蜂胶的提取方法及影响因素

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1、万方数据16蜜蜂杂志(月刊)JOURNAL0FBEE(Monthly)No．7July2002状，加入一定比例的乙醇，冷浸或回流浸提。目前，所用的乙醇浓度最好是60％～70％，冷浸法就是在常温或较低温度下将蜂胶粉末浸入乙醇，并不定时地进行搅拌，一段时间后进行过滤取上清液，并用乙醇冲洗滤渣，冲洗液一起加入到过滤液中，再进行稀释或浓缩后用棕色瓶来贮存。此方法较简单，并且温度不高，某些易挥发和失活的有效黄酮类不易失去，但是提取率受时间限制，一般在两周内随时间的延长而升高，而且乙醇浓度以60％为最好【2J。回流侵提法就是用回流装置对其进行加热，其他操作与冷浸法相类似，乙醇以70％为

2、最好，这种方法所需时问较短，且提取率随温度的升高而升高(90℃为最佳)r3j，但温度升高时很容易使某些黄酮类失去活性。1．2水提取(AEP)该方法与乙醇提取法基本相同，只是溶剂变为水，也可用冷浸回流提取，提取率同样也受浸提时间和温度的影响⋯。1．3二氯甲烷法(Dl强)蜂胶经冷藏、碾碎后加入到一定量的二氯甲烷中，充分搅拌，加热，回流，放置数小时后进行过滤，再让溶剂挥发后，用乙醇热回流提取，过滤，去蜡，即可得到蜂胶的抽提物HJ。1．4氯仿法该方法与二氯甲烷法相似，只是溶剂换成氯仿。1．5乙酸乙酯法将蜂胶用乙酸乙酯溶解成浸膏状，静置数小时后，用质量分数为5％的NanC03溶液提取

3、，得到蜂胶乙酸乙酯提取物(I)和蜂胶酸性物质，再将蜂胶酸性物质用盐酸酸化，先乙醚提取(Ⅱ)，再用乙酸乙酯提取(IU)，最后用正丁醇提取，可得到正丁醇提取物(Ⅳ)。其中乙酸乙酯提取物中，蜂胶有效物浸膏中的质量分数可达57．8％，正丁醇提取物中总黄酮的质量分数可达22．5％[4]。1．6其他方法除了以上方法外，还有甲醇、丙酮为溶剂进行提取，也有超临界提取法、硼高分子电解质法等。2影响蜂胶提取的因素2．1温度温度高提取效果好，但过高的温度会导致蜂胶中活性成分被破坏，且杂质的溶出量增加。2．2pH值对蜂胶中的黄酮类化合物而言，随着pH值的升高，提取率逐渐上升，当pH值为9．5时，提

4、取率最高，pH继续增大，提取率又缓慢降低【3J。2，3提取次数提取次数达到4次时，一般活性成分的浸出就已比较稳定，所以提取次数一般不超过4次瞄J。2．4溶剂2．4．1溶剂的种类通过对甲醇、乙醇、丙酮三种溶剂对黄酮类化合物浸提效果的研究表明，70％的丙酮效果最好，甲醇最差。但由于丙酮价格较贵，而且含有有毒成分，所以不适合于生产上应用bJ。2．4．2溶剂的浓度陈崇羔等(1996)通过对不同浓度的乙醇对蜂胶有效成分提取率的影响的研究中发现，蜂胶提取率随乙醇浓度的提高而提高，当乙醇的质量分数≥70％时，提取率随乙醇浓度的提高而升高，差异不显著；当质量分数≤70％时，提取率随乙醇浓度

5、的下降而下降，差异极显著-6j。考虑到蜂胶中所含的氨基酸、维生素以及某些以水溶性盐形式存在的微量元素等水溶性物质的溶出率，采用质量分数较低的70％乙醇水溶液，可能会比质量分数较高的收稿日期：2002—05—10万方数据2002年第7期蜜蜂杂志(月刊)JOURNALOFBEE(Monthly)1795％乙醇水溶液好。2．5提取时间2．5．1浸泡时间在24h以内，浸泡时间越长，蜂胶中黄酮类化合物的浸提率越高。2．5．2提取时间在其他条件相同的情况下，浸提时间的长短对浸提效果影响不大。3各种提取方法的优缺点目前采用最多的提取法是用乙醇提取，但提取物在抗菌性上有很大损失，而用二氯甲

6、烷、氯仿、乙酸乙酯提取能较好的保存有效抗菌成分，并且王南舟等研究发现，不同提取物的抑菌效果为：二氯甲烷提取物(DEP)>氯仿提取物>乙醇提取物>乙醇，但是DEP是酯溶性物质，因此在含水量高的食品中添加使用时，须先经乙醇溶解，或经蔗糖、脂肪酸乳化后添加17J。水提法的提取率明显比乙醇提取率要低，但是已证实水提法也具有较好抗菌性和抗真菌作用¨J。在乙酸乙酯法的4种提取物中，组分I占浸膏的质量分数为57．8％，组分11次之，组分ⅡI质量分数较低，但总黄酮的质量分数组分IⅡ、Ⅳ最高。组分I主要是蜂胶中的芳香挥发油、萜类化合物和部分黄酮甙元，4种提取物中只有组分I香气与蜂胶相近，具有

7、止咳、平喘、镇痛等作用。组分Ⅱ、III、Ⅳ是蜂胶酸化后的提取物，主要是蜂胶中黄酮类化合物和酸类化合物。组分Ⅱ中总黄酮质量分数相对较低，但含有香豆素和部分酸性物质如苯甲酸、对羟基苯甲酸等，具有抗菌、消炎、防腐作用。组分ⅡI、Ⅳ是蜂胶中相对极性较大的提取物，其中总黄酮的质量分数较高，主要是黄酮甙类，目前蜂胶中已发现的黄酮类化合物有20多种，包括芦丁等，具有防高血压、降血脂等作用[8]8。参考文献：[1]VassyaS，BankovaV．Propolis：Recentadv∞cesinchem．istryandplant