人骨形态发生蛋白7基因转染对原代培养兔髓核细胞生物学活性的影响

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1、_77彳3分类号一●，论文编号密级彳鹰天博士学位论文人骨形态发生蛋白一7基因转染对原代培养兔髓核细胞生物学活性的影响E恤ctofHumanBoneMorphogenetieProtein一7Gene7IhInsfectiononBiolo再calActivityofP—mary(hIturedR曲bitNucleusPulposusCeHs抽V豇m．研究生姓名石健指导教师姓名侯铁胜主任、主任医师、教授、医学博士申请学位类别论文提交日期第二军医大学附属长海医院骨科上海市长海路174号2004332盟!量盐12006

2、年5月临床医学博士专业名称2006年4月论文答辩日期学位授予单位和日期第二军医大学2006年6月二00六年四月人骨形态发生蛋白．7基因转染对原代培养兔髓核细胞生物学活性的影响【摘要】目的研究整合在腺病毒载体上的人骨形态发生蛋白．7(1lBMP．7)基因转染对原代培养的兔髓核细胞生物学活性的影响，探讨其治疗椎间盘退变(ⅢD)的可行性，为进一步研究提供实验依据。方法将hBMP一7基因整合到腺病毒载体中，构建Ad-hBMP7。然后将其感染体外培养原代兔髓核细胞，采用RT-PCR、westem-blot和免疫细胞化学的方

3、法观察hBM口．7基因在细胞内的表达情况，采用MTT和流式细胞仪的方法观察其对细胞增殖能力的影响，此外还分别采用改进的二甲基亚甲兰比色法和EusA法观测llBMP。7基因转染对细胞合成蛋白多糖和II型胶原能力的影响。结果成功构建了hBMP．7基因的腺病毒载体，将其导入髓核细胞后可以高效表达hBⅫP．7，并持续3周以上，同时促进了髓核细胞增殖以及合成蛋白多糖和1I型胶原，较对照组有显著性差异(P

4、D的基因治疗体内试验研究。【关键词】骨形态发生蛋白；基因治疗；髓核细胞；椎间盘退变；细胞培养；基因表达：细胞增殖；细胞外基质E虢ctofhum锄bonemorphogeneticprotein-7genetransfectiononbiolo舀calactivityofprimarycul乜Jredrabbitnucleuspulposuscells加讲加．【Abs虹act】Objec蜢v髓：To咖dythee呦ofh咖柚bonem0咖gcnctic印)lein．7(hBm-7)gene岫s鲥jon0Ilbiol

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