两种梅毒螺旋体检测方法的对比分析.doc

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1、两种梅毒螺旋体检测方法的对比分析【摘要】目的:探讨在采供血机构的血液梅毒螺旋体检测中,用抗TPELISA法替代非特异性的TRUST法的可行性。方法:用抗TPELISA法和TRUST法同时检测60677份血标本,并对两种方法的检测结果进行对比分析。结果:抗TPELISA试剂检出阳性率明显高于ELISA法,同时抗TPELISA法阴性(TRUST法检测阳性)经TPPA法鉴定有阳性结果。结论:虽然抗TPELISA法的特异性和灵敏度明显高于TRUST法,尚不能完全取代TRUST法,但两种方法可相互补充。【关键词】无偿献血;梅毒螺旋

2、体;反应素;抗TP梅毒螺旋体(T.pallidum,TP)属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种,是引起人类梅毒的病原体。人是梅毒的惟一传染源,可经输血引起输血后梅毒。血液中的TP的检测以前大多采用TRUST法或RPR法,检测血液中TP非特异性抗体(反应素),其特异性和灵敏度相对较差,难以满足采供血机构筛选献血者的需要。抗TPELISA法检测血液中TP特异性抗体,其特异性和灵敏度大幅度提高。笔者对本站2003年8月至2006年8月采用抗TPELISA和TRUST的血液梅毒筛选结果进行对比分析。  1材料与方法  1.1样本  无

3、偿献血者血标本60677份;室内质控品:2NCU/ml梅毒抗体特异质控血清(卫生部临床检验中心,批号:0302,0308,0401,0408,0501,0505,0507,0510,0601,0606);2NCU/ml梅毒初筛质控血清(卫生部临床检验中心,批号:0304,0307,0310,0402,0408,0412,0503,0507,0511,0602,0605)。  1.2试剂  抗TPELISA试剂盒(北京金豪制药有限公司,批号:20030516,20030912,20031220,20040408,20040819,

4、20041122,20050123,20050422,20050718,20050904,20051029,20060119);抗TPELISA试剂盒(英科新创厦门科技有限公司,批号:2006037502,2006057504);TPPA试剂盒(日本富士公司,批号:VA40402,VA50307,VA51207,VA60402)。TRUST试剂盒(兰州生物制品研究所,20030201,20030802,20040201,20040802,20050201,20050802,20060201)。  1.3仪器  TECANRSP2

5、00全自动加样分析系统(瑞士TECAN公司);FAME24/20全自动酶标免疫分析系统(美国哈美顿公司);KJ3201BS型振荡仪(中国姜堰市康健医疗器具有限公司);TECAN酶标仪(瑞士TECAN公司);TECAN洗板机(瑞士TECAN公司);anthos孵育振荡器(奥斯邦公司)。  1.4方法  均严格按试剂盒内说明书操作。  2结果  2.1两种方法检测结果的比较  见表1。表1ELISA法和TRUST法检测结果(略)从表1两种方法检测为阳性的638份样本中,TRUST法检出160份,占25%(160/638);ELISA

6、法检出625份,占98%(625/638);抗TPELISA法阳性检出率明显高于TRUST法。  2.2TRUST法阳性经抗  TPELISA法检测阴性的13份样本再用TPPA法确认抗TPELISA法检测的13份阴性标本经TPPA法鉴定后有5份阳性结果,见表2。表213份血标本TPPA法确认结果(略)  3讨论血清中反应素在初期梅毒病灶1周~2周时出现,阳性率为53%~83%,二期梅毒的阳性率可达100%,晚期梅毒的阳性率达58%~85%,胎传梅毒的阳性率为80%~100%。一些病原如风疹、水痘、类风湿性关节炎、系统性红斑狼

7、疮等可能造成TRUST法的假阳性结果[1]。梅毒特异性抗体由特异性抗原诱发产生,在梅毒潜伏期即产生。一期梅毒时增高,主要是IgM型;二期梅毒时达高峰,有IgG型、IgM型;三期梅毒略降低,主要是IgG型,对于早期梅毒,有TP检查,反应素血清反应及特异性梅毒血清反应检查。而晚期梅毒,TP转阴,反应素反应也常减退或转阴,只有特异性血清反应[2]。抗TPELISA试剂还具有价廉、保存时间久等优点,是目前梅毒血清学诊断试验的首选方法。虽然抗TPELISA法明显优于TRUST法,从表2可看出,TRUST法阳性(ELISA法阴性)13份标

8、本中,经TPPA法确认有5份阳性标本。抗TPELISA法目前尚不能完全取代TRUST法,TRUST法试剂价廉、操作方便快捷,本文试验结果显示TRUST法的使用在一定程度上可防范抗TPELISA法产生的阳性标本漏检问题。作为采供血机构,保证血液质

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