及给大白鼠、小白鼠做尾静脉注射时，需用拇指、食指将局部被毛

7、轻轻拔去一撮，需要时在拔毛处抹一些液体石蜡油或凡士林使血管清晰明显以利于操作。③剃毛法将所需剃毛部位的被毛先用剪刀粗剪一遍，然后蘸温肥皂水，将此部位润湿，用剃刀顺被毛方向剃毛。或者使用电动毛推，逆被毛的方向剃毛。此法常用于豚鼠等动物。④脱毛法脱毛是指化学脱毛剂将实验动物被毛脱去，适用于无菌手术野的准备以及观察动物皮肤血液循环和病理变化。方法是将需要脱毛部位被毛先用弯头剪刀剪去，尽量剪短，勿剪破皮肤。然后用温水将该部位润湿，再用纱布包扎棉球的小棒蘸脱毛剂，在需要脱毛的部位涂一薄层。经2-3min后，用温水洗去该部位脱下的毛，自然晾干备用，切勿用纱布去擦