pcr不再是难题 phusion实现更高更快更强

《pcr不再是难题 phusion实现更高更快更强》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、PCR不再是难题Phusion实现更高更快更强关键词： PCR DNA聚合酶 赛默飞世尔2011-05-0600:00 来源： 点击次数：2017今年初，赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。为啥？看中的就是它丰富的PCR产品线，包括DNA聚合酶、迷你PCR仪、新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。Phusion®DNA聚合酶 是Finnzymes的拳头产品，它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的。它的主要特点可用四个词概括：超保真、超快速、超强劲、超特异。这些是如何实现的呢？大家都知道，结构决定功能，那我们先来看看它的结构（下图）。双链DNA结

2、合蛋白（紫色）与一种新型的具有校对功能的类热球菌酶（绿色）融合，形成了一种独特的高性能聚合酶——Phusion®DNA聚合酶。双链DNA结合蛋白的存在提高了聚合酶对双链DNA的亲和力，使得每次酶与双链发生结合反应时都能够掺入更多的核苷酸，并减少了链延伸所需的结合反应次数。Phusion®DNA聚合酶的处理能力大约是PfuDNA聚合酶的10倍，是TaqDNA聚合酶的2倍。这种强大的处理能力不仅缩短了延伸时间，而且提高了酶的扩增性能，使其能够在更短的时间里扩增更长的模板。另外，与传统的具有校对功能的聚合酶相比，Phusion®DNA聚合酶用量更少，而产量更高。正是这些独特的优

3、点，使Phusion®DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。超保真 ——克隆好帮手如果你下一步打算克隆，那选Phusion®DNA聚合酶一定没错了。它的错配率极低，是高保真PCR的理想选择。利用改良的lacI方法检测，在HF缓冲液中，该酶的错配率为4x10-7。这个数值比TaqDNA聚合酶大约低50倍，比PfuDNA聚合酶还要低6倍。需要提醒的是，Phusion®DNA聚合酶产生的是平末端的PCR产物，TA克隆的话可要加A。officiallyestablishedonJuly1,2013,Yibincity,formerlyknownasthebus,in

4、tegratedoriginalrongzhoubuscompanyinYibincityandMetrobuscompany,formedonlyinYibincityofaState-ownedpublictransportenterprises,thecompanyconsistsofoneortwo,thirdDivision.Integrationofpublictransportservicesisnotyetestablished超快速 ——整体循环时间缩短一般的高保真聚合酶都是慢吞吞的家伙，速度远不及Taq酶，但Phusion®DNA聚合酶却不是这样。它的

5、独特结构决定了每次与DNA结合时都能够掺入更多的核苷酸，延伸速度高达15-30s/kb。其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间，进而缩短了整个反应过程。如果你还想更快，可以选择Phusion®FlashHigh-FidelityPCRMasterMix，每kb碱基的延伸时间仅为15秒或更少。由于其结构独特，Phusion®DNA聚合酶的效率也非常高。在任何PCR反应中，该酶的用量显著低于其他常见的聚合酶。Phusion®DNA聚合酶的高速度和高效率使得它能在最短时间内获得高产量。超强劲 ——减少反应失败几率Finnzymes曾做过实验，从Thermussp.基因组文库中随机

6、挑选16个克隆，并用3种不同的耐热DNA聚合酶进行扩增。结果显示，Phusion®DNA聚合酶具有强劲的性能和速度，它能够成功扩增出随机挑选的16个片段中的15个（94%），并且产量很高。而PfuDNA聚合酶的成功率仅为56%，TaqDNA聚合酶成功率也才62%，二者的产量明显低于Phusion®DNA聚合酶。而且从图中可以看出，Phusion®DNA聚合酶的延伸时间和酶用量均显著低于Pfu酶，与Taq相当，但产量更高。这些研究结果进一步证实了Phusion®DNA聚合酶的优异性能。officiallyestablishedonJuly1,2013,Yibincity,f

7、ormerlyknownasthebus,integratedoriginalrongzhoubuscompanyinYibincityandMetrobuscompany,formedonlyinYibincityofaState-ownedpublictransportenterprises,thecompanyconsistsofoneortwo,thirdDivision.Integrationofpublictransportservicesisnotyetestablished超特异 ——减少非特异扩增如果你的模板