长链非编码RNA H19在膀胱癌细胞中作为ceRNA拮抗let-7d促进肿瘤发生的分子机制研究

《长链非编码RNA H19在膀胱癌细胞中作为ceRNA拮抗let-7d促进肿瘤发生的分子机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R737.14单位代码：10159密级：公开学号：201520266硕士学位论文中文题目：长链非编码RNAH19在膀胱癌细胞中作为ceRNA拮抗let-7d促进肿瘤发生的分子机制研究英文题目：LongNon-codingRNAH19asaceRNAantagonisttolet-7dinbladderCancercellsanditsMolecularMechanism论文作者：宁伯彬指导教师：都书琪教授学科专业：泌尿外科完成时间：2018年2月中国医科大学硕士学位论文中国医科大学硕士学位论文长链非编码RNAH19在膀胱癌细胞中作为ceRN

2、A拮抗let-7d促进肿瘤发生的分子机制研究LongNon-codingRNAH19asaceRNAantagonisttolet-7dinbladderCancercellsanditsMolecularMechanism论文作者宁伯彬指导教师都书琪教授申请学位医学硕士培养单位第一临床学院一级学科临床医学二级学科外科学研究方向泌尿外科学论文起止时间2015年10月—2018年2月论文完成时间2018年2月中国医科大学（辽宁）2018年2月中国医科大学硕士学位论文中国医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：本论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工

3、作及取得的研究成果，论文中除加以标注的内容外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得其他学位而使用过的成果。对本研究提供贡献的其他个人和集体均已在文中进行了明确的说明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：年月日中国医科大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的原件、复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅。本人授权中国医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或

4、扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密（），在年后解密适用本授权书。（保密：请在括号内划“√”）论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日中国医科大学硕士学位论文摘要目的：探究LncRNAH19作为ceRNA通过拮抗let-7d调控靶基因Lin28bmRNA表达，以促进膀胱癌细胞的增殖和转移作用。获得LncRNAH19作为let-7d的调控靶基因及相关信号传导通路的可靠证据，意在阐明LncRNAH19的功能，揭示膀胱癌发生增殖及侵袭转移的新分子机制，为寻找膀胱癌诊断和治疗的靶基因和药物提供进一步的科学依据。研究方法：通过GEO数据库中的芯

5、片数据分析，选取我们要进行研究的目的基因。在2015年7月至2016年7月就诊就中国医科大学附属第一医院泌尿外科，并接受手术治疗的膀胱癌患者组织中抽取35例膀胱癌患者临床标本组织及其相应临近部位的正常组织，通过病理组织认证，同时伴有详细的相关临床病例资料。对于抽取的35对标本进行qRT-PCR（Quantitativereal-timepolymerasechainreaction）实验验证，确定H19和Lin28b为研究对象;并通过进一步的qRT-PCR实验和统计学计算，推测H19与Lin28b在人膀胱癌组织中表达量的相关性分析。接着我们选取了本

6、实验室现有的4种膀胱癌细胞系及1种正常的膀胱细胞系，测量每种细胞系中H19的表达量。接着通过脂质体Lipo3000转染人工合成的H19SiRNA于膀胱癌细胞T24中，验证3条不同SiRNA中效能最好的一条。通过脂质体Lipo3000转染人工合成的H19SiRNA，转染至膀胱癌细胞T24内，并以Negativecontrol（NC）作为对照，通过qRT-PCR实验对比两组实验组中H19，Lin28b及Let-7d的表达量，验证H19与Lin28b之间通过Let-7d进行调控的相互关系，以及通过CCK8实验和平板克隆实验验证其对膀胱癌细胞增殖的影响，通

7、过划痕实验和侵袭实验验证其对膀胱癌细胞侵袭的影响。通过生物信息学网站（TargetScan）预测H19和Lin28b与let-7d的结合位点，并通过已发表的相关文献进行了进一步的验证。在体外膀胱癌细胞中，利用qRT-PCR和细胞功能实验验证H19、Lin28b与let-7d的互相调控关系以及对膀胱癌细胞的影响：通过脂质体Lipo3000转染人工合成的H19的SiRNA及Let-7d的inhibitor，转染至膀胱癌细胞5637内，并以只转染了H19SiRNA的5637膀胱癌细胞作为对照，通过qRT-PCR实验对比两组实验组中H19，Lin28b及L

8、et-7d的表达量，验证H19与Lin28b之间通过Let-7d进行调控的相互关系，以及通过CCK8实验和平板克隆实验验证