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1、2011届高三实验专题复习(1)必修教材实验复习颜色鉴定类一、检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质(必修1P18)1、实验原理:(1)斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化为:。葡萄糖、、是还原糖(2)双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/mL的溶液和质量浓度为0.01g/mL的溶液。蛋白质可与双缩脲试剂产生。(3)苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为,遇脂肪的颜色反应为红色。2、实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质3、实验选材:(1)做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含高,颜色为的植物组织,如苹果、梨
2、。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)(2)做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。(3)做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。4、实验试剂斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水5、讨论:(1)选取富
3、含还原糖的生物材料时,能用甘蔗或者橘子吗?为什么?(2)斐林试剂和双缩脲试剂有哪些区别?a溶液浓度不同:斐林试剂中CuSO4溶液为g/mL,双缩脲试剂中CuSO4溶液为g/mLb使用原理不同:斐林试剂实质是新制Cu(OH)2沉淀,双缩脲试剂实质是碱性条件下的Cu2+c使用方法不同:斐林试剂使用时,先把溶液和溶液混合,然后立即使用;24双缩脲试剂是先加溶液,然后再加入3至4滴溶液6、方法步骤:(1)可溶性糖的鉴定操作方法注意问题解释1.制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须临时制备因苹果多
4、酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。 3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~90℃下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu(OH)2生成。4.试管放在盛有50-65℃温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜
5、色:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;缩短实验时间。(2)脂肪的鉴定操作方法注意问题解释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。染色时间
6、不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。 酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。24低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇中。(3)蛋白质的鉴定操作方法注意问题解释制备组织样液。(浸泡、去皮研磨、过滤。) 黄豆浸泡1至2天,容易研
7、磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。A液和B液也要分开配制,储存。鉴定时先加A液后加B液。 CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容
8、易彻底,并且试管也不易洗干净。附:淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜色观察二、观察DNA和RNA在细胞中的分布(必修1P26)1.实验原理(1)甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同:DNA遇甲基绿呈色;RNA吡罗红呈色利用甲基绿吡罗红混合染色剂可显示DNA和RNA在细胞中的分布。(2)盐酸可改变的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中
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