资源描述：
《gb 5009.118-2016 食品安全国家标准 食品中t-2毒素的测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准GB5009.118—2016食品安全国家标准食品中T-2毒素的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布国家食品药品监督管理总局GB5009.118—2016前言本标准代替GB/T5009.118—2008《谷物中T-2毒素的测定》、GB/T23501—2009《食品中T-2毒素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》、SN/T1771—2006《进出口粮谷中T-2毒素的测定免疫亲和柱-液相色谱法》、SN/T2676—2010《进出口粮谷中T-
2、2毒素的检测方法酶联免疫吸附法》。本标准与GB/T5009.118—2008相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品中T-2毒素的测定”;———增加了适用范围;———增加了直接ELISA法二。ⅠGB5009.118—2016食品安全国家标准食品中T-2毒素的测定1范围本标准规定了食品中T-2毒素的测定方法。本标准第一法适用于粮食及粮食制品,酒类,酱油、醋、酱及酱制品中T-2毒素含量的测定,第二法、第三法适用于粮食及粮食制品中T-2毒素的测定。第一法免疫亲和层析净化液相色谱法2原理用提取液提取试样
3、中的T-2毒素,经免疫亲和柱净化、衍生后,用高效液相色谱荧光检测器测定,外标法定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1甲醇(CH3OH):色谱纯。3.1.2乙腈(CH3CN):色谱纯。3.1.3甲苯(C6H5CH3):色谱纯。3.1.44-二甲基氨基吡啶。3.1.51-蒽腈(1-anthroylnitrile,1-AN)。3.2试剂配制3.2.1提取液:甲醇-水(8∶2,体积比)。3.2.24-二甲基氨基吡啶溶液:准确称取0.0325g4-二甲基
4、氨基吡啶于100mL容量瓶中,用甲苯定容至刻度。3.2.31-蒽腈溶液:准确称取0.030g1-蒽腈于100mL容量瓶中,用甲苯定容至刻度。3.3标准品T-2毒素(C24H34O9,CAS号:21259-20-1):纯度≥98.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。3.4标准溶液配制3.4.1标准储备液:准确称取适量的T-2毒素标准品(精确至0.0001g),用乙腈溶解,配制成浓度为1GB5009.118—2016100μg/mL的标准储备液,-18℃以下避光保存。3.4.2标准工作液:根据需要准确吸取适量
5、的标准储备液,用乙腈稀释,配制成5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL的标准工作液,4℃避光保存。3.5材料3.5.1T-2毒素免疫亲和柱:柱规格1mL或3mL,柱容量≥1500ng,或等效柱。3.5.2玻璃纤维滤纸:直径11cm,孔径1.5μm,无荧光特性。4仪器和设备4.1高效液相色谱仪:配有荧光检测器。4.2高速粉碎机:转速≥12000r/min。4.3均质器:转速≥12000r/min。4.4氮吹仪。4.5离心机。4.6涡旋混合仪。4.7空气压力泵。4.8试验筛:孔径
6、1.0mm。4.9天平:感量0.0001g和0.01g。4.10超声波发生器:功率>180W。4.11玻璃注射器:10mL。5分析步骤5.1提取5.1.1粮食及粮食制品将样品研磨,硬质的粮食等用高速粉碎机磨细并通过试验筛。称取25.0g(精确到0.1g)过筛样品于容量瓶中,用提取液定容至100mL,转移至均质杯中,以均质器高速搅拌提取2min,定量滤纸过滤。移取10.0mL滤液加入40mL水稀释混匀,经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,滤液备用。5.1.2酱油、醋、酱及酱制品称取25.0g(精确到0.1g)混匀的试样,用甲
7、醇定容至50.0mL,超声提取10min,定量滤纸过滤。移取10.0mL滤液加入40mL水稀释混匀,经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,滤液备用。5.1.3酒类取脱气酒类试样(含二氧化碳的酒类使用前先置于4℃冰箱冷藏30min,过滤或超声脱气)或其他不含二氧化碳的酒类试样20.0g(精确到0.1g)于50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,定量滤纸过滤。移取10.0mL滤液加入40mL水稀释,经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,滤液备用。5.2净化和洗脱将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下,准确移取10.0mL5.1中的提取滤液,注
8、入玻璃注射器中。将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约1滴/s的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至空气进2GB5009.118—2016入亲和柱中。用10mL水淋洗亲和柱,流速为1滴/s~2滴/s,直至空气进入亲和柱中,弃去全部流出液,抽干小柱。准确加入1.0mL甲醇洗脱,流速约为1滴/s,收集洗脱液。5.3衍生5.3.1标准工作液的衍生:
