抗感染喷剂对切线伤模型SD大鼠创伤修复中bFGF及TGF-β1的影响.doc

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1、抗感染喷剂对切线伤模型SD大鼠创伤修复中bFGF及TGF-β1的影响作者:窦群立,刘波,杨锋,钱来军,焦海彬【摘要】目的:观察抗感染喷剂对SD大鼠软组织切线伤模型肉芽组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)的影响,探讨抗感染喷剂在创伤修复中的作用。方法:30只大鼠随机分为空白组、湿润烫伤膏对照组(对照组)和抗感染喷剂治疗组(治疗组)。造模后空白组用生理盐水喷洒创面,对照组用湿润烫伤膏涂抹创面,治疗组用抗感染喷剂喷洒创面。应用免疫组化法测定SD大鼠软组织切线伤模型肉芽组织中bFGF、TGF-β1含量的变化。结果:治疗组及对照组肉芽组织中bFGF、TGF-β1水

2、平高于空白组(P<0.01,P<0.05)。结论:抗感染喷剂能明显提高bFGF、TGF-β1水平,有促进创伤修复的作用。【关键词】抗感染喷剂;创伤修复;bFGF;TGF-β1AbstractObjective:ToobservetheeffectofKangganransprayontheexpressionsofbFGFandTGF-β1ingranulationofskinwoundmodelrats.Method:30SDratswererandomlydividedintoKangganranspraygroup,Meibaoscaldpastegroupandblank

3、group.TheexpressionsofbFGFandTGF-β1ofgranulationtissueweredetectedbyimmunohistochemistry.Result:Comparedwiththeblankgroup,theexpressionsofbFGFandTGF-β1ofgranulationtissueweresignificantlyincreasedinKangganranspraygroupandMeibaoscaldpastegroup.Conclusion:KangganranspraycanincreaseexpressionsofbFGFan

4、dTGF-β1andpromotethehealingofwound.KeywordsKangganranspray,woundrepair,bFGF,TGF-β1目前已公认,生长因子参与调控创伤修复的全过程,其来源主要是巨噬细胞、血小板和内皮细胞,上皮细胞、成纤维细胞和淋巴细胞也可生成生长因子[1]。许多生长因子对创伤修复有促进作用,这已得到充分肯定[2]。本实验目的是研究抗感染喷剂对切线伤模型SD大鼠创伤修复中bFGF及TGF-β1的影响。1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物SD大鼠30只,雌雄各半,体重(200±20)g,清洁级动物,购自西安交通大学医学院动物实验中心。1.1.

5、2药品与试剂4抗感染喷剂由苦参、黄柏、苍术、艾叶、蚤休等组成,以上药物均购自咸阳市药材公司,经陕西中医学院药物研究所鉴定,符合2000年版《中华人民共和国药典》质检标准。上述各味饮片经提纯加工成每毫升相当于原药材3.5g的喷雾剂,由陕西中医学院附属医院制剂中心制备,置冰箱4℃保存备用。美宝牌湿润烫伤膏,国药准字Z20000004,由北京光明中医烧伤创疡研究所汕头经济特区美宝制药厂提供。bFGF抗体由北京中杉生物技术有限公司提供,兔抗人TGF-β1抗体、生物素化羊抗鼠IgG、ABC试剂盒、DAB显色剂均由北京博奥森生物技术有限公司提供。1.1.3实验仪器日本OLYMPUSCHB-213照相显微

6、镜,Mplas-500多媒体彩色病理图文分析系统,石蜡切片机,光学显微镜。1.2实验方法1.2.1造模采用付小兵等[3]报道的皮肤切线伤模型造模方法。将SD大鼠适应性喂养,实验前1d脱毛、称重。SD大鼠腹腔内麻醉(3%戊巴比妥钠25mg/kg),消毒后,用利刀在脊柱两侧切约2cm~4cm线型切口,可深达筋膜,伤腔中植入一种多孔硅胶管约2cm,缝合伤口,手术4h完成。1.2.2分组与给药30只SD大鼠随机分为空白组、湿润烫伤膏对照组(对照组)、抗感染喷剂治疗组(治疗组)3组,每组10只,称重标记。饲养环境温度保持在26℃,室内湿度控制在70%左右,自动通风器保持室内通风。造模成功后,第2d开始

7、用药,大鼠用药量按文献[4]方法折算。治疗组用抗感染喷剂5mL/只喷洒;对照组用湿润烫伤膏在创面处直接涂药1mm厚,覆盖创面周围2cm范围;空白组用生理盐水喷洒创面。以上各组每日治疗2次,共治疗2w。2w后处死动物,取出多孔硅胶管中肉芽组织,立即置入预备好的中性福尔马林缓冲液中单瓶保存,常规石蜡包埋,连续切片(采用多聚赖氨酸处理载玻片)备免疫组化用。1.2.3免疫组化染色石腊包埋、切片、铺片,制备5μm切片,

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