外源性VEGF对自体移植脾组织血管再生的影响.doc

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1、外源性VEGF对自体移植脾组织血管再生的影响作者：郭光金，蒋登金，姜恒，左艳芳　　[摘要]目的探讨应用外源性VEGF促进自体脾组织移植后血管再生与结构重建的影响，为VEGF用于自体移植脾组织的实验研究和临床应用提供理论参考依据。方法采用216只昆明种小白鼠随机分为脾切除自体脾组织移植组和假手术组，再将脾移植组分为实验组和对照组。实验组小鼠分别于术后7、14、30、60d于尾静脉内注射VEGF，注射后7、15、30、60、90d取脾组织标本。进行组织学观察、血管面密度测定、免疫组化染色方法KDR的检测、KDR阳性细胞密度测定、组织原位杂交技术

2、KDRmRNA检测。结果术后7、15、30d注射VEGF组注射VEGF后较对照组的血管数量明显增多；术后60d注射VEGF组注射VEGF后与对照组各时相点的组织学特征没有明显差别；术后7、15、30d注射VEGF组KDR面积密度值高于对照组，术后60d注射VEGF组KDR面密度值与对照组比较无显著差别；术后7、15、30d注射KDRmRNA表达阳性细胞密度高于对照组，术后60d注射VEGF组KDRmRNA表达阳性细胞密度与对照组比较没有明显差异。结论外源性VEGF能够促进移植脾组织内血管生长，自体脾组织移植术后7~15d开始静脉应用VEGF

3、是促进血管再生的较理想时间；外源性VEGF可能是通过与移植脾组织内所表达的KDR结合发挥作用。　　[关键词]自体移植脾组织；血管再生；VEGF；KDR；小鼠　　EffectsofexogenousVEGFonvascularregenerationinautotransplantedsplenictissuesofmice　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffects,thefeasibilityandthemechanismofexogenousVEGFonvascularregenerationa

4、ndreconstructionofthesplenictissuesduringtheprocessofsplenicautotransplantationintothegreateromentum.MethodsAtotalof216healthyKunmingmicewererandomizedintosplenictissueautotransplantation+VEGFgroup(namedasVEGFgroup),splenictissueautotransplantationgroup(controlgroup)andsha

5、moperationgroup.ThemiceinVEGFgroupwereinjectedwithexogenousVEGFintothecaudalveinsonday7,15,30,60respectivelyafteroperation.Threemiceof3groupswerekilledandthesplenictissuewastakenasspecimenonday7,14,30,60,90afterinjectionofexogenousVEGFtoconductthefollowinginvestigations.Th

6、emorphologicchangesinautotransplantedsplenictissuewereobservedunderlightmicroscopeandelectronmicroscope.AfterintubationwasconductedthroughleftventricleandrightatriawasopenedandlavagedwithChineseink,the5splenictissuepiecesweremadeandtheareadensityofbloodvesselwastestedbyusi

7、ngcomputerimagesystem.ThedensityofKDRpositivecellswastestedbyimmunohistochemicalmethodsandcomputerimageanalysis.TheexpressionofKDRmRNAwereinvestigatedandanalyzedbyinsituhybridizationtostudyexogenousVEGFonKDRmRNAexpression.ResultsOnday7,15,30afterinjectionwithexogenousVEGF,

8、themiceinVEGFgroupwerefoundmorerenascentbloodvessels,spleniccorpuscles,centralarteriesand