中药对广州地区流感嗜血杆菌抑菌作用研究.doc

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1、中药对广州地区流感嗜血杆菌抑菌作用研究作者：叶惠芬，刘平，陈惠玲，李尚文【关键词】,中草药　　［摘要］目的：探讨中草药对广州地区流感嗜血杆菌的体外抑菌作用。方法：采用琼脂稀释法检测流感嗜血杆菌对中药的最低抑菌浓度。结果：6种中草药水煎剂均有不同程度的抑菌作用，其中黄连抑菌效果最好，黄连水煎剂对流感嗜血杆菌MIC50为1g/L，MIC90为2g/L。结论:中药对流感嗜血杆菌有不同程度抑菌作用。　　［关键词］中草药；抑菌作用；流感嗜血杆菌　　ExperimentalResearchonAntibacterial

2、EffectofChineseHerbalMedicinesonHaemophilusInfluenzaeinGuangzhou　　Abstract:ObjectiveToexploretheantibacterialeffectofChineseherbalmedicinesonHaemophflusinfluenzaeinGuangzhou．MethodsMinimalinhibitoryconcentratiOn(MIC)oftheextractsaffectingonbacteriawasassay

3、edbyagardilution．ResultsSixkindsofherbsdecoctionhaddifferentantibacterialeffectsonHaemophilusinfluenzae，amongwhichCoptiswashighlyactiveagainstHaemophilusinfluenzae.ItsMIC50was1g/L.ConlusionSomechinsesherbshadbacterionstaticeffectagainstHaemophilus.　　Keywor

4、ds:Chinsesherbs;Bacteriostasis;Haemophilusinfluenzae流感嗜血杆菌是引起社区获得性肺炎最常见致病菌之一，近年来在临床检出率不断增多；流感嗜血杆菌在发展中国家小儿急性下呼吸道感染中分离率高达45％。世界各国发现流感嗜血杆菌耐药菌株特别是β内酰胺酶阳性的耐氨苄西林菌株的报道日益增多［1，2］，给临床治疗带来极大的困难。由于耐药菌株的大量出现可导致临床治疗失败，感染复发，住院时间延长，增加患者的经济负担和生理压力。中药具有清热解毒、滋补、抗菌等作用，且具有副作用小

5、、抗耐药性好等特点，开始得到人们的广泛关注。为此，本课题进行了中药对本地区临床分离的流感嗜血杆菌体外抑菌效果的研究，为临床预防感染、临床治疗用药提供依据。　　1材料与方法　　1.1菌株来源42004年7月至2004年12月广州地区5家医院(广州市第一人民医院、广州市儿童医院、中山大学附属第二医院、广州医学院附属第一、第二医院)从临床分离的156株流感嗜血杆菌，按常规鉴定方法［3］：将痰及咽拭子标本按常规方法接种在血琼脂和巧克力平板上，35℃5％CO2环境下培养过夜，挑选2个~4个可疑菌落至血平板及胰大豆平板

6、上作卫星试验。并在另一胰大豆平板上贴X+V因子、X因子、V因子纸片，各纸片相距5cm。只在血平皿上卫星试验阳性、在胰大豆平板上卫星试验阴性，以及只在X+V因子纸片周围生长、X因子、V因子纸片周围不生长的菌落可判定为流感嗜血杆菌。　　1.2中草药黄连、黄柏、黄芩、连翘、千里光和金银花共6种中药，均由我院购自广州市药材公司。　　1.3抗生素纸片氨苄西林、红霉素、复方甲基异唑、氯霉素、环丙沙星、阿莫西林／克拉维酸、头孢呋新和头孢噻肟均为英国OXOID公司产品。　　1.4培养基HTM药敏培养基和添加剂为英国OXOI

7、D公司产品。　　1.5中药煎制参照陈奇的方法［4］进行，将100g中药于砂锅，加200ml蒸馏水浸泡30min后用慢火煎至水量浓缩为100ml过滤，药渣再加水200ml煎煮、过滤，将2次滤液共200ml煎煮浓缩成100ml，使中药浓度为1g／ml。经高压蒸汽灭菌后备用。中药的最低抑菌浓度(MIC)的测定：按NCCLS推荐的琼脂稀释法测定实验菌株的MIC值，用流感嗜血杆菌ATCC49619作参考质控菌株。　　制备中药琼脂平板，中药和HTM药敏培养基琼脂按比例混合，最终含药浓度为250．0g／L、125．0g／

8、L、62．5g／L、31．25g／L、15．62g／L、7．81g／L、3．90g／L、1．95g／L、0．98g／L。　　制备菌液，菌液调整为0．5麦氏单位后再作1∶10稀释，用1μl定量接种环点种于琼脂表面，最终琼脂上所含接种菌量为104cfu／ml。　　采用多点接种法，首先点种生长对照平板(不含中药)，随后从最低浓度开始，依次点种不同浓度的中药平板，放35℃孵育24h，记录无菌生长的最低中药浓度。　　1.6