医学课件免疫学临床应用

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时间:2018-09-13

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1、免疫学应用<病原生物学与免疫学基础》免疫学诊断1、抗原或抗体的检测免疫学检测抗原抗体反应的原理抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合部位之间的结构互补性。两者相互结合,在适宜条件下,出现可见反应。抗原抗体反应的特点1、特异性2、比例适合3、可逆性应用1、利用已知抗原检测未知抗体(1)检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病:伤寒病、流行性乙型脑炎、AIDS病等。(2)检测自身抗体——诊断自身免疫病:SLE、类风湿性关节炎等2、利用已知抗体检测未知抗原(1)鉴定病原菌:诊断疾病(2)检测肿瘤相关抗原:检测甲胎蛋白以诊断肝癌(3)检测血型抗原、HLA

2、抗原:鉴定血型,亲子鉴定(4)检测药物半抗原:确认运动员是否服用兴奋剂抗原或抗体的检测方法凝集反应沉淀反应补体参与的抗原抗体反应免疫标记技术凝集反应(agglutination)颗粒性抗原(红细胞、细菌、乳胶颗粒等)与相应抗体在一定条件下形成肉眼可见的凝集物。1、直接凝集玻片凝集、试管凝集(肥大反应)2、间接凝集正向间接凝集反应(抗原致敏载体,检测未知抗体)反向间接凝集反应(抗体致敏载体,检测未知抗原)3、抗球蛋白试验(Coombs试验)抗原与单价抗体(不完全抗体)结合不出现凝集块,再加入抗球蛋白后即形成凝集块。用于检测抗Rh抗体以诊断新

3、生儿溶血性贫血。1、单向免疫扩散(singleimmunodiffusion):常用于测定IgG、IgM、IgA、C3、C4等。沉淀反应双向琼脂扩散试验应用:检测未知抗原或者抗体抗原性质分析抗体效价测定抗原抗体纯度坚定免疫标记技术用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应借以提高免疫学诊断的敏感性荧光素:异硫氰酸荧光素、罗丹明放射性同位素:125I、131I酶:辣根过氧化物酶、硷性磷酸酶免疫荧光检测法(IFA)放射免疫检测法(RIA)酶免疫检测法(EIA)免疫标记技术液相(ELISA)、固相(免疫组化技术)流式细胞仪临床应用T、B细胞及其亚群

4、的鉴定血清中自身抗体的检测组织中Ig及补体组分的检测肿瘤抗原的检定细菌和病毒的快速检定特异的组织固定抗体检测淋巴细胞的测定(一)淋巴细胞的分离:外周血葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法白膜层单核细胞淋巴细胞BT吸附分离过尼龙毛柱分离细胞免疫功能的检测淋巴细胞的分离1500rpm,20度,30min◆淋巴细胞转化试验◆T细胞介导的细胞毒试验原理◆T细胞功能的体内检测法T细胞功能测定(1)T细胞增殖试验(淋转)丝裂原、抗CD3单克隆抗体等能非特异地激活T细胞,使之发生转化增殖,计算淋巴母细胞转化率(正常值65~80%)。①形态学观察法②3H-Td

5、R渗入法:用液体闪烁仪测定样品的β射线放射活性③MTT法(2)细胞因子检测:鉴定分离的淋巴细胞亚群,监测某些疾病状态的细胞免疫功能。IL-2、IL-2R、rIFN、TNF等检测①ELISA法②生物活性测定法③聚合酶链反应(PCR)法(2)抗体形成细胞测定——溶血空斑试验(hemolyticformingcellassay,HFC)计算HFU/mlB细胞功能测定(1)B细胞增殖试验:LPS、SPA刺激,检查抗体形成细胞的数目免疫预防问题:1.你知道注射“乙肝疫苗、卡介苗、白白破三联疫苗”的目的是什么?机制?属于何种免疫?2.你知道注射“丙球

6、、胎盘球蛋白、抗毒素、IL-2、IFN”的目的是什么?机制?属于何种免疫?3.注射疫苗和注射丙球等制剂获得免疫力的方式各有什么特点?4.请你举一个实例说明何时使用疫苗、何时使用丙球等制剂?理由及注意事项。1.掌握人工主动免疫(概念、特点、主要生物制剂的种类及应用意义,活疫苗及死疫苗的优、缺点);人工被动免疫(概念、特点、主要生物制剂的种类及应用意义),及二者的区别。2.了解免疫增强药物及免疫增强疗法;免疫抑制剂及免疫抑制疗法;生物应答调节剂(概念、种类及生物学功能)。教学目标EdwardJennerLouisPasteurJenner和P

7、asteur,著名的免疫学家,公认为免疫接种和主动免疫的先驱。脊髓灰质炎Polio狂犬病Rabies风疹RubellaHepatitisAHepatitisB流感Influenza白喉diphtheria天花Smallpoxvirus轮状病毒RotavirusPertussis百日咳免疫预防是控制和消灭传染病的重要手段自然免疫:自然主动免疫、自然被动免疫。人工免疫人工主动免疫、人工被动免疫给机体输入抗原物质,使免疫系统因抗原的刺激,产生类似感染时所发生的免疫过程,从而产生特异性免疫力。人工主动免疫1.灭活疫苗2.减毒活疫苗3.类毒素4.亚

8、单位疫苗5.结合疫苗6.合成肽疫苗7.基因工程疫苗人工主动免疫制剂种类死疫苗活疫苗制剂性状灭活的病原体毒力减弱(无毒)的活病原体接种次数及量2-3次,用量大(间隔7-10天)1次,用量小稳定性

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