禾谷镰刀菌area基因的功能研究

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1、分类号：S432.4+4学校代码：10712UDC：632研究生学号：2011060045密级：公开2015届攻读博士学位研究生学位（毕业）论文禾谷镰刀菌AREA基因的功能研究学科专业：植物病理学研究方向：植物免疫学研究生侯瑞指导教师：许金荣教授完成时间：2015年4月中国陕西杨凌Classificationcode:S432.4+4Universitycode:10712UDC:632Postgraduatenumber:2011060045Confidentialitylevel:PublicityDissertationforDoctorDegreeNort

2、hwestA＆FUniversityin2015FUNCTIONCHARACTERIZATIONOFAREAGENEINFUSARIUMGRAMINEARUMMajor:PlantPathologyResearchfield:PlantImmunityNameofPostgraduate:HouRuiAdviser:Prof.XuJin-RongDateofsubmission:2015.04YanglingShaanxiChina研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的博士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中

3、的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定〉〉，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间：年曰导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的博士研究生所呈交的博士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗

4、职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。导师签名:时间：妒彳年月/曰关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学.本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容4受权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保

5、证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人(包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名：时间：年6月

6、日导师签名月曰禾

7、谷镰刀菌AREA基因的功能研究摘要在酵母和丝状真菌中，氮代谢是受到GATA转录因子AreA/NIT2家族调控的。GATA转录因子的特征是含有一个或两个Cys2/Cys2锌指结构，能够识别目标基因启动子序列中的DNA序列5’-HGATAR-3’（其中H代表A，T，C和R代表A或G）。多数参与氮代谢的结构基因能够被GATA转录因子识别并激活来吸收和利用次级氮源。本研究鉴定了禾谷镰刀菌中GATA转录因子AreA的功能。禾谷镰刀菌的AREA基因缺失突变体ΔareA的生长速率减缓且产孢率降低，但分生孢子和菌落边缘形态正常，说明AREA能够影响发育，但对形态并没有影响。有性阶

8、段ΔareA敲除突变体子囊壳数量和大小都减少，且不能形成子囊孢子，这说明AreA在调节有性生殖过程中发挥着重要的作用。ΔareA突变体对氧化还原增加了敏感性。通过扬花盛期的小麦穗、玉米秆和玉米须侵染实验证明，ΔareA突变体的致病性严重降低。通过随机插入带有AreA自身启动子的AreA-GFP融合片段到ΔareA突变体中，获得AREA基因互补转化子。互补转化子生长速率、产孢率、子囊壳和子囊孢子形成、DON合成量和致病性等方面都恢复到野生型状态。亚细胞定位实验表明，AreA-GFP信号无论在孢子还是菌丝中都定位在细胞核。我们通过分别缺失AreA蛋白3个潜在的核定位序

9、列，发现N