表皮生长因子对传代培养的大鼠生长板软骨细胞增殖与胶原合成的影响

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1、万方数据·592·【文章编号]1000—4718(2006)03—0592—05表皮生长因子对传代培养的大鼠生长板软骨细胞增殖与胶原合成的影响*季煜华，曾耀英△，俞瑜(暨南大学组织移植与免疫研究中心教育部重点实验室，广东广州510632)[摘要]目的：探讨不同浓度的表皮生长因子(EGF)对传代培养的大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)增殖和胶原合成的影响。方法：分离、培养RGC，分别用Westernblot和阿尔新蓝(Alcineblue)染色检测各代RGC中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达；用[3H]一TdR和[3H]一praline掺入分别检测1、10和100／-g／LE

2、GF对第1、3和5代RGC增殖和胶原合成的影响。结果：原代培养的RGC表达Ⅱ型胶原和蛋白多糖，从第4代起Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达迅速降低，RGC发生了去分化。[3H]一TdR掺入表明，EGF促进第1代RGC的增殖(P<0．01)，3个浓度的作用依次为：1tc／L>10t,g／L>100tc／L，差异显著(Po．05)。与促增殖作用不同，不同浓度EGF促不同传代的RGC的[3H]一proline掺入率比对照组均高20％左右(P

3、GF具有促进培养RGC增殖和胶原合成的作用，连续传代引起的去分化降低了RGC对EGF促增殖作用的反应，但对EGF的促胶原合成作用没有产生影响。【关键词]软骨细胞；生长面；表皮生长因子；胶原[中图分类号]R392．11[文献标识码]AEffectsofEGFonproliferationandcollagensynthesisofserialpassagedratgrowthplatechondrocytesJlYu—hua，ZENGYao—ying，YUYu(KeyLaboratoryofMinistryofEducationforTissueTransplan

4、tation&l懒logy，JinanUniversity，Guangzhou510632，China)[ABSTRACt]AIM-,ToevaluatetheeffectsofEGFonproliferationandcoUagensynthesisofserialpassagedrateostochon—dralgrowthplateehondrocytes(RGCs)．METHOI)s：RGCswereisolatedandcultured．coHagentypeIIandproteoglycanexpres-sioninseri—alpassagedRG

5、CsweredetectedbyWestemblottingandAleinebluestaining．Theeffectsof1一L，10∥L，100t,g／LEGFonpassage1，3and5RGCproliferationandcollagensynthesisweremeasuredby[3H]一TdRand[3Hj～prohneineorpo—ration．RESULTS：蹦maryculturedRGCsexpressedtypeⅡcollagenandproteoglycan．Sincepassage4，theexpressionoftype1

6、IcollagenandproteoglycandecreasedabruptlyandRGCdedifferentiationwasobserved．[3H]一TdRincorporationdemonstratedthatallthethreeconcentrationsofEGFenhancedp妒sage1RGCproliferation(P10t,-g／L>100彬L．EGFkeptitsproliferativestimulationonpassage3R

7、GEs(P<0．01)，buttherewasnodifferenceamongthethreetreatedgroups(P>0．05)，EGFlostitsproliferativeeffectsOilthepassage5RGCs(P>0．05)．UnliketheproliferativeeffectsofEGF，thereWasnOdifferenceamongtestinggroupsinpassage1，3and5RGCsincollagensynthesisenhancement(P>0．05)．[3H]一prolJneincorporation

8、intestinggro