无刺蜂采集的花粉化学组成和自由基清除力

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1、万方数据无刺蜂采集的花粉化学组成和自由基清除力摘要:为了评价蜂花粉的化学组成、植物来源和自由基清除能力,以巴西无刺蜂(Meliponasubnitida)采集的黄色和褐色花粉为样品,黄色花粉由三种类型的植物花粉组成,其中Mimosagemmulata花粉占98.95%。褐色花粉由五种类型植物来源的花粉组成,其中豆科植物浅色花粉占89.84%。在巴西东北部半干旱的地区植物种类丰富,无刺蜂(Mimosasubnitida)只采集几种植物的花粉。从黄色花粉中分离出的化合物有柚皮素、异鼠李素和D一甘露醇,从褐色花粉中分离出的化合物有B一谷甾醇、37,47,57,5,7一五羟黄酮、亮石松碱和8一甲氧基草

2、质素。亮石松碱和D一甘露醇(34.9%)是首次从蜂花粉分离得到的化合物。用清除DPPH自由基实验评价不同溶剂蜂花粉提取物的抗氧化活性,抗氧化活性大小按下面顺序依次递减:乙酸乙酯提取液>乙醇提取液>己烷提取液。结果表明,蜂花粉乙酸乙酯提取物富含黄酮类化合物,是一种良好的活性氧自由基清除剂。蜂花粉含有丰富的蛋白质,脂质,维生素,黄酮类物质(占干重的3-5%)。市场销售的蜂花粉主要来自饲养的蜂群(apismeUifera),但是其他野生蜂群,如无刺蜂(MeliponasubnitidaDucke)也采集、利用花粉,这种蜂分布在巴西东北部。蜜蜂的主要作用是保护环境,通过蜜蜂授粉,可在半干旱的Caati

3、nga地区(灌木植被)和潮湿的亚马逊地区种植玉米,并使水果和粮食作物增产。蜂花粉具有良好医疗特性。古代就曾使用花粉,并一直延用至今。到现在没有科学依据证明蜂花粉所宣称的特性。最近的研究集中于一种特殊成分,如酚类化合物。活性氧自由基是癌症、大脑和心肌缺血、动脉粥样硬化、帕金森病、胃肠紊乱、衰老和其他疾病的致病因子,紫外线和致癌物等外界因子和自然代谢可以导致机体产生氧化自由基。当产生的自由基数量超过人体抗氧化和防御修复系统时,它们可以分解细胞重要组成成分如联合酶,神经递质和大分子物质如核酸、蛋白质、脂类和碳水化合物。活细胞使这些氧化自由基失活的能力较低。众所周知,外源性抗氧化剂可以改善重要细胞组分

4、的保护能力和生理功能。维生素c和E、B一胡萝b素以及各种酚类化合物(黄酮类化合物)是主要外源性抗氧化剂,主要来自食品,其中黄酮类化合物的抗氧化功效与其结构有较大关系。1材料与方法1.1样品:M.subnitida花粉团(巴西称iandaira),2002年8月,在巴西半干旱SitioRiacho地区采集。花粉从蜂巢取出,装人储藏瓶,置于冰箱。1.2花粉粒植物来源:样品花粉粒(29)溶解于水,使花粉团分解成花粉粒,匀质,冰醋酸脱水,离心,花粉沉淀物用乙酰锯方法进行孢粉学研究。把样品放在5张带用番红精染色的甘油明胶的幻灯片上观察,计算花粉粒个数(每张幻灯片至少500粒花粉),计算各种花粉类型的花粉

5、率,确定花粉类型。1.3提取和分离:根据颜色将蜂花粉样品分成两类:黄色和褐色花粉,对花粉样品进行分析。从花粉除掉脂质提取酚类组分顺序归纳如下:用乙醇在水浴超声条件下提取褐色花粉(53.89),提取液过滤,减压浓缩。提取液过滤后的残渣溶解在甲醇:水(7:3w/w)中,然后用正己烷提取脂类物质,用乙酸乙酯分离有机相中的酚类化合物。蒸发除去溶剂。正己烷提取物(2.19)上凝胶柱,第一步采用正已烷洗脱,然后采用乙酸乙酯和甲醇洗脱。甲醇洗脱液重结晶得到化合物1(26。0mg)。酚类化合物成分(4.59)过凝胶LH一20柱,以甲醇作为洗脱液。得到的黄酮类化合物用铝箔硅胶(60一F254,Merck公司)薄

6、层层析板分析,喷涂1%联二苯硼烷基羟乙胺(NP)溶液,显像后在366nm的紫外光下检测。从酚类组分中分离得到黄酮类物质2(20.0mg)、3(2.0mg)和4(5.0mg)。黄色花粉(22.99)用乙醇超声提取。提取液真空浓缩产生白色沉淀5(8.Og),将沉淀乙酰化(醋酸酐万方数据2009V01.60No.12中国蜂业APICULTUREOFCHINA国外养蜂科技55和吡啶,100。C,6h)得到衍生物5a.。剩余的乙醇上Wollenwebe等发现查耳酮苷元,Srohl等(1965年)清液,根据上面所描述的程序分析,从酚类组分中发现双氢黄酮醇。最近,有文献报道从花粉中发现类得到黄酮类化合物6(

7、20.0mg)和7(60.0mg)。黄酮和黄酮醇化合物。本实验从M.subnitida花粉中用l,1一diphenyl一2一picrylhydrazine(DPPH)自由发现的所有黄酮类化合物都是苷元,并且首次报道基清除试验评价各分离组分抗氧化性。将酚类化合了从蜂花粉中分离出亮石松碱。此外,还分离出的黄物提取液自由基清除率结果与其他文献报道比较。酮类化合物:3’,4’,57,5,7一五羟黄酮、异鼠

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