大肠癌中vegf、ki 67和mvd的检测及其临床意义.doc

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1、大肠癌中VEGF、Ki—67和MVD的检测及其临床意义【摘要】目的：探讨大肠癌组织VEGF、Ki-67的表达和微血管密度(MVD)及其临床意义。方法：应用免疫组化SP法检测60例人肠癌组织中VEGF、Ki-67的表达和MVD,并分析其临床特征及相关性。结果：大肠癌VEGF、Ki-67的阳性表达率分别为76.7%、73.2%,明显高于癌旁肠组织的35.0%.20.1%O两者比较差异均有统计学意义(P<0.05)；VEGF阳性率在有/无淋巴结转移的大肠癌中差异显著(P〈0.05)；VEGF阳性表达组MVD值显著高于阴性组(1X0.05)。结论：VEGF与人肠癌的发

2、生、发展和转移密切相关，提示阻断VEGF通路将对大肠癌的治疗提供新的靶点。Ki-67是肿瘤良恶性鉴别、提示预后的重要指标。【关键词】大肠肿瘤；血管内皮生长因子；微血管密度；Ki-67实体肿瘤的生长侵袭与转移依赖丁新生血管的生成。对肿瘤血管生成机制的研究，目前主要集屮于VEGF家族和具有调节血管生成作用的酪氨酸激酶受体［1］。所有促血管生成因子中，VEGF在血管生成过程中起着关键性作用。本研究应用免疫组化方法检测大肠癌组织及癌旁组织中VEGF、Ki-67的表达，并探讨VEGF表达与CD34计数的微血管密度(MVD)的关系,从而评价VEGF在大肠癌发生、发展中的作

3、用。同时观察Ki-67在肿瘤及瘤旁组织屮的表达及意义。1资料与方法1.1一般资料收集安阳市第六人民医院和安阳市第二人民医院2009-2011年资料完整的60例大肠癌根治术标本，患者术前均未经过任何抗肿瘤治疗。其中男42例，女18例，中位年龄52岁；有淋巴结转移者33例，无淋巴结转移者27例。大肠癌按WHO(2005)分型及有/无淋巴结转移进行分组。另选取大肠癌癌旁组织20例作为对照组。1.2研究方法全部标本经4%中性甲醛液固定，石蜡包埋，4Min厚连续切片，IIE染色。免疫组化采用SP法。鼠抗人单克隆抗体VEGF、鼠抗人单克隆抗体CD34、鼠抗人单克隆抗体Ki

4、-67及免疫组化试剂盒均购口福建边新生物技术开发有限公司。以同一条件下染色的阳性片作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。1.3结果判定VEGF、CD34定位于细胞质，以出现棕黄色颗粒为阳性细胞。阳性细胞数>10%为(+)。CD34阳性的单个内皮细胞或内皮细胞簇被视为血管。先低倍镜下全而观察切片以选择肿瘤内4个血管着色最密集的区域，在200倍镜下用网格状目镜测微尺计数染成棕色的血管数目，取4个视野的均值作为MVD值。Ki-67以肿瘤细胞核出现明显的棕黄色颗粒为阳性，阳性细胞数1%〜20%为(+),21%〜50%为(++),>50%为(+++)。1.4统计学处理

5、应用SPSS10.0统计学软件对数据进行•处理，计量资料以(x±s)表示，比较采用t检验，计数资料采用字2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。2结果2.1VEGF的表达与临床病理参数的关系VEGF在癌组织中的阳性表达率为76.7%(46/60),明显高于癌旁组织中的35.0%(7/20),两者比较差异有统计学意义(1X0.01)。VEGF在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组中的阳性表达率也不同，分别为87.9%(29/33)和63.0%(17/27),两者比较差异有统计学意义(P〈0・05)。在癌组织中，VEGF阳性细胞弥漫并多聚集成团。从整体看，癌旁肠组织

6、屮VEGF阳性反应强度和范围较癌组织明显减弱。VEGF表达与癌细胞的胞质呈弥漫颗粒状，见图1。2.2Ki-67与临床病理参数的关系Ki-67在大肠癌组织中的阳性表达率为73.2%明显高于癌旁肠组织的20.1%,两者比较差异有统计学意义(P0.05)oKi-67表达与癌细胞的胞核见图2。2.3VEGF阳性与MVD的相关性46例大肠癌VEGF阳性表达组的MVD值为(38.32±12.65),14例VEGF阴性表达组为(29.63±9.3),两者比较差异有统计学意义(P〈0・05)。CD34定位于血管内皮细胞质，见图3。3讨论肿瘤新生血管的生成过程中，VEGF被认为

7、是最重要的促发因子，并与创伤愈合等牛理性的新牛血管形成有关。研究表明，VEGF具有促进内皮细胞分裂增殖，诱导毛细血管生芽、增加微血管通透性、促进内皮细胞迁移和抑制凋亡等多种作用［2］。VEGF-A可与VEGFR-1及VEGFR-2结合，但主要通过与VEGF-2结合发挥促血管生成作用［3］,缺氧引起细胞缺氧诱导因子1a和2ci过表达，继而活化VEGF基因转录。同时突变的K-ras等癌基因、肿瘤抑制基因、一些生长因子及细胞因子等诱导VEGF的表达与分泌。木组研究显示，VEGF在大肠癌中的表达显著高于相应癌旁组织的表达(P<0.01)；VEGF阳性表达在有/无淋巴结

8、转移的大肠癌中有显著差异(P<0.05