p57KIP2、cyclin D1和cyclin E在宫颈鳞癌中的表达及意义.doc

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1、p57KIP2、cyclinD1和cyclinE在宫颈鳞癌中的表达及意义作者：周正平，肖庆邦，冉丰丰，王进京，郑洪【摘要】目的探讨p57KIP2、cyclinD1及cyclinE蛋白在宫颈癌发生、发展中的作用。方法用免疫组织化学SP法检测100例宫颈鳞癌、60例宫颈上皮内瘤变和30例正常宫颈鳞状上皮组织中p57KIP2、cyclinD1和cyclinE蛋白的表达情况。结果cyclinD1、cyclinE蛋白在宫颈SCC与NE、CIN与NE组织中阳性表达率之间比较、cyclinE蛋白在宫颈SCC与CIN组织中阳性表达率之间比较，差异均有显著性(P<0.01)；c

2、yclinD1与cyclinE之间的表达呈正相关(P<0.01)；三者表达均与组织学分级、淋巴结转移、患者年龄无关(P>0.05)。结论p57KIP2、cyclinD1及cyclinE蛋白共同参与了宫颈癌的发生发展。cyclinD1和cyclinE蛋白高表达可能是宫颈组织恶变的重要生物学标志，cyclinE异常表达是宫颈癌发生的早期事件。【关键词】宫颈癌；免疫组织化学；p57KIP2；cyclinD1；cyclinE1资料与方法1.1标本来源收集遵义医学院附属医院病理科1999年1月～2004年1月的宫颈活检或者手术确认的宫颈SCC标本100例(I级27

3、例、II级48例、III级25例)，CIN60例(I级20例、II级20例、III级20例)。病人术前均未行放、化等治疗。检出伴盆腔淋巴结肿大41例，其中伴盆腔淋巴结转移12例(每例平均检出淋巴结4.33枚)；患者年龄20～75岁，中位年龄45岁。随机选取30例正常宫颈鳞状上皮(Normalcervicalsquamousepithelium,NE)（均选自因子宫肌瘤行子宫切除术的宫颈上皮组织）作为试验对照组。1.2试剂兔抗人p57KIP2多克隆抗体、鼠抗人cyclinD1单克隆抗体(DCS/6)、鼠抗人cyclinE单克隆抗体(13A3)，与SP试剂盒、DAB酶底

4、物显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发有限公司。3种抗体的工作浓度分别为1∶75、1∶100、1∶50。1.3方法将存档的10%中性福尔马林固定、石蜡包埋，4μm厚连续切片，行HE染色和SP免疫组化染色。严格按照说明书操作步骤进行，DAB显色，苏木精复染。用迈新生物技术有限公司提供的阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作空白对照。组织抗原均采用高压修复处理。1.4结果判断p57KIP2、cyclinD1及cyclinE蛋白阳性信号呈棕黄色或棕褐色，均主要定位于细胞核，见图1～3。每张切片随机选取有肿瘤组织的不同高倍视野(×4400)，计数2000个肿瘤细胞，根据阳性

5、细胞数占所计数肿瘤细胞的百分率分为：(1)阴性(－)：阳性细胞数<5%；(2)弱阳性(+)：阳性细胞数为5%～24%；(3)阳性(++)：阳性细胞数为25%～49%；(4)强阳性(+++)：阳性细胞数≥50%。1.5统计学处理所得数据采用SPSS11.0统计软件，应用χ2检验、Fisher确切概率法及配对四格表进行统计学处理。2结果2.1p57KIP2、cyclinD1及cyclinE在宫颈SCC、CIN、NE中的表达cyclinD1、cyclinE蛋白在宫颈SCC与在NE中阳性表达率之间比较、在CIN与在NE中阳性表达率之间比较、以及cyclinE蛋白在宫颈

6、SCC与在CIN中阳性表达率之间比较差异均有统计学意义(P<0.01)；p57KIP2蛋白在宫颈SCC与在CIN、NE中阳性表达率之间比较、以及在CIN、NE组织中阳性表达率之间比较、cyclinD1在宫颈SCC与在CIN中阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。2.2p57KIP2、cyclinD1及cyclinE蛋白在宫颈SCC中的表达与临床病理特征的关系在宫颈SCC组织中，随着组织学分级的增加，p57KIP2蛋白的阳性表达率逐渐降低，cyclinD1蛋白阳性表达率在组织学Ⅰ级组高于组织学Ⅱ、Ⅲ级组，cyclinE蛋白的阳性表达率在组

7、织学Ⅲ级组高于组织学Ⅰ、Ⅱ级组，但差异均无统计学意义(P>0.05)；在盆腔淋巴结转移阳性组，p57KIP2蛋白的阳性表达率低于淋巴结转移阴性组，cyclinD1、cyclinE蛋白阳性表达率均明显高于淋巴结转移阴性组，但差异均无统计学意义(P>0.05)；p57KIP2、cyclinD1、cyclinE蛋白的表达均与患者年龄无关(P>0.05)，见表2。2.3p57KIP2、cyclinD1和cyclinE蛋白在宫颈鳞癌组织中表达的相互关系根据配对四格表分析，p57KIP2与cyclinD1之间、p57KIP2与cyclinE之间的阳性表达均