预防艾滋病母婴传播检测服务

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1、梅毒实验室检测梅毒血清学检查非梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验性病研究实验室试验(VDRL)不加热血清反应素试验(USR)血浆反应素环状卡片试验(RPR、TRUST)非梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体一旦感染人体,宿主迅速对螺旋体表面的脂质作出免应答,在3-4周产生抗类脂抗原的抗体(反应素)。抗体主要是IgM和IgG混合抗体。未经治疗的病人,其血清内的反应素可长期存在。经正规治疗后,反应素可以逐渐减少至转为阴性。RPR试验在USR试剂成分的基础上加入黑色碳颗粒作为沉淀的指示物用白色的硬纸片替代玻片血清不需要灭活不需要显微镜观测结果可作定量试验有现成的试剂盒携

2、带方便操作简单,价格便宜试验的结果可长期保存RPR试验仪器设备水平旋转仪RPR试剂盒:RPR抗原、带直径为18mm圆圈的反应卡片、抗原用滴管、针头。RPR试验操作步骤定性试验加样:吸取0.05ml血清(浆)放在卡片圈中,并均匀地涂布在整个圈中。加抗原:将抗原轻轻摇匀,用9号针头加1滴抗原。反应:将卡片置水平旋转仪旋转8分钟,立即在亮光下观察结果。RPR试验操作步骤定量试验稀释液准备:在圈内加入0.05ml生理盐水(一般作6—8个稀释度),勿盐水涂开。加样:吸取0.05ml血清与各圈中盐水作系列稀释,并涂布整个圈中,从后向前依次涂开。往所有孔内加入抗原悬滴液一滴。将卡片置水平旋转仪旋转8分钟,立

3、即在亮光下观察结果。RPR试验结果判读3+、4+:圆圈内出现中到大的黑色絮状物,液体清亮。2+:圆圈内出现小到中的黑色絮状物,液体较清亮。1+:圆圈内出现小的黑色絮状物,液体混浊。-:圆圈内仅见碳颗粒集中于中央一点或均匀分散。RPR试验结果报告定性试验(1)阳性:出现1+—4+强度的凝聚反应。(2)阴性:不产生凝聚反应。定量试验滴度:出现凝聚反应的样本最高稀释倍数。RPR试验注意事项实验环境温度应为23—29℃,抗原应保存于4℃冰箱,试验前恢复到室温。抗原应防止冻结,以免抗原被破坏。校准针头。血液标本应防止污染,放置室温应在24小时内完成。试验完毕,应立即观察结果。梅毒螺旋体抗体试验梅毒螺旋体

4、明胶可怜凝聚试验(TPPA)梅毒螺旋体血球凝聚试验(TPHA)荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TP-WB)TPPA试验原理:用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒,此致敏明胶可怜与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合,产生可见的凝聚反应。明胶颗粒为玫瑰红色,便于肉眼观察结果。TPPA试验仪器设备微量振荡器试剂盒:“A”为溶解用液,“B”为标本稀释液,“C”为致敏粒子,“D”为未致敏粒子,“E”为质控血清。U型反应板TPPA试验操作步骤试剂准备:试验前将待检样本和试剂应恢复到室温。加稀释液:每份样本做4孔,加B液至反应孔内,第一孔10

5、0ul,第2至4孔各25ul。样本稀释:取样本血清25ul加至第1孔,混匀后取25ul至第2孔,连续倍比稀释至第4孔,最后1孔混匀后弃去25ul。加对照液:第3孔加D液25ul,第4孔加C液25ul。混合:将反应板置振荡器振荡30秒。反应:将试验板放置2小时左右。TPPA试验结果判读观察加未致敏粒子的第3孔,不出现凝聚为有效使用。观察凝聚反应强度,分级如下:4+:粒子光滑覆盖整个孔底,有时边缘有折叠。3+:粒子光滑覆盖大部分孔底。2+:粒子光滑聚集覆盖孔底,周围有一细胞环。1+:粒子光滑聚集覆盖孔底,周围有一明显细胞环。±:粒子沉集孔底,中央形成一小点。-:粒子紧密沉积孔底中央。TPPA试验结

6、果报告阳性:第3孔不出现凝聚,第4孔1:80稀释样本与致敏粒子产生1+至4+凝聚反应。阴性:为致敏粒子和致敏粒子均不产生凝聚反应。TPPA试验注意事项U型反应板要清洁干净,孔内无异物加入血清后,使用振荡器振荡反应板,不可使用水平旋转仪,更不能用手振荡。试剂盒不可置于0℃以下,防止冻结。不同批号试剂不可混合使用。如未致敏颗粒出现凝聚反应,应将血清进行吸收处理后在进行试验,或改用其他试验方法。梅毒血清学试验结果的临床意义USR、RPR、VDRLTPHA、TPPA、FTA-ABS意义阴性阴性排除梅毒阳性阳性一期梅毒的早期,现症梅毒(梅毒产妇所生的婴儿除外)阳性阴性生物学假阳性阴性阳性早期梅毒治疗后谢

7、谢

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