原发性肝癌外周血白蛋白基因片段扩增的临床意义.doc

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1、原发性肝癌外周血白蛋白基因片段扩增的临床意义作者：朱云松，杨大明，姚登福，孟宪镛，李玉明，钱俊波，王亚明，许利华【摘要】　　目的:探讨外周血白蛋白(Alb)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的临床价值。方法:以巢式聚合酶链反应(RT-PCR)扩增外周血中Alb的基因片段分析在原发性肝癌（HCC）、慢性肝病和非肝病患者外周血中血白蛋白基因表达。结果:67例肝癌患者外周血中Alb基因的检出率为59.7%,明显高于肝硬化、慢性肝炎和肝外肿瘤组患者（P<0.01),但与急性肝炎组无明显差别（P>0.05);在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期肝癌中,Alb基因片段阳性率分别为33.3%、36.8%和76.9%;肝

2、内有无转移的肝癌组间存在明显差异（P<0.05),尤其在伴有肝外远处转移的肝癌中,Alb基因全数阳性(100.0%)。结论:分析外周血中Alb基因有助于肝癌的诊断、肝癌远处转移判别的监测。【关键词】原发性肝癌Alb基因RT-巢式PCR　　[Abstract]Objective:Toexploreclinicalvaluesofperipheralbloodalbumingeneinearlydiagnosisanddifferentialdiagnosisofhepatocellularcarcinoma(HCC).Methods:TheAlbgenewasamplifiedbynes

3、tedreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT-PCR)inpatientswithhepatocellularcarcinoma,chronicliverornon-liverdisease.Results:ThepositiverateofperipheralbloodAlbgenefragmentsfrom67patientswithHCCwas59.7%.Itwassignificantlyhigherthanthatfromthepatientswithlivercirrhosis(LC),chronichepatitis(CH)

4、andextrahepatictumor(ET)（P<0.01),butthereisnosignificantdifferenceinpositiveratesofAlb-mRNAbetweenHCCandacutehepatitis(AH).TheAlb-mRNAwascorrelatedwiththestageofHCCandthepresenceofintrahepaticmetastasis.TheexpressionofAlbgenewas33.3%inIstageHCC,36.8%inⅡstageHCCand76.9%inⅢstageHCC.Itwaspositivein

5、allpatientswithextrahepaticmetastasis(100%).Conclusion:TheanalysisofperipheralbloodAlbgeneisusefulfordiagnosisanddifferentiationofHCCandjudgmentextrahepaticmetastasis.　　[Keywords]Hepatocellularcarcinoma；Albumingene；Nestedreversetranscriptionpolymerasechainreaction　　原发性肝癌（hepatocellular4carcinoma，HC

6、C）是临床最常见、治疗最难的恶性肿瘤,HCC切除和肝移植是治疗的最佳选择,但绝大多数患者在术后发生移植肝或远处复发,其原因是在术前未能检出微转移灶或术中肝癌细胞释放入血所致,因而如能早期准确地检出外周血或淋巴结转移灶,才能设法降低复发率提高生存率[1，2]。本研究以RT-巢式PCR方法分析肝病患者外周血中Alb-mRNA,以观察它们在肝癌诊断、肝癌远处转移判断的临床价值。　　1材料与方法　　1.1研究对象门诊和住院患者中收集急性肝炎12例、慢性肝炎20例、肝硬化16例、肝癌67例（男61例，女6例，年龄25~81岁，平均49.8±11.4岁）和非肝肿瘤14例（肺癌和胃癌各5例，食管癌、胰腺癌

7、、结肠癌和胆管癌各1例）。肝癌和肝炎的诊断分别按照全国肝癌防治协作组标准和1995年北京全国肝炎会议制定标准核实诊断。另从健康正常人中收集外周血标本20份作为对照。所有标本于清晨空腹采血5ml，以肝素抗凝并及时存于4℃保存，作外周血有核细胞制备。所有研究对象均以放射免疫分析法检测血AFP浓度。　　1.2外周血有核细胞分离及总RNA制备肝素抗凝血在2小时内以淋巴细胞分离液及密度梯度离心法分离外周血有核细胞。经生