人脑胶质瘤中cyclin B1的表达及其与细胞增殖活性的关系.doc

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1、人脑胶质瘤中cyclinB1的表达及其与细胞增殖活性的关系作者：杜程钢，傅向平，李安民，张志文，赵明，郭晓明【摘要】目的研究人脑胶质细胞瘤中细胞周期素B1（cyclinB1）的表达水平，及其胶质瘤细胞增殖活性的关系。方法采用SABC免疫组化方法检测62例人脑胶质瘤和14例正常脑组织标本中cyclinB1和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达水平，观察并对比各病理等级中表达水平。结果cyclinB1在正常脑组织中表达率为7.1%（1/14），其阳性率和平均标记指数随着胶质瘤病理分级的增高而明显升高(P<0.05)。双元相关性分析发现cyclinB1与PCNA的表达呈显著正相关（Pe

2、arson相关系数r=0.576，P<0.01）。结论人脑胶质瘤中cyclinB1的表达与病理学分级和肿瘤细胞增殖活性关系密切，可能是肿瘤恶性增殖的促进因素。【关键词】胶质瘤；cyclinB1；PCNA；免疫组织化学　　Abstract：ObjectiveTostudytheexpressionofcyclinB1inhumangliomasanditsrelationshipwithcellularproliferationactivity.MethodsTheexpressionofcyclinB1andPCNAweredetectedbyimmunohistochemi

3、stryin62humanbraingliomasand14normalbraintissuesineachWHOgradeofhumanbraingliomas.ResultsPositiverateofcyclinB1innormalbraintissueswas7.1%(1/14).Inhumanbraingliomas,positiveratesandmeanlabelingindicesforcyclinB1increasedwiththeadvancingofpathologicalgrades(P<0.05).Positivecorrelationwasobta

4、inedbetweencyclinB1andPCNAbybivariatecorrelationanalysis(Pearsoncorrelationcoefficientr=0.576，P<0.01).ConclusionExpressionofcyclinB1iscorrelatedwiththecellularproliferationactivityaswellaspathologicalgradesinhumanbrainglioma.Itmaybeanimportantfactorinpromotingthecelltransformationtomalignan

5、tphenotype.　　Keywords：glioma;CyclinB1;PCNA;immunohistochemistry　　G2/M调控点是细胞内外信号调控细胞增殖的关键点，与肿瘤的发生发展关系密切。细胞周期素B1（cyclinB1）是G2/M调控点重要调控蛋白，对于细胞增殖起着重要的正性调控作用。有实验发现cyclinB1在多种肿瘤中过度表达[1]，认为与肿瘤的发生相关。本研究检测了62例脑胶质瘤标本中cyclinB1的表达，观察其与增殖细胞核抗原（PCNA）标记指数的关系，探讨cyclinB1与细胞恶性增殖的关系。　　1材料和方法3　　1.1一般情况脑胶质瘤标本62例取自

6、本院病理科保存的2001—2004年胶质瘤石蜡包埋标本，5μm厚切片。病理诊断：星形细胞瘤32例，少枝胶质细胞瘤12例，胶质母细胞瘤18例。按WHO神经系统肿瘤分级：Ⅰ级9例，Ⅱ级15例，Ⅲ级20例，Ⅳ级18例。其中男36例，女26例，年龄19～72岁，平均38岁。14例正常脑组织取自急性脑外伤患者的内减压术。兔抗人cyclinB1和小鼠抗人PCNA单克隆抗体均购自SantaCruz公司，SABC免疫组化试剂盒为武汉博士德公司产品。　　1.2方法免疫组化染色采用SABC法。石蜡切片常规脱蜡至水，30％H2O2室温下阻断30min，微波修复抗原，正常山羊血清室温下封闭30min，分别

7、滴加兔抗人cyclinB1(1：100)、小鼠抗人PCNA（1:100），4℃过夜，滴加生物素化山羊抗小鼠/兔IgG，室温下孵育30min，滴加SABC，孵育30min，避光DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片，于镜下观察。0.01mol/LPBS代替一抗为阴性对照，正常脑组织为正常对照组。结果以胞核中出现棕黄色染色为阳性，每一级别胶质瘤中阳性染色例数的比例为该级别的阳性率。随机计数每一标本中5个以上高倍视野的1000个细胞，平均每100个细胞中阳性染色为标记指数（血