渗透压负荷对兔椎间盘器官培养模型的影响

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1、万方数据中国脊柱脊髓杂志2009年第19卷第】O期ChineseJournalof却ineand印inalcD以，2009，V01．19，No．10729渗透压负荷对兔椎间盘器官培养模型的影响牛朋彦，熊伟，李锋，周松，陈文坚，霍喜卫(华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科430030武汉市)【摘要】目的：建立一种可用于体外研究椎间盘退变的椎间盘器官培养模型，探讨渗透压负荷对模型椎间盘细胞活力和代谢的影响。方法：4～6月龄新西兰大白兔10只，均分为两组，处死后立即手术切取胸腰段椎间盘，每只9个。分别在等渗(300mOsm／kg，等渗组)或高渗(410mOsm／kg，高渗组)培养基中进行

2、整体器官培养，在培养前和培养后第7、14、2l、28天，利用MitotrackerGreen荧光探针、组织化学和生物化学方法评估两组椎间盘髓核细胞的活力、结构的完整性以及蛋白多糖含量的变化。结果：取材后培养前椎间盘髓核细胞的荧光强度为11503±402，在体外培养过程中，高渗组第14天荧光强度为9202±907．与培养前比较差异有显著性意义(P<0．05)，第7、21和28天分别为10504±710、10860±71l、10713±953，与培养前相比较无显著性差异(P>0．05)：等渗组第7、14、21、28天分别为11350±351、11207±385、10914±300、108

3、62±229，与培养前比较无显著性差异(P>0．05)：两组在第7、21和28天时无显著性意义(P>0．05)。在培养过程中，两组椎间盘髓核和纤维环的组织结构能够基本保持完整．髓核蛋白多糖含量在培养第7天高渗组和等渗组分别为3．33±0．28mg／100mg和2．83±0．25mg／lOOmg，均较培养前(5．03±0．37mg／100mg)明显降低(PO．05)．两组相同时间点的差异无显著性意义(P>0．05)。结论：椎间盘器官培养模型可以在等渗或高渗环境中有效维持兔椎间盘结构的完整性和髓核细胞的活力至少4周。【关键词

4、】椎间盘退变；器官培养模型；渗透压；细胞活力；蛋白多糖；兔doi：10．3969／j．issn．1004--406X．2009．10．05中图分类号：Q813．1，R681．5文献标识码：A文章编号：1004枷6X(2009)一10埘29—06Influenceofosmoticloadingonorganculturemodelforrabbitintervertebraldisc／NIUPengyan。XIONGWei，LIFeng，etal／IChineseJournalofSpineandSpinalCord，2009，19(10)：729-734【Abstract】Obje

5、cfive：Todevelopanorganeuhuremodelofrabbitintervertebraldiscinvitroandinvestigateeffectsofosmoticloadingoncellviabilityandmetabolismofthediscs．Method：Thoracolumbarandlumbarin·tervertebraldiscswereharvestedimmediatelyaftersacrificefrom10NewZealandwhiterabbits(4-6monthsold，n=9／animal)，whichwerediv

6、idedintotwogroups．，111eintervertebraldiscsweremaintainedinorganculturewithiso-osmotic(300mOsm／kg，iso-osmoticgroup)orhyperosmotic(410mOsm／kg，hyperosmoticgroup)media．Cellviability，structuralintegrityandpmteoglycancontentwereassessedusingMitotrackerGreenprobe，histo-chemicalandbiochemicalmethodsbef

7、orecultureandOff7，14，21，28daysafterculmule．Result：Thefluores．cenceintensityoffreshintervertebraldiscWasthemaximum(11503±402)beforetheculture．Duringorgancul．tureinvitro，therewasasignicantdecreaseinfluorescenceinthehyperosmoficgroup