10高检~20 功能成分测定(3)

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1、北京一轻高级技术学校教案任课教师：吴昊科目：食品检验技术编号：20授课章节名称第六章食品中功能性成分的测定6.3自由基清除剂SOD活性的测定审批签字授课班级10检高（1）（2）授课时数2授课时间第十三周（2）授课方法归纳法、复习法、讲授法教　具多媒体教学目的及　要　求1、了解SOD的定义、特点和分类。2、掌握SOD测定的方法和原理。教学重点、难点重点：SOD测定的测定方法难点：SOD测定的原理作业P1944教　学　过　程【复习提问】1、分别试述活性寡糖和活性多糖的生理功能。2、在功能性多糖的测定中如何进行检测成分的提取和精制？【引入新课】自由基清除剂在清除机体

2、自由基，保护机体免受氧化损害中起重要作用。因此，近年来对自由基清除剂的研究备受关注，超氧化物歧化酶(SOD)是目前研究得最深入,应用得最广泛的一种酶类自由基清除剂。本节课我们来共同研究SOD的测定。教学后记第8页共7页教案纸教学内容、组织、教法、要求说明【新课】第三节自由基清除剂SOD活性的测定一、自由基1、自由基的定义又叫游离基，是由单质或化合物的均裂而产生的带有未成对电子的原子或基团。2、特点（1）具有强烈的配对倾向，倾向于以各种方式与其他原子基团结合。（2）它是人体生命活动中各种生化反应的中间代谢产物，具有高度的化学活性。是机体有效的防御系统，若不能维持

3、一定水平则会影响机体的生命活动。但自由基产生过多而不能及时地清除，它就会攻击机体内的生命大分子物质及各种细胞器，造成机体在分子水平、细胞水平及组织器官水平的各种损伤，加速机体的衰老进程并诱发各种疾病。3、分类（1）氧自由基。大约占自由基总量的95％，包括超氧阴离子（O2-·）、羟自由基（OH·，是最活泼的自由基，也是毒性最大的自由基，它可和活细胞中的任何分子发生反应而造成损伤，而且反应速度极快，被破坏的分子包括糖类、氨基酸、磷脂、核苷和有机酸等）、过氧化氢分子（H2O2）、氢过氧基（HO2-·）、烷过氧基（ROO·）、烷氧基（RO·）、氮氧自由基（NO·）、过

4、氧亚硝酸盐（ONOO-）,氢过氧化物（ROOH）和单线态氧（1O2）等。（2）非氧自由基。主要是氢自由基（H·）和有机自由基（R·）等。4、自由基的产生人体细胞在正常代谢过程中或机体受到外界条件的刺激（如高能辐射、抗菌剂、杀虫剂、空气污染等作用），会刺激机体产生活性氧自由基。自由基反应包括引发、增长和终止阶段。本部分要求了解自由基的定义、自由基产生和对人体的生理功能的影响。第8页共7页教案纸教学内容、组织、教法、要求说明第8页共7页二、自由基清除剂（scavenger）1、定义指能清除自由基或能阻断自由基参与的氧化反应的物质。自由基清除剂大多为抗氧化剂，但也不

5、都是抗氧化剂，有些系统并未进行氧化作用。2、分类（1）酶类清除剂。包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）等。（2）非酶类清除剂。包括黄酮类、多糖类、维生素C、维生素E、β-胡萝卜（bo）素和还原型谷胱甘肽（GSH）等活性肽类。3、自由基清除剂发挥作用的条件：（1）要有一定的浓度。（2）必须在自由基附近，并且能以极快的速度抢先与自由基结合。因为自由基活泼性极强，一旦产生马上会与附近的生命大分子起作用。（3）在大多数情况下，清除剂与自由基反应后会变成新的自由基，这个新的自由基的毒性应小于原来自由基的毒性才有防御作用。4、超

6、氧化物歧化酶(SOD)（1）来源：存在于几乎所有靠氧呼吸的生物体内，包括细菌、真菌、高等植物、高等动物和人体中。其中含铜锌金属辅基的Cu·Zn-SOD是最为常见的一种酶。（2）理化性质：SOD属酸性蛋白酶，对pH、热和蛋白酶水解等反应比一般酶稳定。（3）生理功能（4）应用：化妆品、医疗、食品（主要是各种饮料）。（5）SOD应用的局限性²半衰期短。SOD在体内半衰期为6-8min，体外半衰期（25℃时）为9-10d。因此，体内注射表现为多次数、少浓度，体外涂抹表现概述自由基清除剂清除自由基的作用原理，及作用的条件。对超氧化物歧化酶的来源、物化性质和生理功能进行分

7、组讨论，并由有学生进行总结。教师再进行补充。教案纸教学内容、组织、教法、要求说明第8页共7页²为高剂量、低效应。²代谢速率快。SOD在体内代谢速率极快，注射6h后，90％以上的大分子SOD经降解为小分子而随泌尿系统排泄。²酶相对分子质量大，均在32000以上。因此，透皮或透膜吸收困难，体内或细胞内作用弱。²酶制剂不宜口服，口服易被胃酸变性，胃蛋白和胰蛋白酶水解破坏。²大分子异性蛋白，不宜大剂量、长时间使用，否则会不可避免地出现某些过敏性变态反应，呈现明显的不良反应性变化。²对靶细胞或靶部位的亲和力低，药用趋向性不明显。²酶的稳定性不高，对理化因素较为敏感，过高

8、温度、过大剂量辐射、过长时间超声波、过