不同年龄及退变腰椎间盘中蛋白多糖酶活性测定

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1、万方数据·788·不同年龄及退变腰椎间盘中蛋白多糖酶活性测定王志杰夏长所邹云雯【摘要】目的测定不同年龄以及退变腰椎间盘中的蛋白多糖酶活性，探讨蛋白多糖酶与年龄、退变之间的关系。方法对20个腰椎间盘的蛋白多糖酶活性进行测定，其中8个腰椎间盘来自胎儿，6个是退变的成人腰椎间盘，6个是正常的成人腰椎间盘。用含有10咖ol／Lcacl：的O．05moL／LTris／Hc对腰椎间盘中的蛋白多糖酶进行提取，用1咖彤LAPMA将其激活，与取自牛肩胛软骨的蛋白多糖单体底物进行反应，以酶标仪来测定蛋白多糖酶的活性。结果胎儿腰椎问盘、退变成人腰椎间盘以及正常成人腰椎间盘的蛋白多糖酶活性的

2、吸光度值分别是1．963±O．487、1．719±0．337、0．870±O．133。胎儿腰椎间盘与正常成人腰椎间盘的吸光度值差异有统计学意义(JP<0．01)，退变成人椎间盘的吸光度值也高于正常成人椎间盘(P

3、tract】ObjecⅡveTb略sBytheBctiviti∞0fp∞teoglycaIIas∞obtai玳dhmv缸iouslunlb盯imervenebmldi8csandexplorethe·陀l“ombetWeenproteodyc明硒eandages，de伊e陋tion．Me州s’T1leacti订ties0fproteoglyc∞as髓in20spcime啮were舯aly北d．Am叽gtheseltlnlbarintervertebraldi∞8，t11er；ewere8fetallumb盯intervertebraldi8cs．6no咖all啪b盯i

4、ntenrertebraldisc8锄d6hemiatedlmnb盯intervenebraldi8cs．Pmte嘲yc椰绷weree】【tracted埘tIlO．05mmoL／L％s／HClbu脓cont血ing10衄oL／Lcaq．nepmte叫yc锄ofb硎nescap山c矾il噼哪州ed埘tll4．0啪L／Lgu“dineHCl懈u8ed髓8ubstmte．Thep彤teoglycanbreakdownofthereactionindicatedtheacti、rit)roftlleproteoglyc蝴e8硒mvariollsluumb盯imerverteb

5、raldisc8．R船mtsActi“ti∞ofprateoglycanas鹄frlomfetaldiscs，hemi砌1哪barintervertebral出scsandno瑚aldi8cswere1．963±0．487．1．719±0．337明dO．870±O．133坤．8pectively．Activities0fproteoglyc肌s北sinfbtaldiscs肌dhenliteddisc8were孕∞土ertll明n唧a1di螂(P

6、pmce880fdegenem·tion0flunlbarinteIvertebraldiscs．对于腰椎间盘退变的机制及其相关变化，人们进行了大量的研究，包括生物力学、炎性因子等⋯，为了探讨人腰椎间盘中蛋白多糖酶活性与年龄、退变的关系，我们从不同年龄的人腰椎问盘以及正常与突出症患者的腰椎间盘中提取蛋白多糖酶并对蛋白多糖酶的活性进行测定。材料与方法1．材料：盐酸胍购自Si鲫a公司，苯甲磺酰氟购自SeⅣa公司，氯化铯购自Gibco公司，N，N，N’，N’-四甲基乙二胺购自SigIIla公司，丙烯酰胺和N，N’亚甲基双丙烯酰胺购自Pmmega公司，聚氧乙烯(23)月桂醚购

7、自Si舯a公司，阿利新蓝8Gx购自Si舯a公司，二甲亚作者单位：266003青岛大学医学院附属医院骨科·实验研究·砜购自si鲫a公司。胎儿腰椎间盘8个，胎龄20一32周，均为保胎失败流产病例；正常成人腰椎间盘8个，来自L4一L5或L5．S1椎问盘，平均年龄23岁(17—32岁)，均是因为外伤所致病例行脊柱手术治疗所得，患者均无腰腿痛或根性放射痛病史；退变成人腰椎间盘6个，来自L4．L5或L5一S1椎间盘，平均年龄45岁(38—62岁)，所有标本都是来自腰椎间盘突出症手术。2．组织中蛋白多糖酶的提取：按照woessner等【2】方法操作，按照每克椎间盘