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时间:2018-09-15
《茯苓菌液体培养条件的优化及其多糖的提取》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、第!"卷第#期工业微生物51.6!"716##$$"年"月%&’()*+,-./,0+12,1.1348(&6#$$"!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!茯苓菌液体培养条件的优化及其多糖的提取薛正莲,欧阳明,王岚岚(安徽工程科技学院生化工程系,安徽芜湖#<;$$$)摘要研究了茯苓菌株H#6;$的液体培养条件,并对其中的多糖进行了提取和分析。结果表明,最佳培养条件为初始IJG6G、摇床转速;G$+#A,&、培养温度#"K、
2、装液量F$AL##G$AL三角瓶、培养时间G’;最适碳、氮源分别为G3碱溶性多糖。%N分析结果表明这两种多糖的主要成分为$@O@葡聚糖。关键词:茯苓;液体培养;优化;生物量;多糖茯苓属担子菌亚门,多孔菌科,卧孔菌属,是珍(#)液体培养基(M):葡萄糖!3,蛋白胨;3,贵的药食两用菌,具有益脾、促胃、祛湿、安神、生津SJ#TU<$6;3,/3QU<$6$G3,V
3、-V.#FA3,/&QU<"[;]等功能。近年来研究显示茯苓中的多糖或异多糖A3,5P;$6$!A3,柠檬酸铁铵$6GA3,蒸汽灭菌#$具有促进细胞分裂、抗诱变、抗肿瘤、增强免疫等活A,&(5P;另行灭菌)。[#]性而倍受关注,其开发价值及应用前景巨大。目!"#实验方法前茯苓菌为野生或人工种植,周期长,受产地限制,!"#"!活化与培养难以获得标准一致茯苓菌以满足工业化。而液体发!"#"!"!斜面培养酵具有易于操作、易于工业生产、易于提高产率的优活化培养基接种两环原菌种于#"K培养一周点,已逐渐成为真菌生物活性
4、物质开发的方向,国内后,放冰箱内保存待用。[!、<]的研究尚处于刚起步阶段。本文对激光诱变所!"#"!"#摇瓶发酵获得的速生高产突变株H#6;$的培养条件及培养接种$6G0A#方块!块茯苓菌丝于一定体积的基中碳、氮源的种类和浓度进行了优化,探求批量获液体培养基中(#G$AL三角烧瓶),在一定温度和一得茯苓菌的方法,并对其中的多糖进行了提取和分定转速下摇瓶培养。析。!"#"#培养条件的优化!材料与方法摇瓶转速对茯苓菌生物量的影响:将盛有;$$AL液体培养基的#G$AL三角瓶分别置于不同转!"!材料速下#"K进行
5、摇瓶培养G’。!"!"!菌株摇瓶装液量、起始IJ值、培养温度、培养时间茯苓H#6;$(!"#$%&"&"’@H#6;$)为本实验室经对茯苓菌生物量的影响:采用L(<<)正交试验进行激光诱变所获得的速生高产突变株。;"!"!"#主要仪器优化。PQ@%?R振荡培养箱。!"#"$碳、氮源的优化!"!"$培养基配制摇瓶培养基时,加入不同碳源及氮源,观察(;)活化培养基:土豆#$M,蛋白胨#M,葡萄茯苓菌生长情况,选取最佳碳、氮源,并进行碳、氮源糖#M,琼脂#M,IJ自然。浓度优化。安徽省教育厅青年基金项目(#$$#9
6、:;;<)作者简介:薛正莲(;=">!),女,副教授,主要从事发酵工程方面的研究。?@A-,.:B(CDEC&$FG;"),&-601A—<<—第@期薛正莲,等:茯苓菌液体培养条件的优化及其多糖的提取第#-卷!"#"$生物量的测定#"#摇瓶装液量、起始()、培养温度、培养时间对培养液用!"目铜筛过滤,收集菌丝体用蒸馏水茯苓菌生物量的影响洗涤#次,$"""%!&’(离心)"&’(,得菌丝体于$*+采用2($$)正交设计考察这些因素对茯苓菌)-真空干燥得菌丝干重。生物量的影响,实验安排及结果如表)。!"#"%茯苓
7、多糖的提取表)正交实验结果与极差分析菌丝体的预处理:#",菌丝体分别用乙酸乙试验号76时间(D)摇瓶装量(&2)温度(+)菌丝干重(,!)""&2)酯、丙酮进行索氏提取-.,去脂肪,凉干备用。))(*/"))($))(-"))(@$)"/E*)水提法:处理后的茯苓粉末加*倍量的水,沸水@)@(*)@(!")@(@-))/#!E#)#(-)#()"")#(@!)"/EF!提取)/*.,离心得上清液。沉淀继续水提一次,离$)$(F)$()@")$(#")"/F#@心,合并两次上清液减压浓缩至)!*,加入#倍无水*
8、@(*/*))@$"/EE#-@@)#)/$!)乙醇,于$+冰箱内静置过夜,沉淀物于半透膜透析F@#$@)/@#$过夜,真空干燥得水溶性粗多糖。!@$#))/#**E#(-/"))#@)/)*#碱提法:上述滤渣用*倍量"/*&01!2的3456)"#@$)"/!E*浸提过夜,离心得上清液,沉淀继续用"/*&01!2))##)$)/)@*)@#$@#)/@))3456浸提过夜,合并两次上清液,用乙酸调
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