VEGF和MVD在乳腺疾病血管生成中的意义.doc

《VEGF和MVD在乳腺疾病血管生成中的意义.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、VEGF和MVD在乳腺疾病血管生成中的意义作者：武变荣李积德郭振昌骆玉霜沈存芳【摘要】目的探讨VEGF和MVD在乳腺疾病血管生成中的意义。方法采用免疫组化染色法(S-P法)检测70例乳腺疾病患者（乳腺良性疾病患者28例，乳腺癌患者42例）术后标本中VEGF表达水平和MVD值。结果乳腺癌组VEGF高表达比例和MVD值均较乳腺良性疾病组高，差异有统计学意义（P<0.05）；乳腺癌组VEGF表达与年龄、肿块大小、HER2相关，与腋淋巴结、临床分期、ER、PR无关，而MVD仅与肿瘤大小和HER2相关。VEGF高表达组MVD值显著高于VEGF低表达组M

2、VD值，差异有统计学意义（P<0.05）。结论联合检测VEGF和MVD对预测乳腺疾病预后有积极意义。【关键词】乳腺癌VEGFMVD免疫组化染色法AbstractObjectiveTodetectthevalueofMVDandVEGFinbreastdiseaseangiogenesis.MethodsTheexpressionofVEGFandMVDin70casesofbreastdiseaseswasexaminedbyimmunohistochemistrystaining(SP-method).ResultsVEGFexpressi

3、onandMVDvalueinbreastcancerweremuchhigherthanbenignbreastdisease,therewasacorrelationbetweenVEGFexpressionandage,tumorsizeandHER2inbreastcancerandtherewasnocorrelationbetweenotherclinicalparameters,butMVDwascorrelatedwithtumorsizeandHER2.MVDvalveinVEGFhighexpressiongroupwashig

4、herthanVEGFlowexpressiongroup(P<0.05).ConclusionItshowspositivesignificanceindetectionofMVDandVEGFbothinbreastdiseaseangiogenesis.KeywordsBreastCancerVEGFMVDImmunohistochemistrystaining乳腺癌与所有实体肿瘤一样,其肿瘤细胞旺盛的代谢、增殖需要充足的血液供应,其肿瘤新生血管形成与肿瘤的发生、发展密切相关。促血管形成因子的表达能促进肿瘤新生血管形成,为肿瘤的生长、浸

5、润及转移创造条件，血管内皮生长因子（VEGF）是已知作用最强、活性最高的促血管形成因子；微血管密度（MVD）是显示肿瘤血管形成活性的重要指标。我们分别应用抗Ⅷ因子抗体和VEGF单克隆抗体染色免疫组化方法检测乳腺疾病患者病例中MVD和VEGF表达情况,旨在探讨其在乳腺疾病血管生成中的作用和意义。1材料与方法1.1临床资料5收集2006年～2007年于我院外科行手术治疗乳腺疾病病例70例；年龄32～64岁，中位年龄47岁；其中乳腺良性疾病患者28例，经病理证实的乳腺癌患者42例；乳腺癌组中无淋巴结转移者19例,有淋巴结转移者23例；年龄小于45岁者16

6、例，大于45岁者26例。早期（Ⅰ-Ⅱa期）病例16例，中晚期（Ⅱb-Ⅲ期）病例26例。因Ⅳ期患者未行手术治疗，故本资料中无Ⅳ期病例。1.2主要试剂第Ⅷ因子抗体、抗VEGF单克隆抗体及SP试剂盒购自福州迈新生物有限公司。1.3染色方法采用免疫组织化学染色法（S-P法）,将标本做常规石蜡包埋后连续切片（4μm）,脱蜡，水化，用PBS冲洗（10min×3次）；滴加一抗（VEGF抗体和第Ⅷ因子抗体），4℃孵育过夜，PBS冲洗（10min×3次）；滴加二抗［辣根过氧化物酶（HRP）］，37℃孵育30min，PBS冲洗（10min×3次）；DAB显色，37℃孵

7、育30min，PBS冲洗（10min×3次）；自来水冲洗，苏木精浅染，自来水冲洗反蓝，梯度酒精脱水，透明，中性树胶封固。用已知阳性切片做阳性对照，用PBS液代替一抗做阴性对照。1.4判断标准　VEGF表达以细胞质出现棕黄色或棕褐色颗粒者为阳性细胞，在低倍镜(×40)下观察切片并选择阳性细胞分布较密集的区域，然后在高倍镜(×400)下计数3个“热点(hotspot)”，细胞数按染色深浅分为4个等级：(-)<5%；(+)6%～25%；(++)26%～50%；(+++)>50%。(-)和(+)为低表达；(++)和(+++)为高表达。MVD记数

8、参照Weidner［１］方法。1.5统计学方法计量资料用t检验，计数资料用χ2检验，两变量资料相关分析用Spearman'