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时间:2018-09-13
《基因转染脂肪间充质干细胞作为软骨组织工程种子细胞的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、万方数据基因转染脂肪间充质干细胞作为软骨组织工程种子细胞的研究鞠晓东于长隆王卫国敖英芳王健全余家阔崔国庆胡跃林【摘要】目的观察人转化生长因子(hTGF)B2基因转染诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞的定向分化能力,探讨脂肪间充质干细胞作为种子细胞和在基因增强的软骨组织工程中应用的可行性。方法取3周龄k埘s大鼠的脂肪组织,消化法获得脂肪问充质干细胞,pcDNA3.1(+)/hTGF胆通过脂质体介导转染脂肪间充质干细胞,用免疫化学染色、逆转录一聚合酶链反应(RT-PcR)和westeInblot检测筛选的阳性克隆细胞中hTGFB2基因与软骨特异性蛋白-Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的情况
2、;然后将基因转染的脂肪问充质干细胞与PLGA支架体外构建细胞一载体复合物,再将其植入操鼠体内,12周后观察基因增强的组织工程软骨的形成情况。结果从成体大鼠脂肪组织中培养出脂肪问充质干细胞,能大量稳定增殖传代。hTGFB2基因在脂肪间充质干细胞内能瞬时及稳定表达,并促使Ⅱ型胶原和蛋白多糖合成;细胞.载体复合物在裸鼠体内经12周的培养,可以形成形态、结构接近正常软骨的组织工程软骨。结论pcDNA3.1(+)/hTGFB2成功转染脂肪问充质干细胞,诱导其向软骨细胞分化,脂肪间充质干细胞可作为基因增强的软骨组织工程较理想的种子细胞。【关键词】脂肪;干细胞;基因转染;软骨(k鹏tr
3、锄娥ctedamp0∞mes鲫ch)rIllalstem∞lls邵seedce№in傀nilagetiss眦en西n神ri唱-,U藏∞·dD略’,l,UChng勘ng,觥耽;存∞,e‘以.+风£i£me旷跏rts^如d记i船,Pe兢孔g‰ers蚵砚涮凰∞p如越.&沥w100083.China【Abst哺ct】ObjectiveToiIl、restigatethee舶ctofIlTcF瞄genetmIlsfection叽thedi雎rentiation0fadip鸺emesenchymalstemceusintochondmcytes,蛐dtodiscussthefe鹊ib
4、ilit丫0fadip嘴emesenchvmalstemcens∞seedingcellsofgene—enhancedcartilagetissueen舀neering.MethodsAdiposeme8enchymalstemceUswereobtainedf如min#minalf缸padsofLewisratswitIldigestion.AdiposemesenchymalstemceUswereinducedintochondrocytesbyhTGFI蛇genet砌sfection。andthenthediⅡbrentiationswemex-锄inedbyi
5、mmuncvtocheIllistry.RT.PcRandWestemblotting.CeU.ca圩iercompositeswerefo】皿edwiththet舢sfectedadip∞emeserIchyIIlalstemceILs衄dPU二Asca
6、王砌.andthenthecompositeswereimpl粕.tedimothesubcut锄eoustissueofnuilelllice.After12weeks。thetissue.en函neeringcartilaP霉wasex砌.inedbyhistochemistry.ResIllbApopulatio
7、nofadjp08emesellchyfnalstemceUsweresuccessfLdlyi80la-tedfjomratadipo鸵ti8sue,锄dcouldstablypr幽feratedandp鹊8agedin“扛D.Aftertrau耐毛cted试thpcD-NA3.1(+)/hTGF踞,tlledi&陀ntiationofadiPosemesellchymalstemcell8towaIdschondroc”e8w鸹ver.ifiedbythepositivere8ul协oftypeⅡcouagen锄dag窜陀c锄throughimmunoc”ochemi
8、stry,RT·PCR肌dWestemblotrespectively.Afterthectlltureinnudemicefor12weeks,H.E,alcianblue,toluidineblueaJldimmunochemistrystainshowedtllatceU.c删ercompositesdevelopedtoti8sueen每neeringcartilagewhichtobesimilartono肿aIcartilage.CbndusioⅡMesenchymalstemceUsobtainedf而mrata
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