落葵多糖的提取分离与药理学研究

《落葵多糖的提取分离与药理学研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、华中农业大学硕士学位论文落葵多糖的提取分离与药理学研究姓名：彭会军申请学位级别：硕士专业：细胞生物学指导教师：柳俊;邹群20080601摘要植物多糖(polysaecharide)是近年来活性物质研究的活跃领域之一。本研究以落葵(BasellarubraL．)为实验材料，采用热水浸提法和超声波提取法进行落葵多糖(PBI也)提取，在此基础上对落葵多糖的抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳等功能进行了初步研究，主要结果如下：1．落葵多糖的提取效率：实验研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响。结果表明提取时间和提

2、取温度为影响落葵多糖提取的主要因素。在本实验设计的条件下，其最佳提取工艺为：料液比1：50，提取时间5h，提取温度85℃，多糖提取率最大为4．01％。超声波提取结果显示，在温度70℃，超声功率160w，时间120min时可达最大，其提取率为17．02％，是热水浸提法的4．25倍，这表明超声提取法是一种更为有效的落葵粗多糖提取方法。2．落葵多糖的分离纯化：采用DEAE．Sepharose．FF离子交换层析纯化落葵粗多糖，共得到六个组分。最佳分离条件为：上样浓度12mg／ml，洗脱速度1．6ml／mi

3、n，pH7．6"Iris—HCl缓冲液制备样品，使用O～O．6mol／LNaCl浓度梯度洗脱和再生。六个组分经苯酚．硫酸法检测糖和紫外检测法检测蛋白质，在波长280nm处检测到蛋白信号，与糖信号部分重合，由此推测，落葵中提取的活性物质为可能为糖蛋白或蛋白多糖。3．落葵多糖的抗氧化活性：实验分别采用AP—TEMED体系、邻二氮菲(1，10．phenanthroline)．Fe2+比色法测定了多糖对02-·自由基、羟基自由基的清除作用。同时，．通过红细胞溶血实验测定了多糖对H202损伤保护效应。结果显

4、示，在本实验设计条件下，落葵多糖对02-·和·OH的最大清除率分别达到54．32％和52．94％。对H202诱导红细胞氧化溶血的最大抑制率达到55．76％。4．落葵多糖的免疫活性、抗肿瘤及抗疲劳效应：实验采用碳粒廓清实验检测PBRL免疫吞噬功效，采用免疫器官称重法测定对正常小鼠免疫器官的影响，采用Si80动物肿瘤模型检测PBRL抑制肿瘤的功效，采用小鼠游泳实验测PBRL的抗疲劳功效。结果表明：落葵多糖高剂量组对小鼠胸腺指数和脾指数影响大，低剂量组则作用较小：落葵多糖中高剂量组都显示出很好的抑瘤作用

5、；PBEL各剂量组对小鼠的抗疲劳能力有显著的提高作用。关键词：落葵；多糖；提取；分离；抗肿瘤；自由基：免疫；抗氧化AbstractPlantpolysaccharideisanactiveareaasfunctionalsubstances．TheextractiontechnologiesofpolysaccharideofBasellarubra．Lweredevelopedbyusinghotwater，andtheultrasonicsonicmethod，whichprovidewith

6、abasefortheresearchonthefunctionofextrctedpolysaccharideinanti．．tumor,anti．．oxidationandanti．．weary．乃emainresultsobtainedarebellowing：1．Extractionrate：Influenceofthefactorssuchassolid．1iquidratio．theextractiontemperatureandtheextractiondurationontheyi

7、eldofthepolysaccharidesWaSinvestigated．Experimentalresultsindicatedthattheextractiontimeandtheextractiontemperaturewouldsignificantlyaffecttheextractionrate．Unterthepresentconditions，inhotwaterextraction．theoptimumsolid．1iquidratiowas1：55，theextractio

8、ntime6hwimtemperatureat75℃．andtheextractionrateof4．01％WaSobtained．Inultrasonicsonicextraction,theextractionrateofl7．02％wasreachedbyusingthewavecapacityofl60w,at70℃for120min．whichis4．25timeshigherthethatofthehotwatermethod．indicatingtheultrason