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1、第33卷第5期(2007)·58·PLANTPROTECTIONVol.33No.5(2007)研究报告利用伏马毒素合成基因对玉米种子寄藏镰刀菌的分子检测1,2132孙东亚,王晓鸣,何月秋(1.中国农业科学院作物科学研究所,国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程,北京100081;2.云南农业大学,农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,昆明650201)摘要我国玉米种子普遍受到拟轮生镰刀菌(Fusariumverticillioides)的侵染,该菌产生的伏马毒素对国家种质库中玉米种质的安全保存有着潜在的影响。fum1基因是F.verticilli
2、oides等镰刀菌中伏马毒素生物合成的必需基因。选用3对已知引物Fum5F/Fum5R、P1/P2和P3/P4分别对从玉米种子中分离出的9株镰刀菌和1株阴性对照菌链格孢菌进行PCR扩增检测,在F001和F003菌株中扩增出相应的特异性表达片段。测序表明,这些片段的长度分别为846bp、888bp和703bp,与已知fum1基因(AF155773)的同源性达99%以上。3对引物的检测灵敏度达到88pg/mL。结果表明,这3对引物都能够有效地检测产生伏马毒素的镰刀菌菌株,但引物Fum5F/Fum5R所扩增片段完全来自fum1基因内部,具有更强的特异性。在此定性
3、检测基础上,需要进一步研究定量检测方法并进一步研究伏马毒素对农作物种质保存的影响。关键词镰刀菌;伏马毒素;fum1基因;分子检测中图分类号S435.131MoleculardetectionofFusariumstrainsproducingfumonisinsinmaizeseeds1,212SunDongya,WangXiaoming,HeYueqiu(1.NationalKeyFacilityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement,InstituteofCropScience,CAAS,Beijing100
4、081,China;2.KeyLaboratoryforAgriculturalBiodiversityforPestManagementofChinaEducationMinistry,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China)AbstractInthisstudy,threepairsofpreviouslypublishedprimers,Fum5F/Fum5R,P1/P2andP3/P4,wereusedtodetectFBinnineFusariumstrains.InstrainF001a
5、ndF003,846bp,888bpand703bpfragmentswereampli2fiedbyFum5F/Fum5R,P1/P2andP3/P4,respectively,whichwerethensequenced.Thenucleotidesequencesofthethreesegmentsamplifiedfrombothstrainswerecomparedwiththefum1sequenceretrievedfromGenBank(acc.no.AF155773).Theresultsdemonstratedthattheyhadah
6、ighidentity(>99%).Thedetectionsensitivitywas88pg/Lwiththethreeprimers.TheresultsshowedthatallofthethreeprimerscouldbeusedtoeffectivelydetectFusariumstrainsproducingfumonisins.AndFum5F/Fum5Rwasthebestpairbecausetheproductamplifiedwascompletelyfromwithinthegenefum1.KeywordsFusarium;
7、fumonisins;fum1gene;moleculardetection玉米是世界上最主要的农作物之一。在玉米生菌F.moniliforme),其次为禾谷镰刀菌(F.gra2[3]长过程中,其果穗常常受到多种真菌的侵染,引起果minearum)等。被镰刀菌侵染后,玉米果穗不仅穗腐烂,而许多镰刀菌就是种子腐烂的重要致病本身受到伤害,在侵染严重时造成籽粒腐烂,失去食[122]菌。在我国,引起玉米穗腐病的最主要镰刀菌为用或种植价值,而且在侵染较轻时,作为生产使用的拟轮生镰刀菌(Fusariumverticillioides=串珠镰刀玉米种子也会因种子带菌而引
8、起苗枯病、顶腐病、茎收稿日期:2007202212修订日期:200
