蜂胶对鸡副嗜血杆菌的抑菌效果试验

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1、万方数据2009年第2期(总第145期)试验研究蜂胶对鸡副嗜血杆菌的抑菌效果试验李峰王艳苗立中沈志强‘(山东省滨州畜牧兽医研究院256600)摘要蜂胶是一种具有广谱生物学活性的天然物质,具有抗茵、抗病毒、抗肿瘤、消炎、增强机体免疫功能和促进组织再生等作用,本文就其对鸡副嗜血杆菌的抑菌作用进行了试验。结果表明,终浓度为lm∥ml一5mg/ml的蜂胶乙醇浸出物对试验菌株具有完全抑制作用,终浓度为0.5mg/ml和0.1m∥ml的蜂胶乙醇浸出物对试验菌株具有部分抑制作用,终浓度为0.Olmg/ml的蜂胶乙醇浸出物对试验菌株没有抑制作用。关键词蜂胶鸡副嗜血杆菌抑菌中图分类号:$8

2、52.61+2文献标识码:A文章编号:1007.1733(2009)02-0003-02蜂胶是工蜂从植物幼芽上采集的树脂并混入蜜蜂上鄂腺分泌物和蜂蜡等成分的混合物llJ。其成分多达100余种12l,并具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、消炎、增强机体免疫功能和促进组织再生等作用,是一种具有广谱生物学活性的天然物质。本文就蜂胶对鸡副嗜血杆菌的抑制作用进行了试验观察。l材料与方法1.1材料1.1.1天然蜂胶购自山东聊城峰业研究所。1.1.2试验菌株Hpg—l(A型)、CCM6075(B型)、Hpg一668(C型),购自中国兽医药品监察所;SD.1、SD.2,山东省滨州预防兽医学与动物生

3、物技术重点实验室分离鉴定。‘1.1.3副嗜血杆菌培养基购自海博生物技术有限公司。1.2方法1.2.1蜂胶乙醇浸出物的制备按沈志强方法[31进行。1.2.2培养基的制备副嗜血杆菌培养基的制备加入95ml已高压灭菌副嗜血杆菌培养基中,混匀,倾注平板。1.2.3抑菌试验采用双蝶法进行。将纯培养后的鸡副嗜血杆菌菌各0.1ml(菌液浓度约为30fL/na),分别接种于含0.01mg/ml~5.Omg/ml(终浓度)不同浓度的蜂胶乙醇浸出物的副嗜血杆菌培养基:同时接种含乙醇培养基(乙醇对照)和副嗜血杆菌培养基(对照)。接种后,置于37℃5%C02培养箱内培养48h,观察记录结果。1.

4、2.4结果判定标准根据对照组细菌生长情况对试验组进行判定。将无任何细菌生长的情况判断为完全抑制(++++),将有菌落长出,但对比对照组明娃稀少的情况,判断为抑制(+,++,+++);将细菌生长良好的情况判断为完全不抑制(.)。2结果不同浓度蜂胶乙醇浸出物对不同鸡副嗜血杆菌抑制试验的结果如下表所示,含蜂胶乙醇浸出物lmg/ml~5mg/ml的培养基上无任何细菌长出,含蜂胶乙醇浸出物0.1mg/ml与0.5mg/ml的培养基上有按常规方法进行。将制各好的已知浓度的蜂胶液各菌落长出,但无论密度还是沦落形态较正常对照培5ml,加入95ml已高压灭菌的副嗜血杆菌培养基养基上还是略有

5、差异,含乙醇培养基上菌落生长状中,混匀,倾注平板。另取5ml乙醇(95%)5mi,况与正常培养基上菌落生长无任何差饕蜂胶对副嗜血杆菌的抑制试验结果3小结与讨论(1)试验结果表明,终浓度为Img/ml一5mg/ml的蜂胶乙醇浸出物对鸡副嗜血杆菌具有完全抑制作用;终浓度为0.5mg/ml和0.1rnlg/ml的蜂胶乙醇浸出物对试验菌株具有部分抑制作用;而终浓度为0.01mg/ml的蜂胶乙醇浸出物则不能有效抑制试验菌株的增殖。含乙醇培养基菌落生长情况与正常培}诵讯作者养基菌落生长情况一致,则充分说明蜂胶乙醇浸出物所呈现的抑菌作用为蜂胶作用的结果。(2)鸡副嗜血杆菌按照page法

6、共分为A、B、C三个血清型41,试验中所用菌株Hpg.1为A型、CCM6075为B型、Hpg一668为C型,并且还有山东省滨州预防兽医学与动物生物技术重点实验室分离鉴定的2个野毒株,基本能够反映鸡副嗜血杆3万方数据山东畜牧兽医2009年第30卷菌的病原特征。(3)蜂胶对多种细菌具有较强的抑菌作用pJ,其呈现的抑菌作用被认为与其复杂的成分密切相关。蜂胶含有许多有生物活性的物质,如酸、醇、酚、醛、醚类以及烯、烃、甾类化合物和多种氨基酸、脂肪酸、酶、多种维生素和微量元素等,一般认为是由于树脂中类黄酮和芳香酸及其脂类存在的缘故。研究表明,蜂胶中含有的高良姜精、松针素和乔松酮等类黄

7、酮及阿魏酸和咖啡酸是抗菌的有效成分。(4)蜂胶除具有抗菌作用外,其抗病毒、抗肿瘤等作用也被广泛应用。尤其是上世纪80年代,沈志强研究员等以蜂胶为佐剂研制开发了禽霍乱蜂胶灭活疫苗,开辟了疫苗研究的新的领域。该疫苗具有产生免疫力时间快、保护率高、免疫期长等特剧6

8、,再次证明了蜂胶具有免疫增强作用。因此,一方面可以积极开发以蜂胶为佐剂的新型生物制品;另一方面,可以充分利用蜂胶所呈现的某些抗生素的潜在性作用,进行化药制剂产品的研制开发。..参考文献【l】房柱.蜂胶【M】.北京:农业出版社,1984.7.【2】黄文诚.蜂胶的化学成分和生

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